摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
缩略语索引 | 第9-10页 |
第一章 绪论 | 第10-20页 |
1.1 真菌毒素联合污染现状 | 第10-15页 |
1.1.1 全球真菌毒素污染现状 | 第10-11页 |
1.1.2 真菌毒素联合污染现状 | 第11-12页 |
1.1.3 常见真菌毒素毒性及其限量标准 | 第12-15页 |
1.2 真菌毒素联合毒性研究进展 | 第15-16页 |
1.3 细胞传感器在体外毒性评价中的应用 | 第16-17页 |
1.4 细胞代谢组学在体外毒性评价中的应用 | 第17-18页 |
1.5 立题背景与意义 | 第18页 |
1.6 本课题主要研究内容 | 第18-20页 |
第二章 构建细胞电化学传感器评价DON、ZEN和AFB1毒性 | 第20-32页 |
2.1 引言 | 第20页 |
2.2 材料与仪器 | 第20页 |
2.2.1 材料与试剂 | 第20页 |
2.2.2 设备与仪器 | 第20页 |
2.3 实验方法 | 第20-22页 |
2.3.1 细胞培养 | 第20-21页 |
2.3.2 细胞电化学传感器的构建 | 第21页 |
2.3.3 细胞传感器方法评价真菌毒素单独及联合毒性 | 第21页 |
2.3.4 真菌毒素对细胞活性、钙离子、凋亡和表面形态结构的影响 | 第21-22页 |
2.3.5 分析方法 | 第22页 |
2.4 结果与讨论 | 第22-31页 |
2.4.1 传感器的构建流程 | 第22-23页 |
2.4.2 传感器构建过程表征和实验条件优化 | 第23-26页 |
2.4.3 细胞传感器方法评价不同真菌毒素的细胞毒性 | 第26-27页 |
2.4.4 细胞传感器方法评价真菌毒素共存时的细胞毒性 | 第27-28页 |
2.4.5 细胞传感器方法与传统方法对真菌毒素毒性评价的比较 | 第28-29页 |
2.4.6 细胞传感器评价方法的机理 | 第29-31页 |
2.5 本章小结 | 第31-32页 |
第三章 DON、ZEN和AFB_1联合诱导细胞毒性效应研究及作用类型判定 | 第32-44页 |
3.1 引言 | 第32页 |
3.2 材料与仪器 | 第32页 |
3.2.1 材料与试剂 | 第32页 |
3.2.2 设备与仪器 | 第32页 |
3.3 实验方法 | 第32-35页 |
3.3.1 细胞培养 | 第32页 |
3.3.2 溶液配制 | 第32-33页 |
3.3.3 三种真菌毒素单独作用IC50测定及后续实验浓度确定 | 第33页 |
3.3.4 细胞内活性氧水平的测定 | 第33页 |
3.3.5 细胞凋亡分析 | 第33页 |
3.3.6 真菌毒素对凋亡相关基因mRNA水平的影响 | 第33-34页 |
3.3.7 模型分析真菌毒素联合作用类型 | 第34页 |
3.3.8 数据统计分析 | 第34-35页 |
3.4 结果与讨论 | 第35-43页 |
3.4.1 不同真菌毒素对Caco-2细胞活性抑制率的影响 | 第35页 |
3.4.2 真菌毒素共存对Caco-2细胞活性抑制率的影响 | 第35-36页 |
3.4.3 毒素DON、ZEN和AFB1对Caco-2细胞联合作用类型判定 | 第36-39页 |
3.4.4 真菌毒素共存对Caco-2细胞活性氧含量的影响 | 第39-40页 |
3.4.5 真菌毒素共存对Caco-2细胞凋亡的影响 | 第40-41页 |
3.4.6 真菌毒素共存对Caco-2细胞内凋亡调控基因mRNA表达的影响 | 第41-43页 |
3.5 本章小结 | 第43-44页 |
第四章 细胞代谢组学研究DON、ZEN和AFB1联合诱导细胞毒性机制 | 第44-56页 |
4.1 引言 | 第44页 |
4.2 材料与仪器 | 第44页 |
4.2.1 材料与试剂 | 第44页 |
4.2.2 设备与仪器 | 第44页 |
4.3 实验方法 | 第44-46页 |
4.3.1 细胞培养 | 第44页 |
4.3.2 实验分组 | 第44-45页 |
4.3.3 细胞样品淬灭与代谢物提取 | 第45页 |
4.3.4 样品衍生化 | 第45页 |
4.3.5 气相色谱-质谱联用分析代谢物 | 第45-46页 |
4.3.6 细胞胞内代谢物多元统计分析 | 第46页 |
4.3.7 代谢通路分析 | 第46页 |
4.4 结果与讨论 | 第46-54页 |
4.4.1 细胞代谢物的多元统计分析 | 第46-47页 |
4.4.2 细胞代谢物的聚类热图 | 第47-48页 |
4.4.3 显著性差异代谢物筛选 | 第48页 |
4.4.4 真菌毒素作用后Caco-2细胞整合代谢通路分析 | 第48-51页 |
4.4.5 真菌毒素作用后Caco-2细胞代谢通路富集分析 | 第51-54页 |
4.5 本章小结 | 第54-56页 |
主要结论与展望 | 第56-58页 |
主要结论 | 第56-57页 |
展望 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
附录A:附表 | 第66-70页 |
附录B:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第70页 |