致谢 | 第5-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
缩略词 | 第16-18页 |
第一章 文献综述 | 第18-24页 |
1 骨关节炎研究背景 | 第18页 |
2 常见植物多酚对骨关节炎的防治研究进展 | 第18-20页 |
2.1 白藜芦醇对骨关节炎的防治作用研究进展 | 第19页 |
2.2 姜黄素对骨关节炎的防治作用研究进展 | 第19页 |
2.3 茶多酚对骨关节炎的防治作用研究进展 | 第19-20页 |
3 立题依据 | 第20-22页 |
4 研究目的及意义 | 第22-23页 |
5 研究内容和技术路线 | 第23-24页 |
5.1 研究内容 | 第23页 |
5.2 技术路线 | 第23-24页 |
第二章 IL-1β诱导大鼠软骨细胞炎性损伤模型的建立及评价 | 第24-38页 |
1 引言 | 第24页 |
2 材料和方法 | 第24-32页 |
2.1 实验材料 | 第24-28页 |
2.1.1 实验动物 | 第24页 |
2.1.2 主要仪器设备 | 第24-25页 |
2.1.3 主要试剂及抗体 | 第25-26页 |
2.1.4 主要试剂配制 | 第26-28页 |
2.2 实验方法 | 第28-31页 |
2.2.1 大鼠膝关节软骨细胞的分离和培养 | 第28页 |
2.2.2 甲苯胺蓝染色鉴定软骨细胞 | 第28页 |
2.2.3 Col Ⅱ免疫细胞荧光染色鉴定软骨细胞 | 第28-29页 |
2.2.4 CCK-8法检测IL-1β对正常大鼠软骨细胞活性的影响 | 第29页 |
2.2.5 实验分组与处理 | 第29页 |
2.2.6 实时定量PCR(Real-time PCR)检测IL-1β对正常大鼠软骨细胞IL-1β、IL-6和COX-2 mRNA表达的影响 | 第29-30页 |
2.2.7 酶联免疫吸附实验(ELISA)检测IL-1β对正常大鼠软骨细胞IL-1β和IL-6蛋白分泌量的影响 | 第30-31页 |
2.2.8 免疫印迹(Western blot)检测IL-1β对正常大鼠软骨细胞COX-2蛋白表达的影响 | 第31页 |
2.3 统计学分析 | 第31-32页 |
3 结果与分析 | 第32-36页 |
3.1 正常软骨细胞的形态学观察 | 第32页 |
3.2 软骨细胞鉴定 | 第32-33页 |
3.3 IL-1β对大鼠软骨细胞形态的影响 | 第33-34页 |
3.4 IL-1β对正常大鼠软骨细胞活力的影响 | 第34页 |
3.5 IL-1β对正常大鼠软骨细胞IL-1β、IL-6和COX-2 mRNA表达的影响 | 第34-35页 |
3.6 IL-1β对正常大鼠软骨细胞IL-1β、IL-6蛋白分泌量的影响 | 第35页 |
3.7 IL-1β对正常大鼠软骨细胞COX-2蛋白表达的影响 | 第35-36页 |
4 讨论与小结 | 第36-38页 |
4.1 软骨细胞体外培养 | 第36-37页 |
4.2 IL-1β在骨关节炎病变中的作用及模型的应用 | 第37-38页 |
第三章 茶黄素双没食子酸酯对IL-1β诱导大鼠软骨细胞炎性反应的影响 | 第38-48页 |
1 引言 | 第38页 |
2 材料和方法 | 第38-40页 |
2.1 实验材料 | 第38-39页 |
2.1.1 实验动物及主要仪器设备 | 第38页 |
2.1.2 主要试剂及抗体 | 第38-39页 |
2.2 实验方法 | 第39-40页 |
2.2.1 CCK-8法检测TFDG对正常大鼠软骨细胞活性的影响 | 第39页 |
2.2.2 CCK-8法检测TFDG对IL-1β诱导大鼠软骨细胞活性的影响 | 第39-40页 |
2.2.3 实验分组与处理 | 第40页 |
2.2.4 实时荧光定量PCR检测TFDG对IL-1β诱导大鼠软骨细胞IL-1β、IL-6和COX-2mRNA表达的影响 | 第40页 |
