| 致谢 | 第1-11页 |
| 摘要 | 第11-14页 |
| ABSTRACT | 第14-18页 |
| 缩略词 | 第18-19页 |
| 引言 | 第19-21页 |
| 第一篇 文章综述和研究思路 | 第21-50页 |
| 第一章 NSP和NSP酶制剂类饲料添加剂的研究概况 | 第21-32页 |
| 1 大麦在中国的种植分布 | 第21-22页 |
| 2 大麦中的抗营养因子NSP | 第22-23页 |
| 3 NSP的物理特性 | 第23-24页 |
| 4 NSP在猪体内的消化、吸收和代谢 | 第24-25页 |
| ·NSP在猪体内的消化、吸收 | 第24页 |
| ·NSP在猪体内的代谢 | 第24-25页 |
| 5 NSP对猪的营养特性 | 第25-26页 |
| ·NSP对猪的正面营养作用 | 第25-26页 |
| ·NSP对猪的负面营养作用 | 第26页 |
| 6 日粮中NSP抗营养机理 | 第26-27页 |
| 7 克服NSP抗营养作用的措施 | 第27-28页 |
| 8 NSP酶制剂的安全性 | 第28页 |
| 9 NSP酶制剂在猪生产中的应用效果 | 第28-29页 |
| 10 NSP酶制剂的作用机理 | 第29-31页 |
| 11 结语 | 第31-32页 |
| 第二章 GH-IGF-I轴和胃肠激素胃泌素的研究概述 | 第32-47页 |
| 1 GH-IGF-I轴 | 第33-41页 |
| ·GH-IGF-I轴的组成 | 第33页 |
| ·GH | 第33-38页 |
| ·IGF-I | 第38-41页 |
| 2 GAS | 第41-46页 |
| ·GAS的分类 | 第42页 |
| ·GAS的生理功能 | 第42-44页 |
| ·GAS合成和分泌的调节 | 第44-46页 |
| 3 结语 | 第46-47页 |
| 第三章 本研究的目的、意义及主要内容 | 第47-50页 |
| 第二篇 研究工作报告 | 第50-135页 |
| 第四章 基因克隆及半定量RT-PCR法测定基因mRNA丰度条件的优化 | 第50-76页 |
| 第一节 GAS、GH、IGF-I和β-actin基因片段的克隆 | 第53-69页 |
| 1 基因克隆策略 | 第53页 |
| 2 试验材料 | 第53-56页 |
| ·动物材料 | 第53-54页 |
| ·菌种及载体 | 第54页 |
| ·仪器设备和试剂 | 第54页 |
| ·引物 | 第54-55页 |
| ·培养基及主要试剂的配制 | 第55-56页 |
| 3 试验方法 | 第56-63页 |
| ·总RNA的提取 | 第56页 |
| ·RNA含量的测定 | 第56-57页 |
| ·反转录 | 第57页 |
| ·PCR反应 | 第57-58页 |
| ·PCR产物电泳,检测目的条带是否与设计大小相等 | 第58页 |
| ·PCR产物的割胶回收 | 第58-59页 |
| ·割胶回收的PCR产物与pGEM-T easy Vector连接 | 第59页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备与目的DNA的热激转化 | 第59-60页 |
| ·重组克隆的筛选、重组质粒的提取与鉴定 | 第60-62页 |
| ·重组DNA核苷酸序列测定分析 | 第62-63页 |
| 4 试验结果 | 第63-67页 |
| ·GAS、GH、IGF-I和β-actin基因RT-PCR产物电泳结果 | 第63-64页 |
| ·PCR产物克隆及重组质粒鉴定 | 第64-65页 |
| ·重组克隆中插入片段的序列分析 | 第65-67页 |
| 5 讨论 | 第67-68页 |
| 6 小结 | 第68-69页 |
| 第二节 半定量RT-PCR法测定GAS、IGF-I和GH mRNA丰度的条件优化 | 第69-76页 |
| 1 试验材料 | 第69页 |
