摘要 | 第12-14页 |
Abstract | 第14-16页 |
第一章 绪论 | 第17-25页 |
1.1 概述 | 第17-18页 |
1.2 K.vulgare生长受到自身氧化胁迫影响 | 第18-21页 |
1.2.1 K.vulgare生长受到氧化胁迫 | 第19-21页 |
1.2.2 电子传递受阻导致K.vulgare长势弱 | 第21页 |
1.3 伴生菌解除产酸菌氧化胁迫 | 第21-22页 |
1.3.1 诱导增加K.vulgare抗氧化相关基因表达 | 第21-22页 |
1.3.2 释放代谢物供K.vulgare利用 | 第22页 |
1.4 本论文的研究目的意义及主要内容 | 第22-24页 |
1.4.1 研究目的及意义 | 第22-23页 |
1.4.2 主要研究内容 | 第23-24页 |
1.5 技术路线 | 第24-25页 |
第二章 R.mucilaginosaA8的筛选及发酵菌株生理特性分析 | 第25-43页 |
2.1 前言 | 第25页 |
2.2 试验材料 | 第25-27页 |
2.2.1 菌种 | 第25-26页 |
2.2.2 仪器设备 | 第26页 |
2.2.3 培养基 | 第26-27页 |
2.2.4 主要试剂 | 第27页 |
2.2.5 试剂配制 | 第27页 |
2.3 试验方法 | 第27-31页 |
2.3.1 K.vulgare培养 | 第27-28页 |
2.3.2 R.mucilaginosaA8培养 | 第28页 |
2.3.3 混菌发酵培养 | 第28页 |
2.3.4 混菌种保存 | 第28页 |
2.3.5 2-KLG含量测定 | 第28-29页 |
2.3.6 目标伴生菌的富集培养 | 第29页 |
2.3.7 目标伴生菌初步鉴定 | 第29页 |
2.3.8 目标伴生菌分子鉴定 | 第29-30页 |
2.3.9 生长曲线的绘制 | 第30页 |
2.3.10 发酵体系产酸曲线的绘制 | 第30页 |
2.3.11 发酵培养液中ORP和pH值变化曲线的测定 | 第30-31页 |
2.3.12 混菌发酵体系中两菌菌数的测定 | 第31页 |
2.4 结果与分析 | 第31-41页 |
2.4.1 菌株的形态特征 | 第31-32页 |
2.4.2 菌株的分子鉴定 | 第32-35页 |
2.4.3 混菌搭配比例 | 第35-36页 |
2.4.4 R.mucilaginosaA8的生长特性 | 第36页 |
2.4.5 K.vulgare的生长特性 | 第36-37页 |
2.4.6 发酵体系产2-KLG规律 | 第37页 |
2.4.7 发酵体系ORP变化规律 | 第37-38页 |
2.4.8 发酵体系pH值变化规律 | 第38页 |
2.4.9 发酵体系中ORP变化与产酸关系 | 第38-39页 |
2.4.10 K.vulgare单菌体系中菌浓度与ORP和产酸关系 | 第39-40页 |
2.4.11 混菌体系中R.m和K.v的菌数与ORP关系 | 第40页 |
2.4.12 混菌体系中R.m和K.v的菌数与产酸关系 | 第40-41页 |
2.5 讨论 | 第41-42页 |
2.6 本章小结 | 第42-43页 |
第三章 R.mucilaginosaA8伴生的Vc混菌发酵条件优化 | 第43-58页 |
3.1 前言 | 第43页 |
3.2 试验材料 | 第43-44页 |
3.2.1 菌种 | 第43页 |
3.2.2 仪器设备 | 第43页 |
3.2.3 培养基及培养条件 | 第43页 |
3.2.4 主要试剂 | 第43页 |
3.2.5 试剂配制 | 第43-44页 |
3.3 试验方法 | 第44-45页 |
3.3.1 培养基营养成分响应面试验设计 | 第44-45页 |
3.3.2 响应面模型验证试验 | 第45页 |
