| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 中文摘要 | 第11-13页 |
| ABSTRACT | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-26页 |
| 1. 天然免疫的研究进展 | 第15-18页 |
| 1.1 动物的天然免疫研究进展 | 第15页 |
| 1.2 植物的天然免疫研究进展 | 第15-16页 |
| 1.3 动物和植物天然免疫系统的趋同进化研究进展 | 第16-17页 |
| 1.4 用于研究天然免疫的动物模型 | 第17-18页 |
| 2. 秀丽隐杆线虫作为寄主模式生物的研究进展 | 第18-23页 |
| 2.1 模型优势 | 第18-19页 |
| 2.2 C. elegans作为感染模型宿主的研究进展 | 第19-23页 |
| 2.2.1 能引起线虫感染的病原菌 | 第19-20页 |
| 2.2.2 病原菌的感染方式 | 第20-21页 |
| 2.2.3 C. elegans感染后的免疫应答研究进展 | 第21-23页 |
| 3. 黄单胞菌(Xanthomonas)作为模式病原菌研究进展 | 第23-24页 |
| 4. 课题的提出 | 第24-26页 |
| 第二章 植物病原细菌黄单胞菌能够感染秀丽隐杆线虫 | 第26-44页 |
| 1. 前言 | 第26页 |
| 2. 材料和方法 | 第26-32页 |
| 2.1 试剂与材料 | 第26-28页 |
| 2.1.1 菌株和线虫株系 | 第26-27页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第27页 |
| 2.1.3 主要溶液及培养基的配制 | 第27页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第27-28页 |
| 2.2 方法 | 第28-32页 |
| 2.2.1 实验微生物的培养 | 第28页 |
| 2.2.2 线虫的培养 | 第28-29页 |
| 2.2.3 植物病原菌处理后线虫的存活分析 | 第29页 |
| 2.2.4 病原菌感染水稻叶片 | 第29页 |
| 2.2.5 病原菌代谢物对线虫的致死作用 | 第29-30页 |
| 2.2.6 灭活Xoo对线虫存活率的影响 | 第30页 |
| 2.2.7 Xoo在线虫肠道内的定殖 | 第30-31页 |
| 2.2.8 生物膜实验 | 第31页 |
| 2.2.9 病原菌对线虫咽泵速率的影响 | 第31页 |
| 2.2.10 线虫的食物选择 | 第31页 |
| 2.2.11 线虫的体长 | 第31-32页 |
| 2.3 数据处理 | 第32页 |
| 3. 结果与分析 | 第32-41页 |
| 3.1 黄单胞菌能在不同程度上影响线虫的存活率 | 第32-33页 |
| 3.2 黄单胞菌能引发不同程度的水稻叶片枯萎 | 第33页 |
| 3.3 病原菌的代谢产物对秀丽隐杆线虫的致死性 | 第33-35页 |
| 3.3.1 固体板分析病原菌的代谢产物对线虫的急性毒性 | 第34页 |
| 3.3.2 液体板上病原菌的代谢产物对线虫的急性毒性 | 第34-35页 |
| 3.4 灭活菌液处理后线虫寿命的变化 | 第35-36页 |
| 3.5 黄单胞菌能在线虫肠区定殖 | 第36-37页 |
| 3.5.1 电子显微镜观察黄单胞菌在线虫肠区的定殖情况 | 第36-37页 |
| 3.5.2 病原菌在线虫肠区克隆数(CFU)的变化 | 第37页 |
| 3.6 黄单胞菌生物膜的形成 | 第37-38页 |
| 3.7 黄单胞菌处理后线虫咽泵速率的变化 | 第38-39页 |
| 3.8 线虫对黄单胞菌的食物选择性 | 第39-41页 |
| 3.9 黄单胞菌处理后线虫体长的变化 | 第41页 |
| 4. 讨论 | 第41-44页 |
| 第三章 黄单胞菌感染秀丽隐杆线虫后引发的天然免疫应答 | 第44-74页 |
| 1. 前言 | 第44-45页 |
| 2. 材料和方法 | 第45-52页 |
| 2.1 试剂与材料 | 第45-47页 |
| 2.1.1 菌株和线虫株系 | 第45-46页 |
| 2.1.2 主要试剂和试剂盒 | 第46页 |
| 2.1.3 主要溶液及培养基的配制 | 第46页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第46-47页 |
| 2.2 方法 | 第47-52页 |
| 2.2.1 实验微生物的培养 | 第47页 |
| 2.2.2 线虫的培养 | 第47页 |
| 2.2.3 黄单胞菌处理后线虫的存活分析 | 第47-48页 |
| 2.2.4 病原菌对线虫的急性毒性 | 第48页 |
| 2.2.5 Xoo处理后线虫的后代数分析 | 第48页 |
| 2.2.6 Xoo对线虫排卵的影响 | 第48-49页 |
| 2.2.7 微分干涉相差显微镜(DIC)观察Xoo对线虫的感染 | 第49页 |
| 2.2.8 Xoo感染线虫后宿主体内病原菌克隆数(CFU)分析 | 第49页 |
