| 摘要 | 第1-13页 |
| ABSTRACT | 第13-16页 |
| 1 引言 | 第16-40页 |
| ·研究目的和意义 | 第16-17页 |
| ·文献综述 | 第17-38页 |
| ·野生大豆种质资源研究进展 | 第17-20页 |
| ·植物抗逆性研究进展 | 第20-27页 |
| ·基因组学在植物抗逆性研究中的应用 | 第27-32页 |
| ·植物渗透胁迫相关蛋白激酶研究进展 | 第32-38页 |
| ·本研究的课题来源及研究内容 | 第38-39页 |
| ·本研究的课题来源 | 第38页 |
| ·本研究的研究内容 | 第38-39页 |
| ·本研究的创新点 | 第39-40页 |
| 2 材料与方法 | 第40-57页 |
| ·材料 | 第40-43页 |
| ·植物材料 | 第40页 |
| ·数据库与生物软件 | 第40页 |
| ·菌株与质粒 | 第40-41页 |
| ·试剂 | 第41页 |
| ·培养基 | 第41-43页 |
| ·仪器 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-57页 |
| ·野生大豆渗透胁迫早期应答蛋白激酶ESTs 的筛选 | 第43-44页 |
| ·渗透胁迫相关激酶基因的克隆及序列分析 | 第44-46页 |
| ·激酶基因在不同胁迫处理下的表达特性分析 | 第46-47页 |
| ·激酶基因的瞬时表达及亚细胞定位分析 | 第47-48页 |
| ·激酶蛋白的原核表达分析 | 第48-49页 |
| ·激酶蛋白GsCBRLK 的体外结合特性分析 | 第49-50页 |
| ·激酶蛋白GsCBRLK 的体内结合特异性分析 | 第50-51页 |
| ·激酶蛋白的酶学特性分析 | 第51-52页 |
| ·激酶基因GsLRPK 在酵母中的超量表达及抗逆功能分析 | 第52页 |
| ·激酶基因GsCBRLK、GsAPK 在拟南芥中的超量表达及抗逆功能分析 | 第52-57页 |
| 3 结果与分析 | 第57-111页 |
| ·野生大豆渗透胁迫早期应答蛋白激酶ESTs 的获得 | 第57-59页 |
| ·野生大豆ESTs 数据的收集 | 第57页 |
| ·渗透胁迫早期应答蛋白激酶ESTs 的筛选 | 第57-59页 |
| ·渗透胁迫相关激酶基因的克隆及序列分析 | 第59-78页 |
| ·全长基因的克隆 | 第59-69页 |
| ·基因产物的生物信息学分析 | 第69-78页 |
| ·激酶基因在不同胁迫处理下的表达特性分析 | 第78-82页 |
| ·不同胁迫处理下野生大豆总RNA 的获得 | 第78-80页 |
| ·不同胁迫处理下激酶基因的表达特性分析 | 第80-82页 |
| ·激酶基因的瞬时表达及亚细胞定位分析 | 第82-85页 |
| ·植物瞬时表达载体的构建 | 第82-83页 |
| ·激酶基因的亚细胞定位分析 | 第83-85页 |
| ·激酶蛋白的原核表达分析 | 第85-88页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第85-87页 |
| ·激酶蛋白的诱导及纯化 | 第87-88页 |
| ·激酶蛋白GsCBRLK 的体外结合特异性分析 | 第88-92页 |
| ·GsCBRLK 中CaMBD 的预测 | 第88页 |
| ·GsCBRLK 缺失突变及GsCaM 原核表达载体的构建 | 第88-90页 |
| ·GsCBRLK 全长及缺失突变蛋白的诱导及验证 | 第90-91页 |
| ·GsCBRLK 与GsCaM 蛋白的体外结合特异性分析 | 第91页 |
| ·GsCBRLK 与GsCaM 蛋白的体外结合模式分析 | 第91-92页 |
| ·激酶蛋白GsCBRLK 的体内结合特异性分析 | 第92-94页 |
| ·GsCBRLK 全长、缺失突变及GsCaM 酵母双杂交载体的构建 | 第92-93页 |
| ·GsCBRLK 与GsCaM 蛋白的体内结合特异性分析 | 第93-94页 |
| ·激酶蛋白的酶学特性分析 | 第94-98页 |
| ·不同二价阳离子对激酶GsCBRLK 磷酸化活性的影响 | 第94页 |
| ·Ca~(2+)/CaM 对激酶GsCBRLK 磷酸化活性的影响 | 第94-95页 |
| ·ABA 对激酶GsAPK 磷酸化活性的影响 | 第95-97页 |
| ·不同胁迫对激酶GsLRPK 磷酸化活性的影响 | 第97-98页 |
| ·激酶基因GsLRPK 在酵母中的超量表达和抗逆性分析 | 第98-99页 |
| ·激酶基因GsCBRLK、GsAPK 在拟南芥中的超量表达及抗逆功能分析 | 第99-111页 |
| ·激酶基因植物表达载体的构建 | 第99-101页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第101-102页 |
| ·抗性植株的分子生物学检测 | 第102-104页 |
| ·激酶基因GsCBRLK、GsAPK 超量表达植株的抗逆功能分析 | 第104-111页 |
| 4 讨论 | 第111-114页 |
| ·抗逆基因供体材料的选择 | 第111页 |
| ·目的基因的选择 | 第111页 |
| ·基于EST 的全长基因克隆 | 第111-112页 |
| ·对5’-RACE 技术的改进 | 第112-113页 |
| ·下一步工作展望 | 第113-114页 |
| 5 结论 | 第114-116页 |
| 致谢 | 第116-117页 |
| 参考文献 | 第117-121页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第121页 |
