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真菌毒素细胞传感器评价方法建立及联合毒性研究

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
缩略语索引第9-10页
第一章 绪论第10-20页
    1.1 真菌毒素联合污染现状第10-15页
        1.1.1 全球真菌毒素污染现状第10-11页
        1.1.2 真菌毒素联合污染现状第11-12页
        1.1.3 常见真菌毒素毒性及其限量标准第12-15页
    1.2 真菌毒素联合毒性研究进展第15-16页
    1.3 细胞传感器在体外毒性评价中的应用第16-17页
    1.4 细胞代谢组学在体外毒性评价中的应用第17-18页
    1.5 立题背景与意义第18页
    1.6 本课题主要研究内容第18-20页
第二章 构建细胞电化学传感器评价DON、ZEN和AFB1毒性第20-32页
    2.1 引言第20页
    2.2 材料与仪器第20页
        2.2.1 材料与试剂第20页
        2.2.2 设备与仪器第20页
    2.3 实验方法第20-22页
        2.3.1 细胞培养第20-21页
        2.3.2 细胞电化学传感器的构建第21页
        2.3.3 细胞传感器方法评价真菌毒素单独及联合毒性第21页
        2.3.4 真菌毒素对细胞活性、钙离子、凋亡和表面形态结构的影响第21-22页
        2.3.5 分析方法第22页
    2.4 结果与讨论第22-31页
        2.4.1 传感器的构建流程第22-23页
        2.4.2 传感器构建过程表征和实验条件优化第23-26页
        2.4.3 细胞传感器方法评价不同真菌毒素的细胞毒性第26-27页
        2.4.4 细胞传感器方法评价真菌毒素共存时的细胞毒性第27-28页
        2.4.5 细胞传感器方法与传统方法对真菌毒素毒性评价的比较第28-29页
        2.4.6 细胞传感器评价方法的机理第29-31页
    2.5 本章小结第31-32页
第三章 DON、ZEN和AFB_1联合诱导细胞毒性效应研究及作用类型判定第32-44页
    3.1 引言第32页
    3.2 材料与仪器第32页
        3.2.1 材料与试剂第32页
        3.2.2 设备与仪器第32页
    3.3 实验方法第32-35页
        3.3.1 细胞培养第32页
        3.3.2 溶液配制第32-33页
        3.3.3 三种真菌毒素单独作用IC50测定及后续实验浓度确定第33页
        3.3.4 细胞内活性氧水平的测定第33页
        3.3.5 细胞凋亡分析第33页
        3.3.6 真菌毒素对凋亡相关基因mRNA水平的影响第33-34页
        3.3.7 模型分析真菌毒素联合作用类型第34页
        3.3.8 数据统计分析第34-35页
    3.4 结果与讨论第35-43页
        3.4.1 不同真菌毒素对Caco-2细胞活性抑制率的影响第35页
        3.4.2 真菌毒素共存对Caco-2细胞活性抑制率的影响第35-36页
        3.4.3 毒素DON、ZEN和AFB1对Caco-2细胞联合作用类型判定第36-39页
        3.4.4 真菌毒素共存对Caco-2细胞活性氧含量的影响第39-40页
        3.4.5 真菌毒素共存对Caco-2细胞凋亡的影响第40-41页
        3.4.6 真菌毒素共存对Caco-2细胞内凋亡调控基因mRNA表达的影响第41-43页
    3.5 本章小结第43-44页
第四章 细胞代谢组学研究DON、ZEN和AFB1联合诱导细胞毒性机制第44-56页
    4.1 引言第44页
    4.2 材料与仪器第44页
        4.2.1 材料与试剂第44页
        4.2.2 设备与仪器第44页
    4.3 实验方法第44-46页
        4.3.1 细胞培养第44页
        4.3.2 实验分组第44-45页
        4.3.3 细胞样品淬灭与代谢物提取第45页
        4.3.4 样品衍生化第45页
        4.3.5 气相色谱-质谱联用分析代谢物第45-46页
        4.3.6 细胞胞内代谢物多元统计分析第46页
        4.3.7 代谢通路分析第46页
    4.4 结果与讨论第46-54页
        4.4.1 细胞代谢物的多元统计分析第46-47页
        4.4.2 细胞代谢物的聚类热图第47-48页
        4.4.3 显著性差异代谢物筛选第48页
        4.4.4 真菌毒素作用后Caco-2细胞整合代谢通路分析第48-51页
        4.4.5 真菌毒素作用后Caco-2细胞代谢通路富集分析第51-54页
    4.5 本章小结第54-56页
主要结论与展望第56-58页
    主要结论第56-57页
    展望第57-58页
致谢第58-59页
参考文献第59-66页
附录A:附表第66-70页
附录B:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第70页

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