| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-46页 |
| 1 杀线虫性真菌的分类 | 第19-20页 |
| 2 杀线虫性真菌的研究历史 | 第20-25页 |
| 3 捕食线虫性真菌对寄主线虫的作用机制 | 第25-33页 |
| ·捕食器的形成过程与机理 | 第26-28页 |
| ·捕食线虫性真菌对线虫的吸引 | 第28-29页 |
| ·捕食线虫性真菌对线虫的识别与黏附 | 第29-32页 |
| ·捕食线虫性真菌对线虫的侵染和消解 | 第32-33页 |
| 4 杀线虫真菌活性代谢物 | 第33-40页 |
| ·杀线虫真菌活性代谢物 | 第34-38页 |
| ·担子菌及其杀线虫活性代谢物 | 第34-35页 |
| ·子囊菌及其杀线虫活性代谢物 | 第35-36页 |
| ·半知菌及其杀线虫活性代谢物 | 第36-37页 |
| ·无孢菌及其杀线虫活性代谢物 | 第37页 |
| ·接合菌及其杀线虫活性代谢物 | 第37-38页 |
| ·产毒真菌活性代谢物研究方向 | 第38-40页 |
| ·供试线虫的选择 | 第38页 |
| ·筛选的范围扩大 | 第38-39页 |
| ·低分子量毒素 | 第39页 |
| ·高分子量毒素 | 第39页 |
| ·相关研究进展 | 第39-40页 |
| 5 捕食线虫性真菌分子生物学研究 | 第40-43页 |
| ·捕食线虫性真菌分子系统学 | 第40-41页 |
| ·捕食线虫性真菌相关基因克隆 | 第41-43页 |
| ·侵染线虫相关基因的克隆 | 第41页 |
| ·捕食器相关基因的克隆 | 第41-43页 |
| 6 捕食线虫性真菌在线虫生物防治中的应用模式 | 第43-44页 |
| 7 动物寄生性线虫生物控制未来研究方向及本研究的目的和意义 | 第44-46页 |
| 第二章 试验研究 | 第46-143页 |
| 试验一 少孢节丛孢菌捕食线虫过程的研究 | 第46-61页 |
| 1 材料与方法 | 第47-51页 |
| ·材料 | 第47-48页 |
| ·主要试验仪器 | 第47页 |
| ·主要化学试剂 | 第47页 |
| ·虫种与菌种来源 | 第47页 |
| ·主要溶液配制 | 第47页 |
| ·主要培养基制备 | 第47-48页 |
| ·方法 | 第48-51页 |
| ·秀丽新杆线虫培养与收集 | 第48页 |
| ·捕食过程染色镜检观察 | 第48-49页 |
| ·捕食过程组织切片观察 | 第49-50页 |
| ·捕食过程扫描电镜观察 | 第50页 |
| ·捕食过程透射电镜观察 | 第50-51页 |
| 2 结果 | 第51-58页 |
| ·普通光镜下少孢节丛孢菌对线虫捕食过程的观察 | 第51-53页 |
| ·不同染料染色结果 | 第53页 |
| ·少孢节丛孢菌捕食线虫组织切片观察结果 | 第53-56页 |
| ·少孢节丛孢菌捕食线虫扫描电镜观察结果 | 第56-57页 |
| ·少孢节丛孢菌捕食线虫透射电镜观察结果 | 第57-58页 |
| 3 讨论 | 第58-60页 |
| 4 小结 | 第60-61页 |
| 试验二 不同碳氮源及其比例和培养基初始PH 值对少孢节丛孢菌生长的影响 | 第61-71页 |
| 1 材料和方法 | 第61-64页 |
| ·材料 | 第61-62页 |
| ·主要实验设备 | 第61-62页 |
| ·主要实验药品 | 第62页 |
