| 致谢 | 第4-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-22页 |
| 1.1 植物对非生物胁迫的生理应答机制 | 第9-11页 |
| 1.1.1 高盐胁迫对植物的生理生化的影响 | 第9-10页 |
| 1.1.2 低温胁迫对植物的生理生化的影响 | 第10页 |
| 1.1.3 干旱胁迫对植物的生长和代谢的影 | 第10页 |
| 1.1.4 重金属胁迫对植物生长和代谢的影响 | 第10-11页 |
| 1.2 植物对干旱胁迫的应答机制 | 第11-13页 |
| 1.2.1 植物对干旱胁迫的生理生化应答 | 第11-12页 |
| 1.2.2 植物对干旱胁迫的基因调控应答 | 第12-13页 |
| 1.3 eIF2对蛋白翻译的调控机制以及研究进展 | 第13-16页 |
| 1.3.1 eIF2在蛋白质翻译水平的调控 | 第13-14页 |
| 1.3.2 eIF2α的激酶种类及其调控机制 | 第14-15页 |
| 1.3.3 GCN2激酶的调控机制及其研究进展 | 第15-16页 |
| 1.4 GCN相关蛋白的调控机制以及研究进展 | 第16-20页 |
| 1.4.1 GCN1/GCN20复合体… | 第16-18页 |
| 1.4.2 GCN2蛋白的调控机制 | 第18-19页 |
| 1.4.3 GCN4蛋白的激活机制 | 第19-20页 |
| 1.5 本研究的目的意义和技术路线 | 第20-22页 |
| 1.5.1 目的意义 | 第20页 |
| 1.5.2 技术路线 | 第20-22页 |
| 2 引言 | 第22-23页 |
| 3 材料与方法 | 第23-35页 |
| 3.1 材料 | 第23-26页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第23页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第23-24页 |
| 3.1.3 主要试剂和耗材 | 第24页 |
| 3.1.4 培养基和溶液的配制 | 第24-25页 |
| 3.1.5 实验所用引物 | 第25-26页 |
| 3.2 方法 | 第26-33页 |
| 3.2.1 T-DNA插入突变体鉴定 | 第26-27页 |
| 3.2.1.1 T-DNA插入突变体鉴定原理 | 第26页 |
| 3.2.1.2 T-DNA插入突变体鉴定步骤 | 第26-27页 |
| 3.2.2 GCN20基因的全长克隆 | 第27-28页 |
| 3.2.2.1 提RNA | 第27-28页 |
| 3.2.2.2 反转得到cDNA | 第28页 |
| 3.2.2.3 PCR扩增 | 第28页 |
| 3.2.3 目的基因的回收和纯化 | 第28-29页 |
| 3.2.4 目的基因与pMD18-T载体连接 | 第29页 |
| 3.2.5 大肠杆菌DH5α感受态的制备 | 第29-30页 |
| 3.2.6 目的基因转化大肠杆菌DH5α感受态细胞 | 第30页 |
| 3.2.7 阳性单克隆菌落PCR鉴定 | 第30-31页 |
| 3.2.8 提取质粒DNA | 第31-32页 |
| 3.2.9 质粒DNA双酶切和连接 | 第32-33页 |
| 3.3 农杆菌转化拟南芥 | 第33-34页 |
| 3.3.1 Col、gcn20突变体的种植 | 第33页 |
| 3.3.2 农杆菌GV3101感受态细胞的制备 | 第33页 |
| 3.3.3 重组质粒转化农杆菌及阳性克隆的筛选 | 第33-34页 |
| 3.3.4 农杆菌侵染拟南芥 | 第34页 |
| 3.4 GUS染色 | 第34-35页 |
| 4 结果与分析 | 第35-40页 |
| 4.1 gcn20(055035C)T-DNA插入纯合突变体鉴定 | 第35页 |
| 4.2 Col和gcn20植株的表型 | 第35页 |
| 4.3 GCN20载体的构建及转化 | 第35-38页 |
| 4.3.1 克隆得到GCN20全长 | 第36页 |
| 4.3.2 GCN20全长与T载体连接 | 第36-37页 |
| 4.3.3 GCN20测序结果分析 | 第37页 |
| 4.3.4 GCN20全长与1300-GFP载体、启动子与1391载体连接 | 第37-38页 |
| 4.4 转基因拟南芥的筛选 | 第38-39页 |
| 4.4.1 抗生素筛选 | 第38-39页 |
| 4.4.2 转基因拟南芥基因水平上CaMV35sPCR鉴定 | 第39页 |
| 4.5 gcn20突变体中GCN20表达量分析 | 第39-40页 |
| 4.6 GUS染色结果 | 第40页 |
| 5 结论与讨论 | 第40-42页 |
| 5.1 结论 | 第40-41页 |
| 5.2 讨论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-48页 |
| ABSTRACT | 第48页 |