| ·动物材料 | 第69页 |
| ·仪器设备和试剂 | 第69页 |
| 2 试验方法 | 第69-71页 |
| ·总RNA的提取 | 第69页 |
| ·RNA含量的测定 | 第69页 |
| ·反转录 | 第69-70页 |
| ·PCR反应 | 第70-71页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第71页 |
| 3 试验结果 | 第71-74页 |
| ·Mg~(2+)浓度对GAS、IGF-I、GH及内标β-actin基因扩增效率的影响 | 第71-72页 |
| ·循环数对GAS、GH、IGF-I及内标β-actin基因扩增效率的影响 | 第72-74页 |
| 4 讨论 | 第74-75页 |
| 5 小结 | 第75-76页 |
| 第五章 大麦饲粮中添加β-葡聚糖、木聚糖复合酶对断奶仔猪胃窦GAS mRNA丰度、血清GAS水平及其它与生长有关激素和生化指标的影响 | 第76-87页 |
| 1 试验材料 | 第77-79页 |
| ·β-葡聚糖、木聚糖复合酶 | 第77-78页 |
| ·试验动物 | 第78页 |
| ·试验日粮 | 第78页 |
| ·试验设计和饲养管理 | 第78-79页 |
| 2 试验方法 | 第79-81页 |
| ·样品采集 | 第79页 |
| ·样品测定 | 第79-80页 |
| ·数据分析及统计 | 第80-81页 |
| 3 结果 | 第81-83页 |
| ·生长性能 | 第81页 |
| ·血清生化指标 | 第81-82页 |
| ·血清激素水平 | 第82页 |
| ·胃窦GAS mRNA丰度 | 第82-83页 |
| 4 讨论 | 第83-85页 |
| ·β-葡聚糖、木聚糖复合酶对断奶仔猪生长性能的影响 | 第83页 |
| ·β-葡聚糖、木聚糖复合酶对断奶仔猪血清生化指标的影响 | 第83-84页 |
| ·β-葡聚糖、木聚糖复合酶对断奶仔猪血清生长相关激素水平的影响 | 第84-85页 |
| ·β-葡聚糖、木聚糖复合酶对胃窦GAS mRNA丰度的影响 | 第85页 |
| 5 小结 | 第85-87页 |
| 第六章 大麦饲粮中添加β-葡聚糖、木聚糖复合酶对断奶仔猪GH-IGF-I轴的影响及其机理探讨 | 第87-111页 |
| 第一节 大麦饲粮中添加β-葡聚糖、木聚糖复合酶对断奶仔猪GH-IGF-I生长轴的影响 | 第90-100页 |
| 1 试验材料 | 第90页 |
| ·β-葡聚糖、木聚糖复合酶 | 第90页 |
| ·试验动物 | 第90页 |
| ·试验日粮 | 第90页 |
| ·试验设计和饲养管理 | 第90页 |
| 2 试验方法 | 第90-93页 |
| ·样品采集 | 第90页 |
| ·样品测定 | 第90-92页 |
| ·数据分析及统计 | 第92-93页 |
| 3 结果 | 第93-96页 |
| ·生长激素脉冲分泌模式及其特征 | 第93-94页 |
| ·屠宰血清IGF-I水平 | 第94页 |
| ·垂体GH丰度 | 第94-95页 |
| ·肝脏IGF-I丰度 | 第95-96页 |
| 4 讨论 | 第96-99页 |
| ·β-葡聚糖、木聚糖复合酶对断奶仔猪血清GH动态分泌及腺垂体GHmRNA丰度的影响 | 第96-97页 |
| ·β-葡聚糖、木聚糖复合酶对断奶仔猪血清IGF-I水平及肝脏IGF-ImRNA丰度的影响 | 第97-99页 |
| 5 小结 | 第99-100页 |
| 第二节 大麦饲粮中添加β-葡聚糖、木聚糖复合酶对断奶仔猪GH-IGF-I生长轴影响的机理探讨 | 第100-111页 |
| 1 试验材料 | 第100-102页 |
| ·动物组织 | 第100页 |
| ·主要仪器设备 | 第100页 |
| ·试剂 | 第100-101页 |
| ·试剂的配制 | 第101-102页 |
