| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第7-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-22页 |
| 1.1 生物质乙醇的发展趋势 | 第11-13页 |
| 1.1.1 发展生物质燃料乙醇的重要性 | 第11-12页 |
| 1.1.2 生物质乙醇生产中多种生物质资源开发利用 | 第12页 |
| 1.1.3 生物质乙醇的发展进程 | 第12-13页 |
| 1.2 生物质乙醇生产的主要技术难题 | 第13-21页 |
| 1.2.1 木质纤维素的预处理及抑制物消除 | 第13-14页 |
| 1.2.2 生物质乙醇发酵对产乙醇菌种的要求 | 第14-20页 |
| 1.2.3 生物质乙醇与其他化学品联产提高经济效益 | 第20-21页 |
| 1.3 本课题的立题依据及研究内容 | 第21-22页 |
| 第二章 阻断有机酸代谢支路对重组大肠杆菌乙醇合成的影响 | 第22-31页 |
| 2.1 材料与方法 | 第23-26页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第23页 |
| 2.1.2 试剂与仪器 | 第23-24页 |
| 2.1.3 培养基 | 第24-25页 |
| 2.1.4 常规分子操作和基因删除 | 第25-26页 |
| 2.1.5 发酵试验 | 第26页 |
| 2.1.6 分析方法 | 第26页 |
| 2.2 结果与讨论 | 第26-30页 |
| 2.2.1 E.coilB0013PA发酵葡萄糖合成乙醇及其副产物的生成 | 第26-27页 |
| 2.2.2 删除乳酸、乙酸、甲酸合成途径对重组菌B0013-1030PA乙醇合成的影响 | 第27-28页 |
| 2.2.3 删除琥珀酸合成途径对重组菌B0013-1031PA乙醇合成的影响 | 第28-30页 |
| 2.3 本章小结 | 第30-31页 |
| 第三章 产乙醇重组大肠杆菌木糖代谢解析与代谢修复 | 第31-46页 |
| 3.1 材料与方法 | 第31-35页 |
| 3.1.1 菌株和质粒 | 第31-32页 |
| 3.1.2 试剂与仪器 | 第32-33页 |
| 3.1.3 培养基 | 第33-34页 |
| 3.1.4 分子克隆、序列测定与分析 | 第34页 |
| 3.1.5 pTH-xylB-H重组质粒的构建 | 第34-35页 |
| 3.1.6 细胞增殖与碳源利用试验 | 第35页 |
| 3.1.7 分析方法 | 第35页 |
| 3.2 结果与讨论 | 第35-44页 |
| 3.2.1 不同大肠杆菌菌株利用木糖生长的速率不同 | 第35页 |
| 3.2.2 表达E.coliK12木糖主要运输系统可显著改善E.coliB0013木糖利用 | 第35-38页 |
| 3.2.3 E.coliB0013和B2198的木糖主要转运系统基因发生无义突变 | 第38页 |
| 3.2.4 在E.coliB0013中表达木糖运输载体XylE或转录因子XylR对其生长的影响 | 第38-40页 |
| 3.2.5 xylH基因的回复突变重建了E.coliB0013利用木糖快速生长表型 | 第40-43页 |
| 3.2.6 菌株B0013-1031中xylH基因的回复突变 | 第43-44页 |
| 3.3 本章小结 | 第44-46页 |
| 第四章 两种底物选择性重组大肠杆菌构建及共发酵合成乙醇 | 第46-60页 |
| 4.1 材料与方法 | 第47-50页 |
| 4.1.1 菌株和质粒 | 第47-48页 |
| 4.1.2 试剂与仪器 | 第48-49页 |
| 4.1.3 培养基 | 第49页 |
| 4.1.4 基因删除和菌株构建 | 第49-50页 |
| 4.1.5 生长和发酵试验 | 第50页 |
| 4.1.6 分析方法 | 第50页 |
| 4.2 结果与讨论 | 第50-59页 |
| 4.2.1 不利用木糖菌株的构建 | 第51-53页 |
| 4.2.2 不利用葡萄糖突变株的构建 | 第53-57页 |
| 4.2.3 两种底物选择性重组菌的共发酵混合糖合成乙醇 | 第57-59页 |
| 4.3 本章小结 | 第59-60页 |
| 第五章 葡萄糖代谢可控大肠杆菌转化生物质水解糖为乙醇 | 第60-74页 |
| 5.1 材料与方法 | 第61-65页 |
| 5.1.1 菌株和质粒 | 第61页 |
| 5.1.2 试剂与仪器 | 第61-62页 |
| 5.1.3 培养基 | 第62页 |
| 5.1.4 基因删除与菌株构建 | 第62-63页 |
| 5.1.5 发酵试验 | 第63-64页 |
| 5.1.6 实时定量PCR分析ptsG相对表达水平 | 第64页 |
| 5.1.7 细胞提取物的制备及酶活性测定 | 第64-65页 |
| 5.1.8 其它分析方法 | 第65页 |
| 5.2 结果与讨论 | 第65-72页 |
| 5.2.1 葡萄糖代谢可控E.coliB0013-2021H的构建 | 第65-67页 |
| 5.2.2 E.coliB0013-2021H的生长特性及PEP-葡萄糖磷酸转移酶的表达水平 | 第67-69页 |
| 5.2.3 E.coliB0013-2021HPA的构建与乙醇摇瓶发酵 | 第69-70页 |
| 5.2.4 E.coliB0013-2021HPA代谢混合糖合成乙醇 | 第70-72页 |
| 5.3 本章小结 | 第72-74页 |
| 第六章 大肠杆菌木糖利用缺陷菌株代谢混合糖合成乙醇及回收木糖 | 第74-83页 |
| 6.1 材料与方法 | 第75-77页 |
| 6.1.1 菌株和质粒 | 第75页 |
| 6.1.2 试剂与仪器 | 第75页 |
| 6.1.3 培养基 | 第75页 |
| 6.1.4 菌株构建 | 第75-76页 |
| 6.1.5 发酵试验 | 第76页 |
| 6.1.6 分析方法 | 第76-77页 |
| 6.2 结果与讨论 | 第77-82页 |
| 6.2.1 不利用木糖的产乙醇菌株E.coliB0013-2012PA的构建 | 第77-79页 |
| 6.2.2 E.coliB0013-2012PA利用葡萄糖和/或木糖合成乙醇 | 第79页 |
| 6.2.3 E.coliB0013-2012PA利用混合糖发酵乙醇并回收木糖 | 第79-82页 |
| 6.3 本章小结 | 第82-83页 |
| 主要结论 | 第83-84页 |
| 主要创新点 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-93页 |
| 附录：作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第93页 |
