| 中文摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 1 引言 | 第15-50页 |
| ·低温胁迫对植物的影响 | 第15-17页 |
| ·植物对低温的响应 | 第17-20页 |
| ·植物细胞膜系统组分的改变 | 第17-18页 |
| ·活性氧的产生和清除 | 第18-19页 |
| ·植物低温诱导蛋白的产生 | 第19-20页 |
| ·AP2/EREBP 转录因子家族的特征、分类和功能 | 第20-21页 |
| ·DRE 元件的分离和功能鉴定 | 第21-22页 |
| ·拟南芥CBF/DREB1 转录因子的克隆 | 第22-23页 |
| ·CBF/DREB1 的靶基因 | 第23-25页 |
| ·CBF/DREB1 上游的调控因子 | 第25-27页 |
| ·参与DREB 信号传递途径的其它调控因子 | 第27-29页 |
| ·其它植物中的 CBF/DREB 转录因子 | 第29-32页 |
| ·CBF/DREB 转基因植物的抗逆性 | 第32-34页 |
| ·植物低温信号转导通路 | 第34-40页 |
| ·CBF/DREB1 介导的低温信号转导通路 | 第36页 |
| ·不依赖于CBF/DREB1 的低温信号转导通路 | 第36-40页 |
| ·植物开花时间调控 | 第40-43页 |
| ·赤霉素的合成、信号传导及其在植物响应非生物胁迫中的作用 | 第43-45页 |
| ·赤霉素的合成与信号传导 | 第43-44页 |
| ·赤霉素在植物抵御非生物胁迫中的作用 | 第44-45页 |
| ·细胞分裂素与植物生长发育、非生物胁迫抗性关系 | 第45-48页 |
| ·细胞分裂素的生理功能 | 第45页 |
| ·细胞分裂素的信号转导 | 第45-48页 |
| ·细胞分裂素与非生物胁迫应答 | 第48页 |
| ·本课题的目的和意义 | 第48-50页 |
| 2 材料与方法 | 第50-70页 |
| ·实验材料 | 第50-52页 |
| ·植物材料 | 第50页 |
| ·菌株与质粒 | 第50页 |
| ·酶与各种生化试剂 | 第50页 |
| ·引物 | 第50-52页 |
| ·实验方法 | 第52-70页 |
| ·植物基因组DNA 的提取 | 第52页 |
| ·植物基因组 DNA 的纯化 | 第52页 |
| ·TAIL-PCR | 第52-54页 |
| ·GhDREB1 启动子驱动的 GFP 与 GUS 报告基因表达载体的构建 | 第54页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第54页 |
| ·大肠杆菌中质粒的提取 | 第54-55页 |
| ·基因枪瞬时表达微弹的准备 | 第55-56页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第56页 |
| ·烟草BY-2 悬浮细胞培养 | 第56-57页 |
| ·烟草BY-2 悬浮细胞瞬时转化 | 第57页 |
| ·GUS 活性测定 | 第57-58页 |
| ·拟南芥转化 | 第58-59页 |
| ·转基因拟南芥的鉴定 | 第59页 |
| ·TRIZOL 法提取RNA | 第59页 |
| ·RNA 中基因组DNA 的去除 | 第59页 |
| ·RNA 反转录 | 第59-60页 |
| ·Northern 杂交 | 第60-61页 |
| ·Western 杂交实验 | 第61-63页 |
| ·脯氨酸含量测定 | 第63-64页 |
| ·电解质外渗测定 | 第64-65页 |
| ·花青素含量测定 | 第65页 |
| ·石蜡切片制作 | 第65-66页 |
| ·酵母双杂交实验 | 第66-70页 |
| 3 结果与分析 | 第70-87页 |
| ·GhDREB1 蛋白的定位 | 第70-71页 |
| ·35S::GhDREB1-GFP 表达载体的构建 | 第70页 |
| ·GhDREB1-GFP 融合蛋白在洋葱表皮中的表达 | 第70-71页 |
| ·GhDREB1 启动子的克隆和功能分析 | 第71-73页 |
| ·GhDREB1 启动子的克隆 | 第71页 |
| ·GhDREB1 启动子的功能验证 | 第71-73页 |
| ·GhDREB1 在烟草中的功能验证 | 第73-75页 |
| ·GhDREB1 提高了转基因烟草的抗冷性 | 第73页 |
| ·GhDREB1 提高转基因烟草抗冷性的机理分析 | 第73-74页 |
| ·GhDREB1 抑制转基因烟草的生长发育 | 第74-75页 |
| ·GhDREB1 在模式植物拟南芥中的功能验证 | 第75-85页 |
| ·超表达GhDREB1 转基因拟南芥的获得 | 第75页 |
| ·超表达GhDREB1 转基因拟南芥的表型 | 第75-77页 |
| ·外源赤霉素处理基本恢复了L6 植株的表型 | 第77页 |
| ·GhDREB1 与转基因植株中赤霉素含量的关系 | 第77-79页 |
| ·GhDREB1 对拟南芥中开花相关基因的调控 | 第79-80页 |
| ·GhDREB1 提高了转基因拟南芥非生物胁迫的抗性 | 第80-83页 |
| ·GhDREB1 抑制了细胞分裂素的信号转导 | 第83-85页 |
| ·与拟南芥中CBF3/DREB1A 和ICE1 互作蛋白的筛选 | 第85-87页 |
| 4 讨论 | 第87-90页 |
| 5 结论 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-109页 |
| 附录 | 第109-112页 |
| 致谢 | 第112-113页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第113页 |
