| 中文摘要 | 第3-4页 |
| 英文摘要 | 第4-5页 |
| 1 绪论 | 第8-14页 |
| 1.1 引言 | 第8-11页 |
| 1.1.1 绿僵菌侵染致病机理 | 第8-10页 |
| 1.1.2 昆虫免疫反应机制 | 第10页 |
| 1.1.3 Som1的相关研究进展 | 第10-11页 |
| 1.2 研究目的与研究意义 | 第11-12页 |
| 1.2.1 研究目的 | 第11-12页 |
| 1.2.2 研究意义 | 第12页 |
| 1.3 研究内容 | 第12-13页 |
| 1.4 技术路线 | 第13页 |
| 1.5 本研究创新之处 | 第13-14页 |
| 2 蝗绿僵菌MaSom1的功能分析 | 第14-52页 |
| 2.1 主要材料 | 第14-20页 |
| 2.1.1 供试菌株和昆虫 | 第14页 |
| 2.1.2 质粒载体 | 第14页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第14-15页 |
| 2.1.4 主要培养基 | 第15-16页 |
| 2.1.5 主要实验溶液 | 第16-19页 |
| 2.1.6 主要设备 | 第19-20页 |
| 2.2 主要方法 | 第20-35页 |
| 2.2.1 MaSom1 cDNAORF全长的克隆 | 第20-21页 |
| 2.2.2 MaSom1生物信息学分析 | 第21页 |
| 2.2.3 连接产物转化大肠杆菌感受态细胞 | 第21-22页 |
| 2.2.4 根癌农杆菌感受态细胞的制备及电转化 | 第22页 |
| 2.2.5 根癌农杆菌介导的蝗绿僵菌转化 | 第22-23页 |
| 2.2.6 微量提取真菌基因组 | 第23页 |
| 2.2.7 大量提取蝗绿僵菌基因组 | 第23页 |
| 2.2.8 MaSom1敲除和回复载体的构建 | 第23-26页 |
| 2.2.9 初步筛选验证敲除菌株、回复菌株 | 第26-27页 |
| 2.2.10 Southernblot进一步验证MaSom1敲除和回复菌株 | 第27-29页 |
| 2.2.11 蝗绿僵菌RNA提取及cDNA反转录 | 第29-30页 |
| 2.2.12 Quantitative Real-time PCR(qRT-PCR)实验 | 第30-31页 |
| 2.2.13 MaSom1生长特性分析 | 第31页 |
| 2.2.14 MaSom1逆境敏感性分析 | 第31页 |
| 2.2.15 毒力实验分析 | 第31-32页 |
| 2.2.16 亚细胞定位分析 | 第32页 |
| 2.2.17 虫菌体的体外培养和标准曲线法相对定量 | 第32-33页 |
| 2.2.18 蝗绿僵菌孢子在东亚飞蝗后翅上的萌发和附着胞的形成 | 第33页 |
| 2.2.19 血清酚氧化酶(PO)活性的测定 | 第33-34页 |
| 2.2.20 细胞壁凝集素染色 | 第34页 |
| 2.2.21 细胞壁荧光抗体染色 | 第34页 |
| 2.2.22 Toll通路免疫基因定量检测 | 第34页 |
| 2.2.23 结节形成的观察 | 第34-35页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第35-49页 |
| 2.3.1 MaSom1的生物信息学分析 | 第35-36页 |
| 2.3.2 MaSom1重组载体构建及转化菌株验证 | 第36-37页 |
| 2.3.3 蝗绿僵菌MaSom1主要定位于细胞核 | 第37-38页 |
| 2.3.4 敲除MaSom1后蝗绿僵菌的萌发延迟和产孢量下降 | 第38-40页 |
| 2.3.5 敲除MaSom1后蝗绿僵菌的湿热和紫外耐受性降低 | 第40-41页 |
| 2.3.6 敲除MaSom1影响蝗绿僵菌的细胞壁完整性和分生孢子表面结构 | 第41-43页 |
| 2.3.7 敲除MaSom1后蝗绿僵菌的毒力降低 | 第43-45页 |
| 2.3.8 敲除MaSom1后蝗绿僵菌的附着胞形成率和虫菌体生长量均降低 | 第45-47页 |
| 2.3.9 MaSom1参与蝗绿僵菌对昆虫免疫防御的逃避 | 第47-49页 |
| 2.4 讨论 | 第49-52页 |
| 3 主要结论和后续工作建议 | 第52-53页 |
| 3.1 主要研究结论绿僵菌的附着胞形成率和虫菌体生长量均降低 | 第52页 |
| 3.2 后续工作建议 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 附录 | 第61-65页 |
| A 作者在攻读硕士学位期间发表论文目录 | 第61-62页 |
| B 引物序列 | 第62-64页 |
| C MaSom1的cDNA序列 | 第64-65页 |
