摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-10页 |
符号说明 | 第10-11页 |
前言 | 第11页 |
第一章 文献回顾 | 第11-29页 |
一、毕赤酵母表达系统研究现状 | 第11-19页 |
1、常用表达菌株及表达载体 | 第12-15页 |
2、基因整合及表达调控的机理 | 第15-16页 |
3、巴斯德毕赤酵母表达菌株的培养 | 第16-19页 |
4、应用前景及展望 | 第19页 |
二、抗菌肽研究现状 | 第19-25页 |
1、抗菌肽的分类 | 第20-21页 |
2、抗菌肽的作用及机理 | 第21-23页 |
3、抗菌肽基因工程进展 | 第23-24页 |
4、抗菌肽的应用前景 | 第24-25页 |
三、抗菌肽GK8 研究现状 | 第25-26页 |
四、小分子蛋白质电泳技术 | 第26页 |
五、液相色谱技术 | 第26-29页 |
第二章 实验材料与方法 | 第29-43页 |
一、实验材料 | 第29-35页 |
二、实验方法 | 第35-43页 |
1、pUC57-GK8 的扩增及确认 | 第35-36页 |
2、表达载体pPIC9K-GK8 的构建和筛选 | 第36-38页 |
3、表达载体pPIC9K-GK8 的毕赤酵母表达及筛选 | 第38-41页 |
4、pPIC9K-GK8 转化毕赤酵母的大量表达及纯化和生物学活性检测 | 第41-43页 |
第三章 实验结果 | 第43-49页 |
一、pPIC9K 和pUC57-GK8 的鉴定 | 第43-44页 |
二、重组质粒pPIC9K-GK8 的鉴定 | 第44-45页 |
三、构建pPIC9K-GK8 毕赤酵母菌株表达产物鉴定 | 第45-46页 |
四、构建pPIC9K-GK8 毕赤酵母菌株表达产物的纯化及检测 | 第46-47页 |
五、构建pPIC9K-GK8 毕赤酵母菌株表达产物的生物学活性检测 | 第47-49页 |
第四章 讨论 | 第49-56页 |
一、实验整体流程 | 第49页 |
二、有关表达质粒构建 | 第49-50页 |
三、有关毕赤酵母表达系统发酵条件 | 第50-53页 |
四、有关小分子多肽的SDS-PAGE | 第53-54页 |
五、酵母表达菌株表达量的筛选 | 第54-55页 |
六、有关表达产物GK8 的纯化 | 第55页 |
七、有关所筛选重组菌株的情况 | 第55-56页 |
小结 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
攻读学位期间发表学术论文目录 | 第62-65页 |
上海交通大学学位论文答辩决议书 | 第65页 |