摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第1章 引言 | 第10-17页 |
1 辣椒栽培现状 | 第10页 |
2 植物抗逆机制 | 第10-14页 |
·植物抗逆机制的分类 | 第10-11页 |
·国内外研究现状 | 第11-14页 |
3 先进酵母双杂系统的应用及优势 | 第14-16页 |
·传统的酵母双杂系统及其局限性 | 第14-15页 |
·先进的酵母双杂系统及其优势 | 第15-16页 |
4 本课题研究的目的及意义 | 第16-17页 |
第2章 辣椒酵母双杂交均一化 cDNA 文库的构建 | 第17-27页 |
1 材料与方法 | 第17-21页 |
·试验材料 | 第17页 |
·试验方法 | 第17-21页 |
2 结果与分析 | 第21-25页 |
·辣椒幼苗总 RNA 提取 | 第21页 |
·mRNA 反转录为 cDNA | 第21-22页 |
·均一化反应 | 第22页 |
·酶切及割取 1kb 以上片段 | 第22-23页 |
·载体的制备 | 第23页 |
·文库检测 | 第23-25页 |
3 小结与讨论 | 第25-27页 |
·高效获得全长 cDNA | 第25页 |
·高效简易的文库均一化 | 第25-27页 |
第3章 辣椒 CaWRKY40 互作蛋白的筛选和鉴定 | 第27-43页 |
1 引言 | 第27-29页 |
2 材料与方法 | 第29-36页 |
·试验材料 | 第29页 |
·试验方法 | 第29-36页 |
3 结果与分析 | 第36-39页 |
·载体构建 | 第36页 |
·3-AT 自激活检验及文库筛选 | 第36页 |
·两轮 X-gal 检测阳性克隆 | 第36-37页 |
·互作蛋白的筛选与分析 | 第37-39页 |
4 小结与讨论 | 第39-43页 |
·DUALhunter 技术的应用 | 第39页 |
·文库筛选后续工作的问题 | 第39-40页 |
·筛选到的阳性克隆与 CaWRKY40 关系的讨论 | 第40-43页 |
第4章 辣椒 CaWRKY3 互作蛋白的筛选和鉴定 | 第43-49页 |
1 材料与方法 | 第43页 |
2 结果与分析 | 第43-46页 |
·载体构建 | 第43页 |
·3-AT 自激活检验及文库筛选 | 第43页 |
·两轮 X-gal 检测阳性克隆 | 第43-44页 |
·互作蛋白的筛选与分析 | 第44-46页 |
3 小结与讨论 | 第46-49页 |
·文库筛选流程的优化 | 第46页 |
·筛选到的阳性克隆与 CaWRKY3 关系的讨论 | 第46-49页 |
参考文献 | 第49-52页 |
附录 | 第52-62页 |
附录 1 缩略词及英汉对照 | 第52-53页 |
附录 2 试剂与缓冲液配制 | 第53-55页 |
附录 3 DNAMarker 示意图 | 第55-56页 |
附录 4 阳性克隆比对信息 | 第56-57页 |
附录 5 部分阳性克隆序列信息 | 第57-61页 |
附录 6 相关质粒图谱 | 第61-62页 |
致谢 | 第62页 |