摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
第一章 绪论 | 第11-21页 |
·食物过敏及其危害 | 第11-12页 |
·食物过敏 | 第11页 |
·食物过敏危害 | 第11页 |
·食物过敏原及其特点 | 第11-12页 |
·牛乳过敏及其主要过敏原 | 第12-13页 |
·牛乳过敏 | 第12-13页 |
·牛乳及乳制品中主要过敏原 | 第13页 |
·食物过敏诊断及过敏原检测 | 第13-16页 |
·食物过敏临床诊断 | 第13-14页 |
·过敏原检测 | 第14-15页 |
·牛乳蛋白过敏原的检测 | 第15页 |
·过敏原检测方法评析 | 第15-16页 |
·单克隆抗体技术及其在食品检测中的应用 | 第16-18页 |
·单克隆抗体技术 | 第16-17页 |
·单克隆抗体的优点 | 第17页 |
·单克隆抗体应用 | 第17-18页 |
·荧光量子点标记技术及其在食品检测中应用 | 第18-19页 |
·量子点及其光学特性 | 第18-19页 |
·量子点在食品检测中应用 | 第19页 |
·研究目的、意义及主要内容 | 第19-21页 |
第二章 牛乳α-乳白蛋白的分离纯化 | 第21-32页 |
·引言 | 第21页 |
·材料与仪器 | 第21-22页 |
·主要试剂 | 第21页 |
·主要仪器 | 第21-22页 |
·主要溶液的配制 | 第22-23页 |
·柱层析溶液 | 第22页 |
·SDS-PAGE电泳溶液 | 第22-23页 |
·蛋白浓度测定所需溶液 | 第23页 |
·实验方法 | 第23-26页 |
·浓缩乳清的制备 | 第23页 |
·牛乳α-乳白蛋白的分离纯化 | 第23-26页 |
·结果与分析 | 第26-30页 |
·离子交换层析初步分离 | 第26-27页 |
·凝胶过滤层析进一步纯化α-乳白蛋白 | 第27-29页 |
·纯化过程中蛋白质含量和得率变化 | 第29-30页 |
·讨论 | 第30-31页 |
·离子交换层析 | 第30页 |
·凝胶过滤层析 | 第30-31页 |
·本章小结 | 第31-32页 |
第三章 抗牛乳α-乳白蛋白单克隆抗体的制备 | 第32-48页 |
·引言 | 第32-33页 |
·材料与仪器 | 第33-34页 |
·主要材料 | 第33页 |
·主要试剂 | 第33页 |
·主要仪器 | 第33-34页 |
·主要溶液的配制 | 第34-36页 |
·细胞培养相关溶液 | 第34页 |
·ELISA相关溶液配制 | 第34-35页 |
·免疫印迹相关溶液配制 | 第35-36页 |
·抗体纯化相关溶液配制 | 第36页 |
·实验方法 | 第36-40页 |
·小鼠免疫及免疫效果的监测 | 第36页 |
·间接ELISA测抗血清效价 | 第36-37页 |
·制备饲养细胞 | 第37页 |
·骨髓瘤细胞复苏培养 | 第37页 |
·杂交瘤细胞的制备及筛选 | 第37-38页 |
·阳性杂交瘤细胞的亚克隆、筛选及扩大培养 | 第38页 |
·细胞冻存 | 第38页 |
·体内诱生腹水法大量制备单抗 | 第38页 |
·方正滴定确定最佳腹水效价测定条件 | 第38页 |
·腹水中单克隆抗体的纯化 | 第38-39页 |
·免疫印迹及间接竞争ELISA检测单抗特异性 | 第39-40页 |
·间接竞争ELISA测定单抗与其它牛乳过敏原的免疫交叉反应 | 第40页 |
·结果与分析 | 第40-45页 |
·免疫过程中小鼠抗血清效价的变化 | 第40页 |
·杂交瘤细胞筛选 | 第40-41页 |
·方正滴定确定最佳包被抗原浓度及二抗稀释度 | 第41-42页 |
·单抗腹水纯化及浓度测定 | 第42-43页 |
·间接竞争ELISA检测单抗特异性 | 第43-44页 |
·腹水单抗交叉反应性研究 | 第44页 |
·交叉反应率计算 | 第44页 |
·免疫印迹检测单抗特异性 | 第44-45页 |
·讨论 | 第45-47页 |
·动物的免疫 | 第45-46页 |
·单抗的制备 | 第46-47页 |
·抗体的纯化及其特性 | 第47页 |
·本章小结 | 第47-48页 |
第四章 荧光量子点标记单克隆抗体 | 第48-59页 |
·引言 | 第48-49页 |
·材料与仪器 | 第49页 |
·主要试剂 | 第49页 |
·主要仪器 | 第49页 |
·主要溶液的配制 | 第49-50页 |
·实验方法 | 第50-51页 |
·量子点偶联 | 第50页 |
·偶联混合物纯化 | 第50页 |
·斑点印迹 | 第50-51页 |
·荧光发射光谱分析 | 第51页 |
·结果与分析 | 第51-56页 |
·量子点偶联抗体条件的优化 | 第51-53页 |
·偶联产物的纯化 | 第53-54页 |
·斑点印迹 | 第54-55页 |
·荧光发射光谱分析 | 第55-56页 |
·讨论 | 第56-57页 |
·本章小结 | 第57-59页 |
第五章 量子点标记单克隆抗体检测食品中过敏原α-乳白蛋白 | 第59-71页 |
·引言 | 第59页 |
·材料与仪器 | 第59-60页 |
·主要试剂 | 第59页 |
·主要仪器 | 第59-60页 |
·主要溶液配制 | 第60页 |
·实验方法 | 第60-63页 |
·间接ELISA | 第61页 |
·间接竞争ELISA | 第61页 |
·竞争蛋白与单克隆抗体最佳体积配比的确定 | 第61-62页 |
·样品前处理 | 第62页 |
·斑点印迹定性检测 | 第62页 |
·间接竞争ELISA标准曲线的绘制 | 第62页 |
·间接竞争FLISA标准曲线绘制 | 第62-63页 |
·精确度 | 第63页 |
·半抑制量浓度与最低检出限 | 第63页 |
·样品检测 | 第63页 |
·结果与分析 | 第63-69页 |
·最佳抗体稀释度及包被浓度的确定 | 第63-64页 |
·竞争反应中最佳反应混合物体积配比 | 第64-65页 |
·斑点印迹定性检测分析 | 第65页 |
·间接竞争ELISA及间接竞争FLISA标准曲线的绘制 | 第65-66页 |
·精确度 | 第66-68页 |
·半抑制量浓度及最低检出限 | 第68页 |
·样品检测 | 第68-69页 |
·讨论 | 第69-70页 |
·本章小结 | 第70-71页 |
第六章 全文总结 | 第71-73页 |
·本论文主要研究结果 | 第71-72页 |
·建议与展望 | 第72-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-79页 |
攻读学位期间研究成果 | 第79页 |