| ·捕食线虫性真菌菌株 | 第62页 |
| ·方法 | 第62-64页 |
| ·不同培养基的制备 | 第62-63页 |
| ·少孢节丛孢菌转接培养 | 第63页 |
| ·菌丝的接种和培养 | 第63页 |
| ·液体培养基中菌丝的收集和称重 | 第63页 |
| ·数据的处理 | 第63-64页 |
| 2 结果 | 第64-69页 |
| ·不同碳源对少孢节丛孢菌菌丝生长的影响 | 第64-65页 |
| ·不同氮源对少孢节丛孢菌菌丝生长的影响 | 第65页 |
| ·不同碳氮比值对少孢节丛孢菌菌丝生长的影响 | 第65-67页 |
| ·不同初始PH 值对少孢节丛孢菌菌丝生长的影响 | 第67-69页 |
| 3 讨论 | 第69-70页 |
| 4 小结 | 第70-71页 |
| 试验三 氨基酸对少孢节丛孢菌生长和捕食器产生影响研究 | 第71-83页 |
| 1 材料与方法 | 第71-73页 |
| ·材料 | 第71-72页 |
| ·方法 | 第72-73页 |
| ·溶液配制和线虫幼虫培养 | 第72页 |
| ·氨基酸对少孢节丛孢菌生长率及捕食器产生的影响 | 第72页 |
| ·氨基酸诱导的少孢节丛孢菌捕食器对线虫幼虫的捕食作用 | 第72-73页 |
| 2 结果 | 第73-80页 |
| ·氨基酸对菌丝生长率及捕食器产生的影响 | 第73-79页 |
| ·氨基酸对菌丝生长率的影响 | 第73-75页 |
| ·氨基酸对菌丝生长初期捕食器产生的影响 | 第75-77页 |
| ·氨基酸对菌丝生长中期捕食器产生的影响 | 第77-79页 |
| ·氨基酸对菌丝生长后期捕食器产生的影响 | 第79页 |
| ·不同氨基酸诱导的捕食器对线虫第3 期幼虫的捕食效力 | 第79-80页 |
| 3 讨论 | 第80-82页 |
| 4 小结 | 第82-83页 |
| 试验四 少孢节从孢菌及线虫第三期幼虫生化组分分析 | 第83-95页 |
| 1 材料与方法 | 第83-90页 |
| ·材料 | 第83-84页 |
| ·主要设备与药品 | 第83页 |
| ·主要化学溶液 | 第83-84页 |
| ·捕食性真菌和线虫第三期幼虫 | 第84页 |
| ·方法 | 第84-90页 |
| ·少孢节丛孢菌分生孢子的培养 | 第84-85页 |
| ·含捕食器菌丝的培养与收集 | 第85页 |
| ·普通营养菌丝的培养与收集 | 第85页 |
| ·少孢节丛孢菌和线虫第三期幼虫粗蛋白质测定 | 第85-86页 |
| ·少孢节丛孢菌和线虫第三期幼虫氨基酸测定 | 第86页 |
| ·少孢节丛孢菌总糖的测定 | 第86-87页 |
| ·少孢节丛孢菌总蛋白电泳(SDS-PAGE) | 第87-89页 |
| ·少孢节丛孢菌普通营养菌丝和含捕食器菌丝蛋白酶活性测定 | 第89-90页 |
| 2 结果 | 第90-92页 |
| ·少孢节丛孢菌和第三期线虫幼虫粗蛋白质含量 | 第90页 |
| ·少孢节丛孢菌和第三期线虫幼虫氨基酸含量 | 第90-91页 |
| ·普通营养菌丝和含捕食器菌丝总糖含量 | 第91页 |
| ·普通营养菌丝和含捕食器菌丝全蛋白质SDS-PAGE 电泳结果 | 第91-92页 |
| ·普通营养菌丝和含捕食器菌丝蛋白酶活性测定 | 第92页 |
| 3 讨论 | 第92-93页 |
| 4 小结 | 第93-95页 |
| 试验五 少孢节丛孢菌表面聚合物提取及其作用与性质研究 | 第95-119页 |
