| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第1章 绪论 | 第10-23页 |
| 1.1 关节软骨组织 | 第10-12页 |
| 1.1.1 关节软骨组织的组成、结构和功能 | 第10-11页 |
| 1.1.2 关节软骨组织损伤及临床治疗 | 第11-12页 |
| 1.2 基于细胞的软骨再生修复策略 | 第12-14页 |
| 1.2.1 自体软骨细胞移植技术 | 第12-13页 |
| 1.2.2 软骨组织工程 | 第13-14页 |
| 1.3 3D细胞聚团应用于软骨组织再生 | 第14-21页 |
| 1.3.1 体外细胞培养方式 | 第14-15页 |
| 1.3.1.1 2D细胞培养 | 第14-15页 |
| 1.3.1.2 3D细胞培养 | 第15页 |
| 1.3.2 细胞聚团的基本概念 | 第15页 |
| 1.3.3 细胞聚团的制备方法 | 第15-18页 |
| 1.3.3.1 静态培养制备聚团 | 第16-17页 |
| 1.3.3.2 生物反应器动态培养制备细胞聚团 | 第17-18页 |
| 1.3.4 细胞聚团形成的分子机理 | 第18-20页 |
| 1.3.5 细胞聚团应用于软骨组织再生 | 第20-21页 |
| 1.3.5.1 软骨细胞聚团 | 第20页 |
| 1.3.5.2 MSCs聚团 | 第20-21页 |
| 1.3.5.3 软骨细胞和MSCs混合聚团 | 第21页 |
| 1.4 课题的提出 | 第21-23页 |
| 第2章 材料与方法 | 第23-31页 |
| 2.1 主要实验试剂 | 第23页 |
| 2.2 主要实验仪器 | 第23页 |
| 2.3 实验方法 | 第23-31页 |
| 2.3.1 bACs分离和培养 | 第23-24页 |
| 2.3.2 rMSCs分离和培养 | 第24页 |
| 2.3.3 细胞冻存和复苏 | 第24-25页 |
| 2.3.4 细胞传代培养和细胞标记 | 第25页 |
| 2.3.5 转瓶培养 | 第25-26页 |
| 2.3.6 DNA和GAG的定量分析 | 第26页 |
| 2.3.7 MTT测定 | 第26-27页 |
| 2.3.8 死活染色 | 第27页 |
| 2.3.9 SEM | 第27页 |
| 2.3.10 明场拍照及图象分析 | 第27页 |
| 2.3.11 PCR | 第27-30页 |
| 2.3.12 统计学分析 | 第30-31页 |
| 第3章 实验结果与讨论 | 第31-58页 |
| 3.1 转瓶生物反应器培养bACs形成聚团 | 第31-43页 |
| 3.1.1 转瓶生物反应器的搅拌转速对bACs成团的影响 | 第31-37页 |
| 3.1.1.1 搅拌转速对bACs成团速率的影响 | 第31-32页 |
| 3.1.1.2 细胞聚团形态分析 | 第32-33页 |
| 3.1.1.3 搅拌转速对bACs聚团尺寸和圆度的影响 | 第33-35页 |
| 3.1.1.4 死活染色 | 第35页 |
| 3.1.1.5 搅拌转速对bACs增殖和GAG分泌的影响 | 第35-37页 |
| 3.1.2 细胞接种密度对bACs成团的影响 | 第37-42页 |
| 3.1.2.1 细胞接种密度对bACs成团速率的影响 | 第37-38页 |
| 3.1.2.2 细胞聚团形态分析 | 第38-39页 |
| 3.1.2.3 细胞接种密度对bACs聚团尺寸和圆度的影响 | 第39-40页 |
| 3.1.2.4 细胞接种密度对bACs增殖和GAG分泌的影响 | 第40-42页 |
| 3.1.3 基因分析 | 第42-43页 |
| 3.2 转瓶生物反应器培养rMSCs形成聚团 | 第43-52页 |
| 3.2.1 转瓶生物反应器的搅拌转速对rMSCs成团的影响 | 第43-47页 |
| 3.2.1.1 搅拌转速对rMSCs成团速率的影响 | 第43-44页 |
| 3.2.1.2 细胞聚团形态分析 | 第44-45页 |
| 3.2.1.3 搅拌转速对rMSCs聚团尺寸和圆度的影响 | 第45-46页 |
| 3.2.1.4 搅拌转速对rMSCs增殖的影响 | 第46-47页 |
| 3.2.2 细胞接种密度对rMSCs成团的影响 | 第47-51页 |
| 3.2.2.1 细胞接种密度对rMSCs成团速率的影响 | 第47-48页 |
| 3.2.2.2 细胞聚团形态分析 | 第48-49页 |
| 3.2.2.3 细胞接种密度对rMSCs聚团尺寸和圆度的影响 | 第49-50页 |
| 3.2.2.4 死活染色 | 第50页 |
| 3.2.2.5 细胞接种密度对rMSCs增殖的影响 | 第50-51页 |
| 3.2.3 基因分析 | 第51-52页 |
| 3.3 转瓶混合培养bACs和rMSCs形成细胞聚团 | 第52-56页 |
| 3.3.1 bACs和rMSCs在转瓶中形成聚团 | 第52-53页 |
| 3.3.2 细胞聚团表面形态和内部分布 | 第53-54页 |
| 3.3.3 细胞聚团尺寸和圆度 | 第54-55页 |
| 3.3.4 细胞增殖及GAG分泌 | 第55-56页 |
| 3.4 本章小结 | 第56-58页 |
| 第4章 全文总结与展望 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 附：攻读硕士期间发表的论文 | 第68页 |
