| 中文摘要 | 第3-5页 |
| 英文摘要 | 第5-7页 |
| 1 绪论 | 第11-19页 |
| 1.1 引言 | 第11-12页 |
| 1.2 研究进展 | 第12-16页 |
| 1.2.1 绿僵菌致病机制的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.2.2 绿僵菌产孢方式的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.2.3 精氨酸酶(Arginase)基因的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2.4 Arginine-NO代谢途径的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.3 研究目的及研究意义 | 第16页 |
| 1.3.1 研究目的 | 第16页 |
| 1.3.2 研究意义 | 第16页 |
| 1.4 研究内容和技术路线 | 第16-17页 |
| 1.4.1 研究内容 | 第16页 |
| 1.4.2 技术路线 | 第16-17页 |
| 1.5 本研究创新之处 | 第17-19页 |
| 2 蝗绿僵菌微循环产孢相关基因之间调控关系的研究 | 第19-29页 |
| 2.1 实验材料与方法 | 第19-24页 |
| 2.1.1 供试菌株 | 第19页 |
| 2.1.2 主要培养基(配方见附录) | 第19页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第19页 |
| 2.1.4 主要设备 | 第19-20页 |
| 2.1.5 主要实验配制溶液 | 第20页 |
| 2.1.6 蝗绿僵菌微循环产孢相关基因敲除菌株与野生型菌株产孢方式的观察 | 第20-21页 |
| 2.1.7 RNA样品的制备 | 第21-22页 |
| 2.1.8 实时定量PCR验证各基因之间的调控关系 | 第22-24页 |
| 2.1.9 数据处理及显著性分析 | 第24页 |
| 2.2 实验结果与分析 | 第24-29页 |
| 2.2.1 各敲除菌株与野生型菌株产孢方式的差异分析 | 第24-26页 |
| 2.2.2 微循环产孢相关基因之间的相互调控关系 | 第26-29页 |
| 3 MaAGA的功能分析及其调控微循环产孢方式的分子机制研究 | 第29-54页 |
| 3.1 实验材料与方法 | 第29-40页 |
| 3.1.1 供试菌株 | 第29页 |
| 3.1.2 质粒载体 | 第29页 |
| 3.1.3 主要培养基及溶液(配方见附录) | 第29页 |
| 3.1.4 主要试剂 | 第29-30页 |
| 3.1.5 主要设备 | 第30页 |
| 3.1.6 MaAGA回复载体及超表达载体的构建 | 第30-33页 |
| 3.1.7 连接产物转化大肠杆菌 | 第33页 |
| 3.1.8 农杆菌介导的蝗绿僵菌的遗传转化 | 第33-34页 |
| 3.1.9 微量提取真菌基因组及转化子验证 | 第34-35页 |
| 3.1.10 大量真菌基因组提取 | 第35页 |
| 3.1.11 Southern杂交验证MaAGA敲除和回复转化子 | 第35-36页 |
| 3.1.12 MaAGA基因功能研究 | 第36-37页 |
| 3.1.13 蝗绿僵菌精氨酸酶(Arginase)活性的检测 | 第37-38页 |
| 3.1.14 不同浓度代谢产物对蝗绿僵菌菌落生长的影响 | 第38页 |
| 3.1.15 鸟氨酸代谢相关基因在蝗绿僵菌中的表达情况 | 第38-39页 |
| 3.1.16 一氧化氮合酶(NOS)活性检测 | 第39页 |
| 3.1.17 一氧化氮(NO)含量检测 | 第39-40页 |
| 3.1.18 一氧化氮(NO)对蝗绿僵菌产孢方式的影响 | 第40页 |
| 3.1.19 数据处理及显著性分析 | 第40页 |
| 3.2 实验结果与分析 | 第40-54页 |
| 3.2.1 成功构建MaAGA回复载体 | 第40-41页 |
| 3.2.2 MaAGA对蝗绿僵菌生长能力的影响 | 第41-43页 |
| 3.2.3 MaAGA对蝗绿僵菌抗逆能力的影响 | 第43-45页 |
| 3.2.4 MaAGA不影响蝗绿僵菌的毒力 | 第45-46页 |
| 3.2.5 MaAGA定位于细胞质中 | 第46-47页 |
| 3.2.6 MaAGA参与调控蝗绿僵菌的微循环产孢 | 第47-48页 |
| 3.2.7 Arginase降解Arginine的直接代谢产物无法使微循环产孢回复 | 第48-51页 |
| 3.2.8 MaAGA影响蝗绿僵菌的NOS活性及NO含量 | 第51-52页 |
| 3.2.9 MaAGA的缺失降低了NO含量进而调控了蝗绿僵菌的微循环产孢 | 第52-54页 |
| 4 讨论 | 第54-59页 |
| 4.1 丝状真菌产孢调控通路的分析 | 第54-56页 |
| 4.1.1 正常产孢调控通路的研究 | 第54页 |
| 4.1.2 微循环产孢调控通路的研究 | 第54-56页 |
| 4.2 MaAGA基因的功能分析 | 第56页 |
| 4.3 MaAGA调控微循环产孢机制的分析 | 第56-58页 |
| 4.4 一氧化氮功能的分析 | 第58-59页 |
| 5 本研究的主要结论与后续工作建议 | 第59-61页 |
| 5.1 主要结论 | 第59页 |
| 5.2 后续工作建议 | 第59-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 附录 | 第68-72页 |
| A 作者在攻读硕士学位期间发表论文的目录 | 第68-69页 |
| B 培养基及溶液配方 | 第69-72页 |