| 1 材料与方法 | 第95-103页 |
| ·材料 | 第95-97页 |
| ·方法 | 第97-103页 |
| ·少孢节丛孢菌表面聚合物的提取 | 第97页 |
| ·少孢节丛孢菌表面聚合物的透析与浓缩 | 第97-98页 |
| ·少孢节丛孢菌表面聚合物凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第98页 |
| ·各种提取液对菌丝生长与黏附捕获线虫作用的影响 | 第98-99页 |
| ·少孢节丛孢菌表面聚合物体外杀线虫活性试验 | 第99页 |
| ·少孢节丛孢菌表面聚合物中蛋白质含量测定 | 第99-100页 |
| ·少孢节丛孢菌表面聚合物中蛋白酶活性检测 | 第100页 |
| ·PH 值对少孢节丛孢菌表面聚合物中蛋白酶活性的影响 | 第100页 |
| ·温度对少孢节丛孢菌表面聚合物中蛋白酶活性的影响 | 第100-101页 |
| ·蛋白酶抑制剂对少孢节丛孢菌表面聚合物中蛋白酶活性的影响 | 第101页 |
| ·少孢节丛孢菌表面聚合物中磷酸酶活性的测定 | 第101-102页 |
| ·纤维素酶和链酶蛋白酶E 对少孢节丛孢菌菌丝生长和捕获线虫作用的影响 | 第102页 |
| ·蛋白酶抑制剂对少孢节丛孢菌生长及黏附捕获和致死线虫能力的影响 | 第102-103页 |
| 2 结果 | 第103-115页 |
| ·少孢节丛孢菌表面聚合物SDS-PAGE 电泳结果 | 第103-104页 |
| ·各种提取液对菌丝生长和捕食器黏附捕获作用的影响 | 第104-106页 |
| ·提取液对菌丝生长的影响 | 第104-105页 |
| ·提取液对捕食器黏附捕获作用的影响 | 第105-106页 |
| ·少孢节丛孢菌表面聚合物体外杀线虫作用 | 第106-107页 |
| ·少孢节丛孢菌表面聚合物蛋白质含量测定结果 | 第107-108页 |
| ·少孢节丛孢菌表面聚合物蛋白酶活性检测结果 | 第108页 |
| ·PH 值对少孢节丛孢菌表面聚合物蛋白酶活性影响结果 | 第108页 |
| ·温度对少孢节丛孢菌表面聚合物蛋白酶活性影响结果 | 第108-109页 |
| ·蛋白酶抑制剂对少孢节丛孢菌表面聚合物中蛋白酶活性影响结果 | 第109页 |
| ·少孢节丛孢菌表面聚合物磷酸酶活性测定结果 | 第109-110页 |
| ·纤维素酶和链酶蛋白酶E 对少孢节丛孢菌生长与捕食作用影响 | 第110-111页 |
| ·纤维素酶和链酶蛋白酶E 对少孢节丛孢菌生长影响 | 第110-111页 |
| ·纤维素酶和链酶蛋白酶E 对少孢节丛孢菌黏附捕获线虫作用影响 | 第111页 |
| ·蛋白酶抑制剂对少孢节丛孢菌生长及黏附捕获线虫能力影响 | 第111-115页 |
| ·蛋白酶抑制剂对少孢节丛孢菌生长影响 | 第111-113页 |
| ·蛋白酶抑制剂对少孢节丛孢菌致死线虫作用影响 | 第113-114页 |
| ·蛋白酶抑制剂处理线虫后对少孢节丛孢菌捕获和致死线虫作用影响 | 第114-115页 |
| 3 讨论 | 第115-118页 |
| 4 小结 | 第118-119页 |
| 试验六 少孢节丛孢菌胞外蛋白酶的产生与性质研究 | 第119-134页 |
| 1 材料与方法 | 第119-122页 |
| ·材料 | 第119-120页 |
| ·方法 | 第120-122页 |
| ·少孢节丛孢菌的培养与胞外蛋白酶的诱导分泌 | 第120页 |
| ·少孢节丛孢菌培养滤液的浓缩处理 | 第120页 |
