摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 引言 | 第10-26页 |
1.1 酪氨酸蛋白激酶的研究进展 | 第10-15页 |
1.1.1 受体型酪氨酸激酶的研究概况 | 第11-14页 |
1.1.2 非受体型酪氨酸激酶的研究概况 | 第14-15页 |
1.2 NOK/STYK1 基因的发现及功能研究 | 第15-18页 |
1.2.1 NOK/STYK1 活性的调节 | 第15-16页 |
1.2.2 NOK/STYK1 的功能研究 | 第16-18页 |
1.3 酪氨酸激酶与肿瘤的治疗 | 第18-25页 |
1.3.1 PTKs 与肿瘤的发生 | 第18-20页 |
1.3.2 酪氨酸激酶抑制剂与抗肿瘤治疗 | 第20-22页 |
1.3.3 酪氨酸激酶单克隆抗体在抗肿瘤治疗中的应用进展 | 第22-25页 |
1.4 选题的意义 | 第25-26页 |
第二章 实验材料及方法 | 第26-37页 |
2.1 实验材料 | 第26-28页 |
2.2 实验方法 | 第28-37页 |
2.2.1 NOK/STYK1 基因的克隆与载体构建 | 第28页 |
2.2.2 大肠杆菌感受态的制备、转化与质粒小提 | 第28-29页 |
2.2.3 碱裂解法大量提取质粒 | 第29-30页 |
2.2.4 细胞培养 | 第30页 |
2.2.5 蛋白表达及纯化 | 第30-31页 |
2.2.6 间接 ELISA 法 | 第31页 |
2.2.7 免疫小鼠及选择融合小鼠 | 第31-32页 |
2.2.8 细胞融合与筛选 | 第32页 |
2.2.9 抗体类型的鉴定 | 第32页 |
2.2.10 腹水制备 | 第32-33页 |
2.2.11 单克隆抗体的纯化及特性鉴定 | 第33页 |
2.2.12 Western Blotting(蛋白免疫印迹) | 第33-34页 |
2.2.13 免疫荧光标记(IF) | 第34页 |
2.2.14 免疫共沉淀(IP) | 第34-35页 |
2.2.15 组织切片及免疫组化 | 第35-37页 |
第三章 实验结果 | 第37-51页 |
3.1 NOK/STYK1 基因的克隆及同源性分析 | 第37-39页 |
3.2 设计并筛选制备 NOK/STYK1 单克隆抗体所需抗原 | 第39-40页 |
3.3 蛋白纯化 | 第40-41页 |
3.4 动物免疫 | 第41页 |
3.5 杂交瘤细胞株的筛选 | 第41-45页 |
3.6 腹水制备及单克隆抗体纯化 | 第45-46页 |
3.7 单克隆抗体特性鉴定 | 第46页 |
3.8 Western blotting 检测单克隆抗体 NOK/STYK1(7G9) | 第46-47页 |
3.9 Western blotting 鉴定抗体 7G9 能用于免疫共沉淀实验 | 第47-48页 |
3.10 单克隆抗体检测 NOK/STYK1 在不同肿瘤细胞系中的表达及定位 | 第48-49页 |
3.11 单克隆抗体检测 NOK/STYK1 在不同组织中的表达及定位 | 第49-51页 |
第四章 结论与展望 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-64页 |
附录 1. 名词缩写及全称 | 第64-65页 |
附录 2. 实验所用仪器及生产厂家 | 第65-66页 |
附录 3. 化学药品及生产厂家 | 第66-68页 |
附录 4. NOK/STYK1 的 cDNA | 第68-69页 |
附录 5. NOK/STYK1 的蛋白质氨基酸序列 | 第69-70页 |
研究生期间待发表的论文 | 第70-71页 |
致谢 | 第71页 |