| 2 试验方法 | 第102-104页 |
| ·猪腺垂体细胞和肝脏细胞的原代培养 | 第102-103页 |
| ·原代培养细胞的生长状态及形态观察 | 第103页 |
| ·细胞增殖试验 | 第103-104页 |
| ·细胞周期分析 | 第104页 |
| ·细胞培养液中激素浓度测定 | 第104页 |
| ·数据分析及统计 | 第104页 |
| 3 结果 | 第104-108页 |
| ·细胞形态 | 第104-105页 |
| ·细胞增殖率 | 第105-106页 |
| ·细胞周期 | 第106-107页 |
| ·激素浓度 | 第107-108页 |
| 4 讨论 | 第108-109页 |
| 5. 小结 | 第109-111页 |
| 第七章 大麦饲粮中添加β-葡聚糖、木聚糖复合酶对断奶仔猪内源消化酶活性和消化器官形态结构的影响 | 第111-125页 |
| 1 试验材料 | 第112-113页 |
| ·β-葡聚糖、木聚糖复合酶 | 第112页 |
| ·试验动物 | 第112页 |
| ·试验日粮 | 第112页 |
| ·试验设计和饲养管理 | 第112-113页 |
| 2 试验方法 | 第113-115页 |
| ·样品采集 | 第113页 |
| ·样品测定 | 第113-115页 |
| ·数据分析及统计 | 第115页 |
| 3 结果 | 第115-120页 |
| ·内脏器官相对重率 | 第115-116页 |
| ·胰脏消化酶活性 | 第116页 |
| ·胃粘膜和胃内容物消化酶活性 | 第116页 |
| ·空肠、回肠粘膜消化酶活性 | 第116-117页 |
| ·消化器官形态 | 第117-120页 |
| 4 讨论 | 第120-124页 |
| ·β-葡聚糖、木聚糖复合酶对内脏器官相对重率的影响 | 第120页 |
| ·β-葡聚糖、木聚糖复合酶对胰脏消化酶活性的影响 | 第120-121页 |
| ·β-葡聚糖、木聚糖复合酶对胃肠道消化酶活性的影响 | 第121-122页 |
| ·β-葡聚糖、木聚糖复合酶对消化器官形态结构的影响 | 第122-124页 |
| 5 小结 | 第124-125页 |
| 第八章 大麦饲粮中添加β-葡聚糖、木聚糖复合酶对断奶仔猪肠道菌群、细菌酶活性和总SCFA浓度的影响 | 第125-135页 |
| 1 试验材料 | 第127页 |
| ·β-葡聚糖、木聚糖复合酶 | 第127页 |
| ·试验动物 | 第127页 |
| ·试验日粮 | 第127页 |
| ·试验设计和饲养管理 | 第127页 |
| 2 试验方法 | 第127-129页 |
| ·样品采集 | 第127页 |
| ·样品测定 | 第127-129页 |
| ·数据分析及统计 | 第129页 |
| 3 结果 | 第129-131页 |
| ·腹泻频率 | 第129-130页 |
| ·细菌数量 | 第130页 |
| ·细菌酶活性 | 第130-131页 |
| ·盲肠内容物pH、乳酸和总SCFA浓度 | 第131页 |
| 4 讨论 | 第131-134页 |
| ·β-葡聚糖、木聚糖复合酶对断奶仔猪腹泻频率的影响 | 第131-132页 |
| ·β-葡聚糖、木聚糖复合酶对盲肠菌群的影响 | 第132-133页 |
| ·β-葡聚糖、木聚糖复合酶对细菌酶活性的影响 | 第133-134页 |
| ·β-葡聚糖、木聚糖复合酶对盲肠内容物pH和总SCFA含量的影响 | 第134页 |
| 5 小结 | 第134-135页 |
| 第三篇 提示、创新点及后续研究展望 | 第135-137页 |
| 提示 | 第135页 |
| 创新点 | 第135页 |
| 后续研究展望 | 第135-137页 |
| 参考文献 | 第137-160页 |
| 附录 pGEM-T easy vector图谱 | 第160-161页 |
| 作者简历 | 第161页 |
