| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 文献综述 | 第11-20页 |
| 第一章 猪瘟及猪瘟病毒研究进展 | 第11-20页 |
| ·猪瘟概述 | 第11-14页 |
| ·猪瘟的起源 | 第11页 |
| ·猪瘟的流行病学及分布 | 第11-12页 |
| ·猪瘟的临床症状 | 第12页 |
| ·猪瘟的病理剖解变化 | 第12页 |
| ·猪瘟的诊断 | 第12-13页 |
| ·猪瘟的防控 | 第13-14页 |
| ·猪瘟病毒研究进展 | 第14-17页 |
| ·猪瘟病毒的形态及理化特性 | 第14页 |
| ·猪瘟病毒的基因组结构 | 第14页 |
| ·CSFV 编码蛋白的结构和功能 | 第14-17页 |
| ·猪瘟疫苗的研究进展 | 第17-19页 |
| ·CSFV 亚单位疫苗 | 第17-18页 |
| ·CSFV 多肽疫苗 | 第18页 |
| ·CSFV 核酸疫苗 | 第18页 |
| ·CSFV 活载体疫苗 | 第18-19页 |
| ·问题和展望 | 第19-20页 |
| 试验研究 | 第20-56页 |
| 第二章 猪瘟病毒E2 基因真核分泌型表达载体的构建及分泌表达研究 | 第20-34页 |
| ·材料 | 第20-21页 |
| ·菌株、质粒、细胞和试剂 | 第20页 |
| ·血清、细胞培养基及抗体 | 第20-21页 |
| ·主要仪器 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-30页 |
| ·引物的设计与合成 | 第21-22页 |
| ·PCR 产物的纯化回收 | 第22页 |
| ·重组质粒pSec-Tag-E29c 和pSec-Tag-E25h 的构建与鉴定 | 第22-24页 |
| ·pSec-Tag-E29c 和pSec-Tag-E25h 重组质粒转染猪血管内皮细胞 | 第24-25页 |
| ·转染细胞的 RT-PCR 目的基因的转录 | 第25-26页 |
| ·重组质粒表达 CSFV E2 蛋白的 SDS-PAGE 和 Western blot 分析 | 第26-30页 |
| ·结果与分析 | 第30-32页 |
| ·CSFV E2 基因全长及去除跨膜区序列的扩增结果 | 第30页 |
| ·pSec Tag-E29c 和pSec Tag-E25h 重组载体的构建与鉴定 | 第30-31页 |
| ·pSec Tag-E29c 和pSec Tag-E25h 转染细胞的 RT-PCR 扩增结果 | 第31页 |
| ·pSec Tag-E29c 和pSec Tag-E25h 重组质粒表达产物的 SDS-PAGE 和 Western blot 检测结果 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32-33页 |
| ·小结 | 第33-34页 |
| 第三章 猪瘟病毒E2 基因真核分泌型腺病毒表达载体的构建及分泌表达研究 | 第34-51页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·质粒、菌株及细胞株 | 第34页 |
| ·工具酶及试剂 | 第34页 |
| ·主要仪器 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-42页 |
| ·重组腺病毒载体pAdTrack-lg k-E25h 的构建 | 第34-36页 |
| ·Igk-E25h 基因的获得 | 第36页 |
| ·穿梭质粒pAdTrackIg k-E25h 的构建 | 第36-37页 |
| ·重组穿梭质粒的筛选与酶切鉴定 | 第37-38页 |
| ·重组质粒的 PCR 鉴定 | 第38页 |
| ·重组质粒的测序分析 | 第38页 |
| ·重组腺病毒骨架载体pAdEasy-Ig k-E25h 的构建 | 第38-40页 |
| ·重组阳性克隆株的扩增及纯化 | 第40页 |
| ·重组腺病毒pAd-Ig k-E25h 的产生 | 第40-41页 |
| ·重组腺病毒pAd-Ig k-E25h 的扩增及滴度测定 | 第41-42页 |
| ·重组腺病毒pAd-Ig k-E25h 感染血管内皮的 SDS-PAGE 和 Western blot分析 | 第42页 |
| ·结果 | 第42-49页 |
| ·重组穿梭转移质粒pAdTrack-Ig k-E25h 的构建 | 第42-43页 |
| ·重组腺病毒骨架质粒pAdEasy-Ig k-E25h 鉴定 | 第43-44页 |
| ·重组腺病毒的构建及鉴定 | 第44-49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| ·小结 | 第50-51页 |
| 第四章 CSFV E2 蛋白的制备及动物免疫试验 | 第51-56页 |
| ·材料与方法 | 第51-53页 |
| ·材料 | 第51页 |
| ·方法 | 第51-53页 |
| ·结果 | 第53-54页 |
| ·pAd-lgk-E25h 感染血管内皮 | 第53页 |
| ·感染腺病毒血管内皮细胞上清液的超低温冷冻真空干燥结果 | 第53-54页 |
| ·免疫后小鼠的血清抗体ELISA 检测结果 | 第54页 |
| ·讨论 | 第54-55页 |
| ·小结 | 第55-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-66页 |
| 附录 论文中应用的缩略语 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者简介 | 第68页 |
