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荧光免疫吸附法检测食品中过敏原α-乳白蛋白的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-11页
第一章 绪论第11-21页
   ·食物过敏及其危害第11-12页
     ·食物过敏第11页
     ·食物过敏危害第11页
     ·食物过敏原及其特点第11-12页
   ·牛乳过敏及其主要过敏原第12-13页
     ·牛乳过敏第12-13页
     ·牛乳及乳制品中主要过敏原第13页
   ·食物过敏诊断及过敏原检测第13-16页
     ·食物过敏临床诊断第13-14页
     ·过敏原检测第14-15页
     ·牛乳蛋白过敏原的检测第15页
     ·过敏原检测方法评析第15-16页
   ·单克隆抗体技术及其在食品检测中的应用第16-18页
     ·单克隆抗体技术第16-17页
     ·单克隆抗体的优点第17页
     ·单克隆抗体应用第17-18页
   ·荧光量子点标记技术及其在食品检测中应用第18-19页
     ·量子点及其光学特性第18-19页
     ·量子点在食品检测中应用第19页
   ·研究目的、意义及主要内容第19-21页
第二章 牛乳α-乳白蛋白的分离纯化第21-32页
   ·引言第21页
   ·材料与仪器第21-22页
     ·主要试剂第21页
     ·主要仪器第21-22页
   ·主要溶液的配制第22-23页
     ·柱层析溶液第22页
     ·SDS-PAGE电泳溶液第22-23页
     ·蛋白浓度测定所需溶液第23页
   ·实验方法第23-26页
     ·浓缩乳清的制备第23页
     ·牛乳α-乳白蛋白的分离纯化第23-26页
   ·结果与分析第26-30页
     ·离子交换层析初步分离第26-27页
     ·凝胶过滤层析进一步纯化α-乳白蛋白第27-29页
     ·纯化过程中蛋白质含量和得率变化第29-30页
   ·讨论第30-31页
     ·离子交换层析第30页
     ·凝胶过滤层析第30-31页
   ·本章小结第31-32页
第三章 抗牛乳α-乳白蛋白单克隆抗体的制备第32-48页
   ·引言第32-33页
   ·材料与仪器第33-34页
     ·主要材料第33页
     ·主要试剂第33页
     ·主要仪器第33-34页
   ·主要溶液的配制第34-36页
     ·细胞培养相关溶液第34页
     ·ELISA相关溶液配制第34-35页
     ·免疫印迹相关溶液配制第35-36页
     ·抗体纯化相关溶液配制第36页
   ·实验方法第36-40页
     ·小鼠免疫及免疫效果的监测第36页
     ·间接ELISA测抗血清效价第36-37页
     ·制备饲养细胞第37页
     ·骨髓瘤细胞复苏培养第37页
     ·杂交瘤细胞的制备及筛选第37-38页
     ·阳性杂交瘤细胞的亚克隆、筛选及扩大培养第38页
     ·细胞冻存第38页
     ·体内诱生腹水法大量制备单抗第38页
     ·方正滴定确定最佳腹水效价测定条件第38页
     ·腹水中单克隆抗体的纯化第38-39页
     ·免疫印迹及间接竞争ELISA检测单抗特异性第39-40页
     ·间接竞争ELISA测定单抗与其它牛乳过敏原的免疫交叉反应第40页
   ·结果与分析第40-45页
     ·免疫过程中小鼠抗血清效价的变化第40页
     ·杂交瘤细胞筛选第40-41页
     ·方正滴定确定最佳包被抗原浓度及二抗稀释度第41-42页
     ·单抗腹水纯化及浓度测定第42-43页
     ·间接竞争ELISA检测单抗特异性第43-44页
     ·腹水单抗交叉反应性研究第44页
     ·交叉反应率计算第44页
     ·免疫印迹检测单抗特异性第44-45页
   ·讨论第45-47页
     ·动物的免疫第45-46页
     ·单抗的制备第46-47页
     ·抗体的纯化及其特性第47页
   ·本章小结第47-48页
第四章 荧光量子点标记单克隆抗体第48-59页
   ·引言第48-49页
   ·材料与仪器第49页
     ·主要试剂第49页
     ·主要仪器第49页
   ·主要溶液的配制第49-50页
   ·实验方法第50-51页
     ·量子点偶联第50页
     ·偶联混合物纯化第50页
     ·斑点印迹第50-51页
     ·荧光发射光谱分析第51页
   ·结果与分析第51-56页
     ·量子点偶联抗体条件的优化第51-53页
     ·偶联产物的纯化第53-54页
     ·斑点印迹第54-55页
     ·荧光发射光谱分析第55-56页
   ·讨论第56-57页
   ·本章小结第57-59页
第五章 量子点标记单克隆抗体检测食品中过敏原α-乳白蛋白第59-71页
   ·引言第59页
   ·材料与仪器第59-60页
     ·主要试剂第59页
     ·主要仪器第59-60页
   ·主要溶液配制第60页
   ·实验方法第60-63页
     ·间接ELISA第61页
     ·间接竞争ELISA第61页
     ·竞争蛋白与单克隆抗体最佳体积配比的确定第61-62页
     ·样品前处理第62页
     ·斑点印迹定性检测第62页
     ·间接竞争ELISA标准曲线的绘制第62页
     ·间接竞争FLISA标准曲线绘制第62-63页
     ·精确度第63页
     ·半抑制量浓度与最低检出限第63页
     ·样品检测第63页
   ·结果与分析第63-69页
     ·最佳抗体稀释度及包被浓度的确定第63-64页
     ·竞争反应中最佳反应混合物体积配比第64-65页
     ·斑点印迹定性检测分析第65页
     ·间接竞争ELISA及间接竞争FLISA标准曲线的绘制第65-66页
     ·精确度第66-68页
     ·半抑制量浓度及最低检出限第68页
     ·样品检测第68-69页
   ·讨论第69-70页
   ·本章小结第70-71页
第六章 全文总结第71-73页
   ·本论文主要研究结果第71-72页
   ·建议与展望第72-73页
致谢第73-74页
参考文献第74-79页
攻读学位期间研究成果第79页

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