3.3.3 培养条件单因素试验设计 | 第45页 |
3.4 结果与分析 | 第45-56页 |
3.4.1 发酵条件优化前2-KLG的产量 | 第45-46页 |
3.4.2 营养成分单独添加对2-KLG产量的影响 | 第46-49页 |
3.4.3 响应面试验结果 | 第49-51页 |
3.4.4 回归方程方差分析 | 第51-53页 |
3.4.5 响应面分析与优化 | 第53-54页 |
3.4.6 响应面试验结果验证 | 第54页 |
3.4.7 发酵培养基灭菌前pH值对2-KLG产量的影响 | 第54-55页 |
3.4.8 发酵装液量对2-KLG产量的影响 | 第55页 |
3.4.9 发酵温度对2-KLG产量的影响 | 第55-56页 |
3.4.10 发酵条件优化后2-KLG的产量 | 第56页 |
3.5 讨论 | 第56-57页 |
3.6 本章小结 | 第57-58页 |
第四章 Vc发酵体系抗氧化能力研究 | 第58-67页 |
4.1 前言 | 第58页 |
4.2 试验材料 | 第58-59页 |
4.2.1 菌种 | 第58页 |
4.2.2 仪器设备 | 第58页 |
4.2.3 培养基及培养条件 | 第58页 |
4.2.4 试剂盒 | 第58-59页 |
4.3 试验方法 | 第59-60页 |
4.3.1 K.vulgare单菌体系胞内液和胞外液的制备 | 第59页 |
4.3.2 混菌体系中K.vulgare胞内液和胞外液的制备 | 第59页 |
4.3.3 发酵体系总抗氧化能力和活性氧的测定 | 第59-60页 |
4.3.4 发酵体系活性氧自由基的测定 | 第60页 |
4.3.5 发酵体系抗氧化酶活力测定 | 第60页 |
4.4 结果与分析 | 第60-66页 |
4.4.1 发酵体系总抗氧化能力和活性氧水平 | 第60-61页 |
4.4.2 发酵体系活性氧水平 | 第61-64页 |
4.4.3 发酵体系抗氧化酶活力 | 第64-66页 |
4.5 讨论 | 第66页 |
4.6 本章小结 | 第66-67页 |
第五章 R.mucilaginosaA8解除产酸菌氧化胁迫的研究 | 第67-82页 |
5.1 前言 | 第67页 |
5.2 试验材料 | 第67-68页 |
5.2.1 菌种 | 第67页 |
5.2.2 仪器设备 | 第67页 |
5.2.3 培养基 | 第67页 |
5.2.4 主要试剂 | 第67-68页 |
5.2.5 试剂配制 | 第68页 |
5.3 试验方法 | 第68-72页 |
5.3.1 蛋白质标准曲线和DCIP标准曲线的制作 | 第68-69页 |
5.3.2 发酵体系ATP含量的测定 | 第69页 |
5.3.3 SDH/SNDH酶活性测定 | 第69-70页 |
5.3.4 Trizol法提取总RNA | 第70页 |
5.3.5 总RNA反转录成cDNA | 第70-71页 |
5.3.6 实时荧光定量PCR | 第71-72页 |
5.4 结果与分析 | 第72-79页 |
5.4.1 蛋白质标准曲线和DCIP标准曲线 | 第72页 |
5.4.2 产酸菌K.vulgare胞内ATP浓度和ATP酶基因表达 | 第72-73页 |
5.4.3 电子传递相关基因表达 | 第73-76页 |
5.4.4 抗氧化酶基因表达 | 第76-77页 |
5.4.5 产2-KLG酶的活性和基因表达 | 第77-79页 |
5.5 讨论 | 第79-80页 |
5.6 本章小结 | 第80-82页 |
第六章 结论 | 第82-84页 |
参考文献 | 第84-90页 |
致谢 | 第90-91页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第91-92页 |