| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略语表 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-37页 |
| 1.1 植物抗病反应机制 | 第14-26页 |
| 1.1.1 植物的先天免疫 | 第14-19页 |
| 1.1.2 水杨酸和茉莉酸介导的抗病信号路径及其交互作用 | 第19-24页 |
| 1.1.3 其他激素介导的抗病信号路径及其交互作用 | 第24-25页 |
| 1.1.4 病原菌“修饰”抗病信号路径突破植物防守 | 第25-26页 |
| 1.2 植物与植食性昆虫间的互作 | 第26-28页 |
| 1.3 棉花与黄萎病菌间的互作概述 | 第28-33页 |
| 1.3.1 黄萎病菌及其致病机理研究进展 | 第28-30页 |
| 1.3.2 棉花对黄萎病菌的组织结构抗性 | 第30-31页 |
| 1.3.3 棉花对黄萎病菌的生理生化抗性 | 第31页 |
| 1.3.4 棉花中R基因介导的黄萎病菌抗性 | 第31-32页 |
| 1.3.5 激素信号路径在棉花抗黄萎病中的作用 | 第32-33页 |
| 1.4 棉花生产上的主要虫害及其防治 | 第33-34页 |
| 1.4.1 棉花生产上主要虫害及现状 | 第33-34页 |
| 1.4.2 棉花对植食性昆虫抗性机制的研究进展 | 第34页 |
| 1.5 植物漆酶的性质、催化机理和功能 | 第34-36页 |
| 1.6 本研究的目的与意义 | 第36-37页 |
| 第二章 介导棉花广谱抗性漆酶基因GhLac1的克隆和功能验证 | 第37-84页 |
| 2.1 实验材料 | 第37页 |
| 2.1.1 植物材料、载体和菌株 | 第37页 |
| 2.1.2 化学试剂 | 第37页 |
| 2.2 实验方法 | 第37-45页 |
| 2.2.1 GhLac1基因的分离、克隆、载体构建及转化 | 第37-38页 |
| 2.2.2 棉花DNA及RNA提取 | 第38页 |
| 2.2.3 RNA反转录与实时定量PCR分析(qRT-PCR) | 第38-39页 |
| 2.2.4 棉花原生质体细胞壁重建观察 | 第39页 |
| 2.2.5 棉花MeJA、SA及H_2O_2处理 | 第39页 |
| 2.2.6 黄萎病菌的活化和培养 | 第39-40页 |
| 2.2.7 棉花黄萎病菌接种处理 | 第40页 |
| 2.2.8 转基因材料Southern和Northern杂交检测 | 第40页 |
| 2.2.9 昆虫的选择性和非选择性取食实验 | 第40-41页 |
| 2.2.10 木质素的组织化学染色及含量测定 | 第41-42页 |
| 2.2.11 苯丙氨酸解氨酶活性测定 | 第42页 |
| 2.2.12 棉花总黄酮及棉酚等代谢物含量测定 | 第42-43页 |
| 2.2.13 棉花内源激素及黄酮类物质含量质谱测定 | 第43页 |
| 2.2.14 甲醇提取物的抗病抗虫性鉴定 | 第43-44页 |
| 2.2.15 棉花黄酮类物质组织化学染色 | 第44页 |
| 2.2.16 细胞壁多糖物质的提取 | 第44-45页 |
| 2.2.17 棉花胚性愈伤悬浮细胞系培养及处理 | 第45页 |
| 2.3 结果与分析 | 第45-78页 |
| 2.3.1 GhLac1基因克隆及序列分析 | 第45-48页 |
| 2.3.2 GhLac1基因的组织表达模式和诱导表达模式 | 第48-49页 |
| 2.3.3 GhLac1稳定转化的转基因株系的获得与检测 | 第49-50页 |
| 2.3.4 GhLac1转基因材料对黄萎病菌抗性增强 | 第50-51页 |
| 2.3.5 GhLac1转基因材料对棉铃虫抗性增强 | 第51-54页 |
| 2.3.6 GhLac1正调控棉花对棉蚜抗性 | 第54-56页 |
| 2.3.7 GhLac1促进木质素合成与积累 | 第56-59页 |
| 2.3.8 超量表达或者抑制表达GhLac1影响苯丙烷路径的代谢流分配 | 第59-62页 |
| 2.3.9 GhLac1抑制表达材料对黄萎病菌和棉铃虫抗性增强依赖于激活的茉莉酸信号路径 | 第62-65页 |
| 2.3.10 GhLac1异位表达造成的细胞壁结构变化可作为逆境触发器影响植物体内JA合成 | 第65-68页 |
| 2.3.11 GhLac1抑制表达材料对黄萎病菌和棉铃虫抗性增强依赖于黄酮等次生代谢物质的积累 | 第68-73页 |
| 2.3.12 GhLac1抑制表达材料中大量积累黄酮类物质并不影响其对蚜虫的抗性 | 第73-75页 |
| 2.3.13 GhLac1抑制表达材料中SA信号路径被抑制 | 第75-77页 |
| 2.3.14 GhLac1介导的棉花对黄萎病菌、棉铃虫和棉蚜的抗性机制总结 | 第77-78页 |
| 2.4 讨论 | 第78-84页 |
| 2.4.1 植物漆酶功能的多样性 | 第78-79页 |
| 2.4.2 次生代谢物质在植物抗病、虫方面功能的多样性 | 第79-81页 |
| 2.4.3 细胞壁损伤可以作为逆境触发器影响植物的抗性响应 | 第81-82页 |
| 2.4.4 介导棉花广谱抗性相关基因的挖掘 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-105页 |
| 附录 | 第105-116页 |
| 附录1：表达载体构建 | 第105-106页 |
| 附录2：棉花DNA提取 | 第106-107页 |
| 附录3：棉花RNA提取 | 第107-108页 |
| 附录4：PDA及Czapek's培养基配方 | 第108-109页 |
| 附录5：Southern杂交 | 第109-110页 |
| 附录6：Nouthern杂交 | 第110-111页 |
| 附录7：GhLac1 DNA序列及推导的氨基酸序列 | 第111-116页 |
| 附表 | 第116-119页 |
| 附表1：本研究中所用的qRT-PCR引物序列 | 第116-118页 |
| 附表2：不同物种来源漆酶序列号 | 第118-119页 |
| 已发表和待发表论文 | 第119-120页 |
| 已申请专利 | 第120-121页 |
| 致谢 | 第121-124页 |
