| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-15页 |
| 1 文献综述 | 第15-48页 |
| ·土壤中磷元素的状况 | 第15-16页 |
| ·植物体对磷的吸收和磷在植物体内的存在形式 | 第16页 |
| ·磷元素的生物功能 | 第16-18页 |
| ·缺磷对玉米的影响 | 第18页 |
| ·植物耐低磷的适应性机制 | 第18-34页 |
| ·植物耐低磷的形态机制 | 第18-20页 |
| ·植物耐低磷的生理生化机制 | 第20-28页 |
| ·根系分泌有机酸 | 第20-21页 |
| ·根系分泌磷酸酶类 | 第21-24页 |
| ·植物激素的变化 | 第24-25页 |
| ·低磷胁迫诱导活性氧产生 | 第25-26页 |
| ·光合率的降低 | 第26-27页 |
| ·糖酵解途径的改变和选择性线粒体呼吸 | 第27-28页 |
| ·次级代谢的加强 | 第28页 |
| ·其他方面 | 第28页 |
| ·植物耐低磷的遗传机制 | 第28-34页 |
| ·控制根构型的QTL位点和基因 | 第29-30页 |
| ·调控体内外磷素代谢的基因 | 第30-31页 |
| ·调控磷素转运的相关基因 | 第31-32页 |
| ·响应低磷胁迫的调控系统 | 第32-34页 |
| ·差异表达基因功能研究的几种方法 | 第34-39页 |
| ·消减杂交 | 第35页 |
| ·mRNA差别显示技术 | 第35-36页 |
| ·cDNA代表性差异显示技术 | 第36页 |
| ·cDNA-AFLP技术 | 第36-37页 |
| ·抑制性消减杂交技术 | 第37-38页 |
| ·基因表达系列分析 | 第38页 |
| ·基因芯片技术 | 第38-39页 |
| ·生物信息学发展概况 | 第39-48页 |
| ·生物信息学概念和发展过程 | 第39-40页 |
| ·生物信息的研究内容 | 第40-48页 |
| ·生物信息的收集与管理 | 第40-42页 |
| ·序列比对 | 第42-43页 |
| ·序列分析 | 第43页 |
| ·基因表达数据的分析 | 第43-44页 |
| ·蛋白质结构和功能预测 | 第44-45页 |
| ·基因识别 | 第45-46页 |
| ·非编码区分析和DNA语言研究 | 第46页 |
| ·药物设计 | 第46页 |
| ·功能基因组 | 第46-47页 |
| ·蛋白质组学研究 | 第47-48页 |
| ·生物信息学所用的方法和技术 | 第48页 |
| ·生物信息学的应用领域 | 第48页 |
| 2 玉米耐低磷研究进展及本研究的目的意义 | 第48-54页 |
| 3 材料和方法 | 第54-69页 |
| ·实验材料 | 第54-55页 |
| ·实验技术路线 | 第55-56页 |
| ·实验方法 | 第56-69页 |
| ·总RNA的提取和质量检测 | 第56-58页 |
| ·mRNA的纯化 | 第58-59页 |
| ·抑制消减杂交 | 第59-65页 |
| ·cDNA双链的合成 | 第59-60页 |
| ·RsaⅠ酶切双链cDNA | 第60-61页 |
| ·Adaptor 1、Adaptor 2R接头的连接 | 第61-62页 |
| ·第一次消减杂交 | 第62-63页 |
| ·第二次消减杂交 | 第63-64页 |
| ·两次消减PCR扩增 | 第64-65页 |
| ·二次PCR产物的纯化回收 | 第65页 |
| ·消减文库的构建 | 第65-66页 |
| ·文库插入cDNA片段克隆的PCR检测 | 第66-67页 |
| ·测序及生物信息学比对 | 第67页 |
| ·EST序列分析 | 第67-68页 |
| ·玉米根系低磷响应EST序列与磷相关QTL位点的共定位分析 | 第68页 |
| ·重要功能EST序列半定量RT-PCR检测 | 第68-69页 |
| 4 结果与分析 | 第69-98页 |
| ·总RNA的提取和质量检测 | 第69-70页 |
| ·抑制消减杂交及文库的构建 | 第70-71页 |
| ·文库菌液PCR检测 | 第71页 |
| ·阳性克隆序列测定及功能比对 | 第71-74页 |
| ·EST序列推测功能的分类注释和分析 | 第74-90页 |
| ·能量代谢类 | 第75页 |
| ·氨基酸和蛋白质代谢类 | 第75-78页 |
| ·磷素循环类 | 第78-79页 |
| ·信号转导类 | 第79-80页 |
| ·细胞分裂和组成类 | 第80页 |
| ·胁迫相关类 | 第80-82页 |
| ·蛋白质互作类 | 第82页 |
| ·转录调控类 | 第82-84页 |
| ·通道蛋白类 | 第84页 |
| ·未知功能类 | 第84-85页 |
| ·差异表达基因EST序列与玉米耐低磷间关系的分析 | 第85-90页 |
| ·玉米根系增加磷素供应、压缩磷素消耗 | 第85-86页 |
| ·玉米根系内生长素合成和细胞分裂增加 | 第86页 |
| ·低磷胁迫下玉米根细胞加强了保护机制 | 第86页 |
| ·低磷胁迫下玉米根细胞的能量代谢加剧 | 第86-87页 |
| ·玉米根系内蛋白质合成的增加 | 第87页 |
| ·低磷胁迫下玉米根细胞的转录调控加强 | 第87-88页 |
| ·低磷胁迫下玉米根细胞中存在多条信号转导途径 | 第88-90页 |
| ·玉米低磷响应EST序列与磷相关QTL的共定位分析 | 第90-95页 |
| ·低磷胁迫EST序列染色体定位结果 | 第90-92页 |
| ·低磷胁迫单拷贝EST序列与磷相关QTL的共定位分析 | 第92-95页 |
| ·半定量RT-PCR基因表达研究 | 第95-98页 |
| ·设计并合成扩增引物 | 第95-96页 |
| ·合成玉米根系对照和低磷处理cDNA | 第96页 |
| ·确定半定量RT-PCR循环数和cDNA模板量 | 第96页 |
| ·半定量RT-PCR扩增结果与分析 | 第96-98页 |
| 5 讨论 | 第98-106页 |
| ·SSH技术应用于低磷胁迫玉米文库构建的可靠性 | 第98-100页 |
| ·玉米低磷胁迫响应涉及基因调控网络 | 第100-103页 |
| ·玉米低磷胁迫响应是基因顺序启动的过程 | 第103-104页 |
| ·耐低磷玉米品种的适应机制 | 第104-106页 |
| 6 今后的研究方向 | 第106页 |
| ·进一步挖掘文库中的EST序列 | 第106页 |
| ·深入研究可作为育种目标基因的低磷胁迫响应基因 | 第106页 |
| 7 结论 | 第106-109页 |
| 参考文献 | 第109-126页 |
| 致谢 | 第126-127页 |
| 附件:攻读学位期间发表的学术论文 | 第127页 |
