| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 中英文缩略词 | 第11-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-19页 |
| 1.1 红细胞发育 | 第12-13页 |
| 1.2 血液疾病 | 第13-14页 |
| 1.3 p27~(kip1)基因 | 第14-17页 |
| 1.4 红系发育中p27~(kip1)基因的相关研究 | 第17-18页 |
| 1.5 本课题的研究内容 | 第18-19页 |
| 第二章 p27~(kip1)基因及其同家族成员的生物信息学分析 | 第19-28页 |
| 2.1 生物信息分析在线网站和软件 | 第19-20页 |
| 2.2 Cip/Kip家族多方面生物信息分析 | 第20-26页 |
| 2.2.1 Cip/Kip家族成员在不同物种中的氨基酸序列 | 第20页 |
| 2.2.2 Cip/Kip家族成员基因进化上的分析 | 第20-22页 |
| 2.2.3 Cip/Kip家族成员基因在不同物种中氨基酸序列的比对分析 | 第22-24页 |
| 2.2.4 Cip/Kip家族成员基因在红系相关细胞系中的表达情况分析 | 第24-25页 |
| 2.2.5 Cip/Kip家族成员基因和蛋白结构的分析 | 第25-26页 |
| 2.3 Cip/Kip家族成员生物信息分析结果讨论 | 第26-28页 |
| 第三章 p27~(kip1)基因敲低对K562和HEL细胞系相关表型的影响 | 第28-56页 |
| 3.1 材料试剂与仪器 | 第28-32页 |
| 3.1.1 材料试剂 | 第28-31页 |
| 3.1.1.1 材料 | 第28页 |
| 3.1.1.2 试剂 | 第28-29页 |
| 3.1.1.3 相关试剂配制 | 第29-31页 |
| 3.1.2 仪器 | 第31-32页 |
| 3.2 实验方法 | 第32-44页 |
| 3.2.1 p27~(kip1)基因shRNA表达载体的构建 | 第32-41页 |
| 3.2.2 细胞增殖检测 | 第41页 |
| 3.2.3 细胞分化的联苯胺检测 | 第41-42页 |
| 3.2.4 细胞凋亡检测 | 第42-43页 |
| 3.2.5 细胞周期检测 | 第43-44页 |
| 3.3 实验结果 | 第44-54页 |
| 3.3.1 p27基因shRNA表达载体的构建 | 第44-46页 |
| 3.3.1.1 p27基因片段与PH1载体的连接 | 第44-45页 |
| 3.3.1.2 p27-PH1基因片段与PRRL载体的连接 | 第45-46页 |
| 3.3.2 p27基因在K562和HEL细胞中的敲低效率 | 第46-47页 |
| 3.3.3 p27基因敲低促进K562和HEL细胞的增殖 | 第47-48页 |
| 3.3.4 p27基因敲低抑制K562和HEL细胞的分化 | 第48-51页 |
| 3.3.5 p27基因敲低不影响K562和HEL细胞的凋亡 | 第51-52页 |
| 3.3.6 p27基因敲低促进K562和HEL细胞周期的进程 | 第52-54页 |
| 3.4 实验小结 | 第54-56页 |
| 第四章 p27~(kip1)基因敲低对CD34~+细胞相关表型的影响 | 第56-71页 |
| 4.1 材料试剂与仪器 | 第56-59页 |
| 4.1.1 材料试剂 | 第56-58页 |
| 4.1.1.1 材料 | 第56页 |
| 4.1.1.2 试剂 | 第56-57页 |
| 4.1.1.3 相关试剂配制 | 第57-58页 |
| 4.1.2 仪器 | 第58-59页 |
| 4.2 实验方法 | 第59-63页 |
| 4.2.1 脐带血中分选CD34~+细胞的方法 | 第59-60页 |
| 4.2.2 p27基因敲低后CD34~+细胞增殖的检测 | 第60页 |
| 4.2.3 p27基因敲低后红系早期细胞分化进程的流式检测 | 第60-61页 |
| 4.2.4 p27基因敲低后红系终末细胞分化进程的流式检测 | 第61-62页 |
| 4.2.5 p27基因敲低后红细胞脱核的流式检测 | 第62页 |
| 4.2.6 p27基因敲低后红细胞核畸形的MGG染色 | 第62-63页 |
| 4.3 实验结果 | 第63-69页 |
| 4.3.1 p27基因在CD34~+细胞中的敲低效率明显 | 第63页 |
| 4.3.2 p27基因敲低对CD34~+细胞的增殖有轻微促进作用 | 第63-64页 |
| 4.3.3 p27基因敲低对红系早期细胞分化进程没有明显影响 | 第64-65页 |
| 4.3.4 p27基因敲低对红系终末细胞分化进程有明显的抑制作用 | 第65-66页 |
| 4.3.5 p27基因敲低对红系终末细胞的脱核有明显的抑制作用 | 第66-67页 |
| 4.3.6 p27基因敲低会使红系终末分化细胞中产生核畸形现象 | 第67-69页 |
| 4.4 实验小结 | 第69-71页 |
| 第五章 全文讨论 | 第71-74页 |
| 参考文献 | 第74-78页 |
| 致谢 | 第78-80页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第80页 |