| ·少孢节丛孢菌培养滤液的杀线虫毒性试验 | 第120-121页 |
| ·酪蛋白平板消化试验 | 第121页 |
| ·PH 值和温度及蛋白酶抑制剂对胞外蛋白酶活性的影响 | 第121页 |
| ·少孢节丛孢菌培养滤液磷酸酶活性测定 | 第121页 |
| ·少孢节丛孢菌培养滤液蛋白质含量测定 | 第121页 |
| ·少孢节丛孢菌培养滤液SDS-PAGE 凝胶电泳 | 第121页 |
| ·少孢节丛孢菌胞外蛋白酶最佳培养时间确定 | 第121页 |
| ·少孢节丛孢菌培养滤液中胞外蛋白酶纯化 | 第121-122页 |
| ·胞外蛋白酶纯度检测和分子量测定 | 第122页 |
| ·PH 值和温度及蛋白酶抑制剂对丝氨酸蛋白酶活性影响 | 第122页 |
| 2 结果 | 第122-130页 |
| ·少孢节丛孢菌培养滤液对线虫的毒力试验 | 第122-123页 |
| ·少孢节丛孢菌培养滤液蛋白质含量测定结果 | 第123-124页 |
| ·酪蛋白平板试验 | 第124页 |
| ·PH 值对少孢节丛孢菌培养滤液胞外蛋白酶活性影响 | 第124-125页 |
| ·温度对少孢节丛孢菌培养滤液胞外蛋白酶活性影响 | 第125页 |
| ·蛋白酶抑制剂对少孢节丛孢菌培养滤液胞外蛋白酶活性影响 | 第125-126页 |
| ·少孢节丛孢菌培养滤液磷酸酶活性测定结果 | 第126-127页 |
| ·少孢节丛孢菌培养滤液SDS-PAGE 结果 | 第127-128页 |
| ·培养时间对少孢节丛孢菌胞外蛋白酶产量影响 | 第128-129页 |
| ·纯化蛋白的纯度及分子量测定 | 第129页 |
| ·酪蛋白平板消化试验 | 第129-130页 |
| ·蛋白酶的最佳作用温度和PH 值 | 第130页 |
| ·蛋白酶抑制剂对纯化蛋白酶活性影响 | 第130页 |
| 3 讨论 | 第130-132页 |
| 4 小结 | 第132-134页 |
| 试验七 少孢节丛孢菌丝氨酸蛋白酶基因的序列分析与进化研究 | 第134-143页 |
| 1 材料和方法 | 第134-137页 |
| ·材料 | 第134-135页 |
| ·方法 | 第135-137页 |
| ·少孢节丛孢菌培养 | 第135页 |
| ·基因组DNA 提取 | 第135页 |
| ·DNA 产物纯化 | 第135-136页 |
| ·基因组DNA 检测 | 第136页 |
| ·少孢节丛孢菌目的基因PCR 扩增 | 第136-137页 |
| ·PCR 结果检测 | 第137页 |
| ·PCR 扩增基因片段的纯化和回收 | 第137页 |
| ·序列测定与分析 | 第137页 |
| 2 结果 | 第137-141页 |
| ·基因组DNA 检测 | 第137-138页 |
| ·PCR 扩增结果 | 第138页 |
| ·PCR 扩增产物的酶切位点分析 | 第138页 |
| ·目的基因片段的BLASTN 结果 | 第138页 |
| ·少孢节丛孢菌内蒙分离株和GENBANK 中相关分离株的比较分析 | 第138-139页 |
| ·丝氨酸蛋白酶氨基酸序列的比较分析 | 第139-141页 |
| 3 讨论 | 第141-142页 |
| 4 小结 | 第142-143页 |
| 结论 | 第143-145页 |
| 本课题创新点 | 第145-146页 |
| 致谢 | 第146-147页 |
| 参考文献 | 第147-163页 |
| 作者简介 | 第163页 |