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4α糖基转移酶环化活性定向控制及其大环糊精产物的分离及应用研究

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
缩写符号说明第7-11页
第一章 绪论第11-25页
   ·概述第11-12页
   ·LR-CD 的结构特点第12-13页
   ·LR-CD 物化性质及应用第13-15页
   ·LR-CD 的制备第15-18页
   ·LR-CD 的分离第18-19页
     ·薄层色谱(TLC)第18页
     ·高效液相色谱(HPLC)第18-19页
     ·高效阴离子色谱-脉冲安培检测器(HPAEC-PAD)第19页
   ·LR-CD 合成酶类第19-22页
     ·环糊精糖基转移酶(CGTase,EC 2.4.1.19)第19页
     ·D 酶(EC 2.4.1.25)第19-20页
     ·麦芽糖基转移酶(EC 2.4.1.25)第20页
     ·脱支酶(EC 2.4.1.18)及糖原脱支酶(EC 2.4.1.25/EC3.2.1.33)第20页
     ·其它类型的4αGtase第20页
     ·环化反应机制第20-22页
   ·本课题的立题背景和意义第22-23页
   ·本论文的主要研究内容第23-25页
第二章 4αGtase 的鉴定及生物信息学分析第25-35页
   ·前言第25页
   ·材料和设备第25-26页
     ·实验材料第25页
     ·实验仪器第25-26页
   ·实验方法第26-27页
     ·质粒的转化第26页
     ·目标基因序列的测定第26页
     ·4αGtase 粗酶的提取第26页
     ·4αGtase 的分离纯化及分子量测定第26页
     ·4αGtase 的转糖基活性分析第26-27页
     ·4αGtase 的生物信息学分析方法第27页
   ·结果与讨论第27-34页
     ·目标基因核苷酸序列鉴定第27-28页
     ·4αGtase 的表达及分子量测定第28-29页
     ·4αGtase 转糖基活性分析第29页
     ·不同来源4αGtase 氨基酸序列的多序列比对第29-31页
     ·4αGtase 的基本性质研究第31-32页
     ·4αGtase 的二级结构第32-33页
     ·4αGtase 的三级结构第33-34页
     ·4αGtase 活性中心分析第34页
   ·结论第34-35页
第三章 4αGtase 活性测定新方法第35-49页
   ·前言第35页
   ·材料与设备第35-36页
     ·实验材料第35页
     ·实验仪器第35-36页
   ·实验方法第36-40页
     ·TWC 方法原理第36-38页
     ·OFS 方法原理第38-39页
     ·标准曲线的制作第39-40页
     ·方法精度的测定第40页
     ·酶活的测定第40页
   ·结果与讨论第40-47页
     ·TWC 检测波长的选择第40页
     ·OFS 测定条件的选择第40-41页
     ·标准曲线第41-42页
     ·方法的精度及回收率第42-45页
     ·酶活的测定第45-47页
   ·结论第47-49页
第四章 4αGtase 活性影响因素及定向环化控制第49-67页
   ·前言第49页
   ·材料与设备第49页
     ·实验材料第49页
     ·实验仪器第49页
   ·实验方法第49-52页
     ·4αGtase 反应动力学第49-50页
     ·环境条件对4αGtase 活性的影响第50页
     ·有机添加物对4αGtase 活性的影响第50-51页
     ·金属离子对4αGtase 的影响第51页
     ·4αGTase 的结构变化分析第51-52页
     ·LR-CD 定向制备第52页
   ·结果与讨论第52-66页
     ·4αGtase 的基本性质第52-56页
     ·有机添加物对4αGtase 活性的影响第56页
     ·金属离子对4αGtase 的影响第56-57页
     ·添加物对酶结构的影响第57-62页
     ·不同淀粉底物对LR-CD 产率的影响第62页
     ·显著影响LR-CD 产率因素的筛选第62-64页
     ·定向制备LR-CD 条件优化第64-66页
   ·结论第66-67页
第五章 大环糊精分离及鉴定第67-79页
   ·前言第67页
   ·材料与设备第67-68页
     ·实验材料第67页
     ·实验仪器第67-68页
   ·实验方法第68-69页
     ·计算方法第68页
     ·LR-CD 的毛细管电泳分离第68页
     ·LR-CD 的制备及鉴定第68-69页
   ·结果与讨论第69-77页
     ·LR-CD 标样分子量范围的测定第69-70页
     ·LR-CD 分离条件的选择第70-72页
     ·LR-CD 分离条件的优化第72-75页
     ·LR-CD 的制备及鉴定第75-77页
   ·结论第77-79页
第六章 大环糊精包合性能研究第79-88页
   ·前言第79页
   ·材料与仪器第79-80页
     ·实验材料第79页
     ·实验仪器第79-80页
   ·实验方法第80-81页
     ·LR-CD 的制备第80页
     ·制霉菌素含量的测定第80页
     ·包埋比的测定第80页
     ·包合常数的测定第80-81页
     ·包合物制备第81页
     ·包合物的红外光谱表征第81页
     ·包合物储藏稳定性第81页
   ·结果与讨论第81-87页
     ·制霉菌素紫外扫描图谱第81-82页
     ·包埋时间的确定第82-83页
     ·相溶解图第83-84页
     ·包合常数的计算第84页
     ·增溶常数和增溶倍数的测定第84-85页
     ·包合物的鉴定第85-86页
     ·LR-CD 包合物的结构模拟第86-87页
     ·包合物的储藏稳定性第87页
   ·结论第87-88页
主要结论第88-89页
展望第89-90页
论文创新点第90-91页
致谢第91-92页
参考文献第92-101页
附录:作者在攻读博士学位期间发表的论文第101页

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