摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第12-32页 |
1 猪圆环病毒2型 | 第12-19页 |
1.1 PCV2基因组结构 | 第12-13页 |
1.2 PCV2主要编码蛋白 | 第13-14页 |
1.2.1 Cap蛋白 | 第13页 |
1.2.2 Rep蛋白 | 第13-14页 |
1.3 PCV2感染与发病 | 第14-15页 |
1.3.1 人工感染PCV2 | 第14页 |
1.3.2 PMWS | 第14-15页 |
1.4 PCV2疫苗 | 第15-19页 |
1.4.1 PCV2灭活疫苗 | 第16页 |
1.4.2 亚单位疫苗 | 第16-17页 |
1.4.3 弱毒疫苗 | 第17-18页 |
1.4.4 病毒样颗粒 | 第18页 |
1.4.5 核酸疫苗 | 第18-19页 |
2 猪繁殖与呼吸综合征 | 第19-24页 |
2.1 病毒基因组结构与编码蛋白 | 第19-20页 |
2.2 PRRSV的致病机制 | 第20页 |
2.3 商品化疫苗 | 第20-21页 |
2.3.1 灭活疫苗 | 第21页 |
2.3.2 弱毒活疫苗 | 第21页 |
2.4 新型实验疫苗 | 第21-24页 |
2.4.1 改良弱毒活疫苗 | 第21-22页 |
2.4.2 亚单位疫苗 | 第22-23页 |
2.4.3 DNA疫苗 | 第23-24页 |
参考文献 | 第24-32页 |
第二章 猪圆环病毒2型LP86毒株对仔猪致病性研究 | 第32-56页 |
1 材料与方法 | 第33-39页 |
1.1 细胞和病毒 | 第33页 |
1.2 试剂 | 第33页 |
1.3 仔猪PCV2感染试验 | 第33-34页 |
1.4 仔猪PCV2和PRRSV共感染试验 | 第34页 |
1.5 临床症状统计 | 第34-35页 |
1.6 荧光定量PCR检测淋巴结和血清中PCV2 DNA含量 | 第35-36页 |
1.6.1 样品DNA提取 | 第35-36页 |
1.6.2 SYBR Green实时PCR | 第36页 |
1.7 荧光定量PCR检测血清和肺脏中PRRSV RNA的含量 | 第36-37页 |
1.7.1 样品总RNA的提取 | 第36-37页 |
1.7.2 逆转录 | 第37页 |
1.7.3 YBR Green实时PCR | 第37页 |
1.8 病理学观察 | 第37-39页 |
1.8.1 病理组织切片制备方法 | 第37-38页 |
1.8.2 组织切片染色方法 | 第38页 |
1.8.3 免疫组织化学 | 第38-39页 |
1.9 数据统计分析 | 第39页 |
2 结果 | 第39-49页 |
2.1 仔猪PCV2感染试验 | 第39-44页 |
2.1.1 临床症状 | 第39-41页 |
2.1.2 肉眼病理变化 | 第41-42页 |
2.1.3 组织病理学变化 | 第42页 |
2.1.4 免疫组织化学 | 第42-43页 |
2.1.5 病毒血症与淋巴病毒载量 | 第43-44页 |
2.2 仔猪共感染试验 | 第44-49页 |
2.2.1 体温变化和临床症状 | 第44-46页 |
2.2.2 肉眼病理变化 | 第46页 |
2.2.3 组织病理学变化 | 第46-47页 |
2.2.4 免疫组化 | 第47-48页 |
2.2.5 病毒血症 | 第48页 |
2.2.6 肺脏和淋巴结中病毒载量 | 第48-49页 |
3 讨论 | 第49-52页 |
参考文献 | 第52-56页 |
第三章 猪圆环病毒2型Cap-SS融合蛋白亚单位疫苗制备与小鼠免疫效力研究 | 第56-70页 |
1 材料与方法 | 第57-59页 |
1.1 质粒、菌株和试剂 | 第57页 |
1.2 质粒的表达鉴定与分析 | 第57-58页 |
1.2.1 质粒的转化与表达 | 第57页 |
1.2.2 SDS-PAGE分析重组蛋白表达 | 第57-58页 |
1.2.3 Western blot鉴定重组蛋白 | 第58页 |
1.3 重组蛋白与疫苗制备 | 第58-59页 |
1.3.1 重组蛋白大量表达 | 第58页 |
1.3.2 灰度分析定量 | 第58-59页 |
1.3.3 疫苗配制 | 第59页 |
1.4 小鼠免疫试验 | 第59页 |
1.5 PCV2 ELISA抗体检测方法 | 第59页 |
2 结果 | 第59-66页 |
2.1 重组蛋白特异性鉴定 | 第59-60页 |
2.2 重组蛋白的表达 | 第60-62页 |
2.3 疫苗制备 | 第62-63页 |
2.4 小鼠免疫试验结果 | 第63-66页 |
2.4.1 小鼠体重变化 | 第63-64页 |
2.4.2 ELISA方法检测小鼠血清PCV2抗体效价 | 第64-66页 |
3 讨论 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-70页 |
全文总结 | 第70-72页 |
致谢 | 第72页 |