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甘蔗活性氧代谢途径关键酶基因的克隆与表达分析

摘要第1-11页
Abstract第11-15页
1 前言第15-23页
   ·活性氧代谢概述第15-17页
     ·活性氧的产生第15页
     ·活性氧的清除机制第15-16页
     ·活性氧与病原互作研究第16-17页
     ·逆境胁迫对植物活性氧防御系统的影响第17页
   ·抗坏血酸过氧化物酶基因(APX)及其相关研究进展第17-19页
     ·APX 概述第17-18页
     ·APX 的分子生物学研究进展第18页
     ·APX 基因功能研究进展第18-19页
   ·过氧化氢酶基因(CAT)及其相关研究进展第19-21页
     ·CAT 概述第19页
     ·CAT 基因的克隆与功能鉴定研究进展第19-20页
     ·植物在非生物逆境胁迫下的 CAT 研究第20页
     ·植物与病原互作中的 CAT 研究第20-21页
   ·电子克隆及其在甘蔗中的应用第21-22页
     ·电子克隆的概念第21页
     ·电子克隆在甘蔗基因克隆中的应用第21-22页
   ·本研究的目的和意义第22-23页
2 材料与方法第23-34页
   ·实验材料第23-24页
     ·植物材料与病原菌株第23页
     ·实验材料的制备第23页
     ·实验所用的载体、质粒与酶活测定试剂第23-24页
     ·分子生物学试剂与耗材第24页
     ·仪器与设备第24页
   ·实验方法第24-34页
     ·甘蔗 SoAPX、SoCAT 1 和 SoCAT 2 的电子克隆与生物信息学分析第24-25页
     ·甘蔗总 RNA 的提取第25-26页
     ·第一链 cDNA 的反转录第26页
     ·甘蔗 SoAPX、SoCAT 1 和 SoCAT 2 的 RT-PCR 扩增与片段分析第26-30页
     ·甘蔗 SoCAT 1 基因的原核表达分析第30-32页
     ·黑穗病胁迫下甘蔗 APX 和 CAT 蛋白的酶活测定第32-33页
     ·甘蔗 SoAPX、SoCAT 1 和 SoCAT 2 的荧光定量 PCR 表达分析第33-34页
3 结果与分析第34-68页
   ·甘蔗 SoAPX 基因的克隆与表达分析第34-46页
     ·甘蔗 SoAPX 基因的电子克隆与生物信息学分析第34-41页
       ·甘蔗 SoAPX 基因的电子克隆第34-36页
       ·甘蔗 SoAPX 蛋白的保守结构域分析第36页
       ·SoAPX 编码氨基酸的一级结构预测第36页
       ·甘蔗 SoAPX 蛋白信号肽预测和分析第36-37页
       ·甘蔗 SoAPX 蛋白疏水性\亲水性的预测和分析第37-38页
       ·甘蔗 SoAPX 蛋白的亚细胞定位第38页
       ·SoAPX 蛋白跨膜结构域预测第38页
       ·甘蔗 SoAPX 蛋白二级结构预测和分析第38-39页
       ·甘蔗 SoAPX 蛋白三维结构预测第39页
       ·甘蔗 SoAPX 蛋白的氨基酸同源性分析第39-41页
     ·甘蔗 SoAPX 的 RT-PCR 扩增与序列分析第41-43页
       ·SoAPX 的 RT-PCR 扩增第41页
       ·SoAPX 目的片段的连接转化第41-42页
       ·测序结果比对第42页
       ·重组子质粒 DNA 提取第42-43页
     ·黑穗病菌胁迫下甘蔗 APX 活性的变化第43-44页
     ·甘蔗 SoAPX 在黑穗病菌胁迫下的表达分析第44-46页
   ·甘蔗 SoCAT 1 和 SoCAT 2 基因的克隆与表达分析第46-68页
     ·甘蔗 SoCAT 1 和 SoCAT 2 基因的生物信息学分析预测第46-57页
       ·甘蔗 SoCAT 1 和 SoCAT 2 基因的电子克隆第46-50页
       ·甘蔗 SoCAT 1 和 SoCAT 2 理化性质的预测与分析第50页
       ·甘蔗 SoCAT 1 和 SoCAT 2 蛋白疏水性/亲水性的预测和分析第50-51页
       ·甘蔗 SoCAT 1 和 SoCAT 2 蛋白信号肽预测和分析第51-52页
       ·甘蔗 SoCAT 1 和 SoCAT 2 蛋白的亚细胞定位第52-53页
       ·甘蔗 SoCAT 1 和 SoCAT 2 蛋白跨膜结构域预测第53-54页
       ·甘蔗 SoCAT 1 和 SoCAT 2 蛋白二级结构预测与分析第54页
       ·甘蔗 SoCAT 1 和 SoCAT 2 蛋白三维结构预测第54-55页
       ·甘蔗 SoCAT 1 和 SoCAT 2 蛋白的氨基酸同源性分析第55-57页
     ·甘蔗 SoCAT 1 和 SoCAT 2 基因的 RT-PCR 扩增与序列分析第57-61页
       ·SoCAT 1 和 SoCAT 2 基因的 RT-PCR 扩增第57-58页
       ·SoCAT 1 和 SoCAT 2 基因的连接转化第58-59页
       ·测序结果比对第59-60页
       ·质粒的提取第60-61页
     ·甘蔗 SoCAT 1 基因的原核表达分析第61-62页
     ·甘蔗 CAT 酶活性在黑穗病菌胁迫下的变化第62-63页
     ·甘蔗 SoCAT 1 和 SoCAT 2 在黑穗病菌胁迫下的表达分析第63-68页
4 讨论与小结第68-73页
   ·讨论第68-71页
     ·电子克隆及生物信息学分析第68页
     ·甘蔗 SoAPX、SoCAT 1 和 SoCAT 2 基因的克隆研究第68-69页
     ·SoAPX、SoCAT 1 和 SoCAT 2 在甘蔗-病原互作系统中的作用第69-70页
     ·SoAPX、SoCAT 1 和 SoCAT 2 基因表达与相对酶活的关系第70-71页
     ·SoCAT 1 基因在原核系统上对 PEG 胁迫的应答分析第71页
   ·小结第71-73页
参考文献第73-78页
附录第78-79页
致谢第79页
攻读硕士期间发表的论文第79页

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