2.2.5 酶联免疫吸附实验检测TFDG对IL-1β诱导大鼠软骨细胞IL-1β和IL-6蛋白分泌量的影响 | 第40页 |
2.2.6 免疫印迹检测TFDG对IL-1β诱导大鼠软骨细胞COX-2蛋白表达的影响 | 第40页 |
2.3 统计学分析 | 第40页 |
3 结果与分析 | 第40-46页 |
3.1 不同浓度TFDG对正常大鼠软骨细胞活力的影响 | 第40-41页 |
3.2 不同浓度TFDG对IL-1β诱导大鼠软骨细胞活力的影响 | 第41-42页 |
3.3 TFDG对IL-1β诱导大鼠软骨细胞IL-1β和IL-6 mRNA表达的影响 | 第42-43页 |
3.4 TFDG对IL-1β诱导大鼠软骨细胞IL-1β和IL-6蛋白分泌量的影响 | 第43-44页 |
3.5 TFDG对IL-1β诱导大鼠软骨细胞COX-2 mRNA表达的影响 | 第44-45页 |
3.6 TFDG对IL-1β诱导大鼠软骨细胞COX-2蛋白表达的影响 | 第45-46页 |
4 讨论与小结 | 第46-48页 |
4.1 TFDG对对IL-1β体外诱导大鼠软骨细胞炎性反应的影响 | 第46-47页 |
4.2 小结 | 第47-48页 |
第四章 茶黄素双没食子酸酯对IL-1β诱导大鼠软骨基质降解的影响 | 第48-59页 |
1 引言 | 第48-49页 |
2 材料和方法 | 第49-51页 |
2.1 实验材料 | 第49页 |
2.1.1 材料、试剂和实验动物 | 第49页 |
2.1.2 主要仪器设备 | 第49页 |
2.2 实验方法 | 第49-50页 |
2.2.1 实验分组与处理 | 第50页 |
2.2.2 实时定量PCR检测 | 第50页 |
2.2.3 免疫印迹检测 | 第50页 |
2.3 统计学分析 | 第50-51页 |
3 结果与分析 | 第51-55页 |
3.1 TFDG对IL-1β诱导大鼠软骨细胞Col Ⅱ和ACAN mRNA表达的影响 | 第51-52页 |
3.2 TFDG对IL-1β诱导大鼠软骨细胞MMP-13 mRNA表达的影响 | 第52页 |
3.3 TFDG对IL-1β诱导大鼠软骨细胞MMP-13蛋白表达的影响 | 第52-53页 |
3.4 TFDG对IL-1β诱导大鼠软骨细胞ADAMTS-5 mRNA表达的影响 | 第53-54页 |
3.5 TFDG对IL-1β诱导大鼠软骨细胞ADAMTS-5蛋白表达的影响 | 第54-55页 |
4 讨论 | 第55-59页 |
4.1 炎症引起的细胞外基质变化对骨关节炎的影响 | 第55页 |
4.2 细胞外基质降解中的关键酶 | 第55-56页 |
4.3 TFDG对IL-1β体外诱导大鼠软骨基质降解的影响 | 第56-57页 |
4.4 小结 | 第57-59页 |
第五章 茶黄素双没食子酸酯对IL-1β诱导大鼠软骨细胞炎性损伤的保护作用机制 | 第59-64页 |
1 引言 | 第59页 |
2 材料和方法 | 第59-60页 |
2.1 实验材料 | 第59-60页 |
2.2 实验方法 | 第60页 |
2.2.1 大鼠膝关节软骨细胞的分离和培养 | 第60页 |
2.2.2 实验分组与处理 | 第60页 |
2.2.3 免疫印迹检测 | 第60页 |
2.3 统计学分析 | 第60页 |
3 结果与分析 | 第60-63页 |
3.1 TFDG对IL-1β诱导大鼠软骨细胞β38磷酸化水平的影响 | 第60-61页 |
3.2 TFDG对IL-1β诱导大鼠软骨细胞JNK磷酸化水平的影响 | 第61-62页 |
3.3 TFDG对IL-1β诱导大鼠软骨细胞ERK磷酸化水平的影响 | 第62-63页 |
4 讨论 | 第63-64页 |
第六章 结论 | 第64-66页 |
1 本研究的主要结论 | 第64页 |
2 本研究的创新之处 | 第64-65页 |
3 不足与展望 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-74页 |
作者简历及在学期间所取得的科研成果 | 第74-75页 |