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井冈霉素与杀念菌素生物合成基因的功能研究

中文摘要第1-9页
ABSTRACT第9-14页
第一章 文献综述第14-39页
   ·C_7N 氨基环醇化合物生物合成研究进展第14-29页
     ·C_7N 氨基环醇化合物简介第14页
     ·阿卡波糖的生物合成第14-18页
     ·Pyralomicin 的生物合成第18-19页
     ·Cetoniacytone A的生物合成第19-24页
     ·Salbostatin的生物合成第24-27页
     ·BE-40644 的生物合成第27-29页
   ·井冈霉素生物合成研究进展第29-34页
     ·井冈霉素的化学结构第29页
     ·井冈霉素的作用机理及应用第29-30页
     ·有效霉素/井冈霉素的生物合成研究进展第30-34页
   ·对氨基苯甲酸生物合成在初级代谢与次级代谢中的作用第34-39页
     ·初级代谢和次级代谢第34页
     ·对氨基苯甲酸简介第34-35页
     ·对氨基苯甲酸的生物合成途径第35页
     ·对氨基苯甲酸及其前体在初级代谢及次级代谢中的作用第35-38页
     ·对氨基苯甲酸生物合成基因的研究进展第38-39页
第二章 实验材料和方法第39-58页
   ·实验材料第39-51页
     ·菌株第39-42页
     ·质粒第42-48页
     ·培养基和化学试剂第48-51页
   ·实验方法第51-58页
第三章 井冈霉素生物合成基因簇中激酶基因valC的体内功能研究第58-72页
   ·前言第58-60页
   ·结果与分析第60-68页
     ·valC 基因置换突变株ZYR-1 的构建第60-64页
     ·valC 对突变株ZYR-1 的互补第64-67页
     ·用 acbM 对突变株 ZYR-1 的互补第67-68页
   ·小结与讨论第68-72页
第四章 井冈霉素生物合成基因簇中表异构化酶基因valD的体内功能研究第72-90页
   ·前言第72-73页
   ·结果与分析第73-85页
     ·valD 基因置换突变株ZYR-4 的构建及互补第73-77页
     ·ValD 的序列比对及对ValD 蛋白二级结构的预测第77页
     ·valD的C端和N端部分的克隆及对突变株ZYR-4的互补第77-80页
     ·通过定点突变对预测的ValD的活性中心进行验证第80-83页
     ·单定点突变和双定点突变后的valD对突变株ZYR-4的互补第83-85页
   ·小结与讨论第85-90页
第五章 井冈霉素生物合成基因簇中valBv、alK及valO的体内功能研究第90-107页
   ·核苷转移酶基因valB 的置换及互补第90-96页
     ·前言第90页
     ·valB基因置换突变株ZYR-2的构建第90-94页
     ·valB对突变株ZYR-2的互补第94-96页
   ·脱水酶基因 valK 的;置换和互补第96-101页
     ·前言第96页
     ·valK 基因置换突变株ZYR-3 的构建第96-100页
     ·valK 对突变株ZYR-3 的互补第100-101页
   ·磷酸酶/磷酸变位酶基因valO 的置换及互补第101-107页
     ·valO 基因置换突变株ZYR-5 的构建第101-104页
     ·valO 对突变株ZYR-5 的互补第104-107页
第六章 杀念菌素/抗生素FR-008起始单位对氨基苯甲酸生物合成基因的研究第107-141页
   ·前言第107-108页
   ·结果与分析第108-138页
     ·ADC 合成酶基因pabAB 的同框缺失、互补和喂养第108-113页
     ·ADC 裂解酶基因pabC-1 的置换、互补和喂养第113-118页
     ·链霉菌FR-008 染色体上ADC 裂解酶基因pabC-2 的克隆及定性第118-120页
     ·pabC-1 和pabC-2 的双突变第120-122页
     ·pabC-1和pabC-2对双突变株ZYR-7的互补第122-124页
     ·大肠杆菌BW25113 pabC 突变株ZYR-9 的构建第124-126页
     ·pabC-1 及pabC-2对大肠杆菌pabC 突变株ZYR-9 的异源互补第126-127页
     ·链霉菌FR-008的PabC-1和PabC-2在大肠杆菌中的超量表达及纯化第127-130页
     ·PabC-1 和PabC-2 的体外ADC 裂解酶活性检测第130-133页
     ·利用RT-PCR 在菌体生长早期对pabABp、abC-1 和pabC-2 的转录分析第133-134页
     ·天蓝色链霉菌中可能的ADC 裂解酶基因sc01546 的研究第134-138页
   ·小结和讨论第138-141页
第七章 总结与展望第141-146页
   ·井冈霉素生物合成研究的工作总结与主要创新点第141-142页
   ·杀念菌素生物合成起始单位研究的工作总结和主要创新点第142-144页
   ·进一步研究工作的展望第144-146页
参考文献第146-159页
致谢第159-161页
攻读博士学位期间已发表或录用的论文第161-164页

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