| 摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 1 前言 | 第14-39页 |
| ·春化作用的生理学基础 | 第14-16页 |
| ·植物对低温反应的类型及春化作用的感受部位 | 第14-15页 |
| ·植物春化作用对温度的需求 | 第15页 |
| ·春化作用与代谢活动的关系 | 第15-16页 |
| ·去春化作用及春化状态的传递 | 第16页 |
| ·春化作用的遗传学机制 | 第16-26页 |
| ·植物春化作用的表观遗传调控 | 第17-18页 |
| ·植物春化作用与GA(Gibberellin)途径的关系 | 第18页 |
| ·FLC 是拟南芥春化的关键基因 | 第18-19页 |
| ·春化作用与FLC 的组蛋白修饰 | 第19-21页 |
| ·FLC 的沉默与DNA 甲基化的关系 | 第21-22页 |
| ·FLC 的重新激活 | 第22页 |
| ·拟南芥中独立于FLC 的春化控制机制 | 第22-26页 |
| ·MAF 类基因参与了拟南芥的春化作用过程 | 第22-24页 |
| ·AGL24 独立于FLC 调控了拟南芥的开花时间 | 第24-25页 |
| ·AGL19 独立于FLC 促进拟南芥开花 | 第25-26页 |
| ·麦类植物春化作用的研究进展 | 第26-32页 |
| ·VRN1、VRN2 和VRN3 共同控制了小麦和大麦春化作用的需求 | 第26-28页 |
| ·VRN1 在叶片中被春化处理所诱导表达促进小麦生长状态的转变 | 第28-29页 |
| ·VRN2 受春化作用和光周期的调节 | 第29-30页 |
| ·VRN3（FT）能够促进VRN1 在叶片中的表达 | 第30页 |
| ·其他春化相关基因VRT2 和VER2 在春化过程中的作用 | 第30-31页 |
| ·麦类植物春化作用的表观遗传调控 | 第31-32页 |
| ·春化作用对小麦穗发育的影响 | 第32页 |
| ·植物春化作用与冷驯化(Cold Acclimation)的关系 | 第32-34页 |
| ·植物冷驯化的机制 | 第32-33页 |
| ·春化作用和冷驯化的差异 | 第33-34页 |
| ·基因芯片(DNA microarray)技术 | 第34-37页 |
| ·基因芯片数据的获得 | 第34-35页 |
| ·基因芯片数据分析方法 | 第35-37页 |
| ·差异基因筛选 | 第35-36页 |
| ·聚类分析方法 | 第36-37页 |
| ·基因芯片技术在基因表达谱分析方面的应用 | 第37页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第37-39页 |
| 2 材料和方法 | 第39-52页 |
| ·实验材料 | 第39-40页 |
| ·植物材料和种植 | 第39页 |
| ·菌株和质粒 | 第39页 |
| ·酶及生化试剂 | 第39-40页 |
| ·PCR 引物 | 第40页 |
| ·培养基 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-52页 |
| ·取材及茎尖形态学观察 | 第40页 |
| ·小麦基因组芯片 | 第40页 |
| ·芯片杂交 | 第40-41页 |
| ·芯片数据分析 | 第41-42页 |
| ·聚类分析 | 第41页 |
| ·差异基因筛选 | 第41页 |
| ·分子功能注释及分类 | 第41-42页 |
| ·Blastall 分析 | 第42页 |
| ·qRT-PCR | 第42-44页 |
| ·引物设计合成 | 第42页 |
| ·植物组织总RNA 的提取 | 第42-43页 |
| ·反转录 | 第43-44页 |
| ·qRT-PCR 反应条件 | 第44页 |
| ·基因克隆和载体构建 | 第44-49页 |
| ·PCR 扩增 | 第44-45页 |
| ·连接反应 | 第45-46页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第46-47页 |
| ·酶切和回收 | 第47页 |
| ·DNA 测序 | 第47页 |
| ·基因序列比对及进化树分析 | 第47页 |
| ·TaAP2 基因克隆和载体构建 | 第47-49页 |
| ·农杆菌侵染法转化拟南芥 | 第49-52页 |
| ·拟南芥的栽培 | 第49-50页 |
| ·拟南芥植株的转化 | 第50页 |
| ·转基因植株的筛选及分析 | 第50-51页 |
| ·转基因拟南芥的PCR 鉴定 | 第51-52页 |
| ·植物基因组DNA 的提取 | 第51-52页 |
| 3 结果与分析 | 第52-77页 |
| ·春化作用对小麦开花时间和茎尖形态的影响 | 第52-54页 |
| ·春化处理促进小偃6 号开花 | 第52页 |
| ·春化作用对小偃6 号茎尖发育形态的影响 | 第52-54页 |
| ·春化处理过程中小麦茎尖基因表达谱分析 | 第54-61页 |
| ·获得基因芯片数据 | 第54页 |
| ·数据分析 | 第54-59页 |
| ·基因芯片数据的聚类分析 | 第54-56页 |
| ·差异基因的筛选 | 第56-57页 |
| ·差异显著基因的筛选及初步功能分类 | 第57-59页 |
| ·基因芯片结果的验证 | 第59-61页 |
| ·小麦春化相关基因在春化处理茎尖中的表达模式 | 第61-64页 |
| ·qRT-PCR 验证已知春化相关基因在芯片中的表达模式 | 第61-62页 |
| ·小麦春化相关基因在茎尖和叶片中的表达模式分析 | 第62-64页 |
| ·小麦中 MADS-box 类基因能够响应春化处理的信号 | 第64-70页 |
| ·芯片中 MADS-box 类基因的表达分析 | 第65-66页 |
| ·MADS-box 基因在春化过程中的表达模式 | 第66-70页 |
| ·春化处理能够降低组蛋白修饰和DNA 甲基化相关基因在茎尖中的表达 | 第70-71页 |
| ·差异基因的克隆及功能鉴定 | 第71-77页 |
| ·选定基因在春化和未春化材料中的表达模式 | 第72-74页 |
| ·目的基因的克隆及序列分析 | 第74-75页 |
| ·过表达 TaAP2 造成拟南芥开花时间的推迟 | 第75-77页 |
| 4 讨论 | 第77-85页 |
| ·小麦基因芯片分析 | 第77-78页 |
| ·芯片结果的准确性 | 第77页 |
| ·小麦基因芯片分析中存在的问题 | 第77页 |
| ·春化处理影响了多类基因的表达 | 第77-78页 |
| ·已知春化相关基因在茎尖和叶片中的表达模式 | 第78-82页 |
| ·VRN1、VRN2 和VRN3 的关系 | 第78-80页 |
| ·VRT2 的表达变化及其功能 | 第80-81页 |
| ·在茎尖中VER2 具有与VRT2 相同的表达模式 | 第81页 |
| ·春化处理的茎尖中WFL 具有与VRN1 相似的表达模式 | 第81-82页 |
| ·MADS-box 基因可能在小麦春化作用过程中起到了重要作用 | 第82-83页 |
| ·春化处理对组蛋白修饰和DNA 甲基化基因表达的影响 | 第83-84页 |
| ·组蛋白修饰参与了小麦春化作用过程中的基因表达调控 | 第83-84页 |
| ·春化处理能够降低了小麦基因组DNA 的甲基化水平 | 第84页 |
| ·过表达 TaAP2 影响了拟南芥的开花时间 | 第84-85页 |
| 5 结论 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-103页 |
| 附录 | 第103-114页 |
| 致谢 | 第114-115页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第115页 |