| 2.2.9 PX099和JXOⅢ处理线虫后免疫相关基因表达量的变化 | 第49-51页 |
| 2.2.10 PX099和JXOⅢ感染线虫后DAF-16的核转位分析 | 第51-52页 |
| 2.2.11 PX099和JXOⅢ感染线虫后宿主的免疫印迹分析 | 第52页 |
| 2.3 数据处理 | 第52页 |
| 3. 结果与分析 | 第52-71页 |
| 3.1 水稻白叶枯病菌PX099和JxOⅢ能使线虫存活率降低 | 第52-54页 |
| 3.2 Xoo对线虫的致死作用不依赖于病原菌的代谢产物 | 第54-55页 |
| 3.2.1 固体板上病原菌代谢物对线虫的致死作用 | 第55页 |
| 3.2.2 96孔板液体毒性的结果 | 第55页 |
| 3.3 Xoo处理后线虫的后代数减少 | 第55-57页 |
| 3.4 Xoo能够定殖于线虫肠道引发持续感染 | 第57-59页 |
| 3.5 Xoo感染能抑制线虫的排卵 | 第59-60页 |
| 3.6 Xoo感染后免疫相关基因表达量的变化 | 第60-63页 |
| 3.6.1 线虫总RNA的提取结果 | 第60页 |
| 3.6.2 常规PCR验证引物 | 第60-61页 |
| 3.6.3 RT-PCR的标准曲线和熔解曲线 | 第61页 |
| 3.6.4 p38 MAPK在线虫抵御Xoo感染中的作用 | 第61页 |
| 3.6.5 daf-2突变条件下,DAF-2/DAF-16信号通路在线虫抵御Xoo感染中的作用 | 第61页 |
| 3.6.6 p38 MAPK和DAF-2/DAF-16信号通路相互作用的研究 | 第61-63页 |
| 3.7 Xoo感染后DAF-16不发生核转位 | 第63-65页 |
| 3.8 免疫印迹 | 第65页 |
| 3.9 黄单胞菌对DR1564(daf-2), CB1370(daf-2),CF1295(daf-2; daf-16)突变体线虫存活率的影响 | 第65-66页 |
| 3.10 黄单胞菌对KU4(sek-1),SS104(glp-4),AU37(glp-4; sek-1)突变体线虫存活率的影响 | 第66-71页 |
| 4. 讨论 | 第71-74页 |
| 第四章 植物病原细菌Xoo感染C. elegans引发的自主与非自主性天然免疫应答 | 第74-93页 |
| 1. 前言 | 第74-75页 |
| 2. 材料和方法 | 第75-79页 |
| 2.1 试剂与材料 | 第75-76页 |
| 2.1.1 菌株和线虫株系 | 第75页 |
| 2.1.2 主要试剂和试剂盒 | 第75-76页 |
| 2.1.3 主要溶液及培养基的配制 | 第76页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第76页 |
| 2.2 方法 | 第76-79页 |
| 2.2.1 实验微生物的培养 | 第76页 |
| 2.2.2 线虫的逃逸反应 | 第76页 |
| 2.2.3 线虫总蛋白的测定(Lowry法) | 第76-78页 |
| 2.2.4 线虫的摄食应答 | 第78页 |
| 2.2.5 线虫体长的测定 | 第78页 |
| 2.2.6 线虫的生存分析 | 第78页 |
| 2.2.7 荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测p38 MAPK通路下游基因的表达 | 第78-79页 |
| 2.3 数据处理 | 第79页 |
| 3. 结果与分析 | 第79-90页 |
| 3.1 tol-1和sek-1基因不参与线虫的逃逸行为 | 第79-81页 |
| 3.2 N2和KU4(sek-1)线虫对病原菌PX099,JxOⅢ和E.faecalis的摄食行为 | 第81-83页 |
| 3.3 PX099,JxOⅢ和E.faecalis处理KU4(sek-1)线虫后24h和96h线虫的体长变化 | 第83页 |
| 3.4 逃逸行为对线虫存活率的影响 | 第83-87页 |
| 3.4.1 PX099,JXOⅢ和E.faecalis处理后N2,IG10(tol-1)和KU4(sek-1)线虫的存活率变化 | 第83-85页 |
| 3.4.2 PX099处理N2,KU4(sek-1),ZD260,ZD202,ZD193线虫后的存活率变化 | 第85-87页 |
| 3.5 免疫相关基因C17H12.8,F08G5.6,F56D6.2,T24B8.5在各线虫株系中表达量的变化 | 第87-90页 |
| 3.5.1 线虫总RNA的提取结果 | 第87页 |
| 3.5.2 常规PCR验证引物 | 第87-88页 |
| 3.5.3 RT-PCR的标准曲线和熔解曲线 | 第88页 |
| 3.5.4 基因C17H12.8, F08G5.6, F56D6.2, T24B8.5表达量的变化 | 第88-90页 |
| 4. 讨论 | 第90-93页 |
| 第五章 结论 | 第93-95页 |
| 参考文献 | 第95-103页 |
| 在学期间的研究成果 | 第103-104页 |
| 致谢 | 第104页 |
