| 摘要 | 第8-12页 |
| Abstract | 第12-16页 |
| 第一章 绪论 | 第17-57页 |
| 1.1 基于生物质谱的多肽组学研究进展 | 第17-25页 |
| 1.1.1 多肽组学概述 | 第17-19页 |
| 1.1.1.1 多肽组学的定义及重要意义 | 第17-18页 |
| 1.1.1.2 多肽组学与其它组学 | 第18-19页 |
| 1.1.2 多肽组提取的研究策略和技术路线 | 第19-24页 |
| 1.1.2.1 超滤离心法 | 第19-20页 |
| 1.1.2.2 有机溶剂沉淀法 | 第20页 |
| 1.1.2.3 固相萃取 | 第20-22页 |
| 1.1.2.4 限进介质的在线提取 | 第22-23页 |
| 1.1.2.5 其他技术 | 第23-24页 |
| 1.1.3 多肽组学研究展望 | 第24-25页 |
| 1.2 糖基化蛋白质组学研究概述 | 第25-33页 |
| 1.2.1 蛋白质糖基化翻译后修饰概述 | 第25-27页 |
| 1.2.1.1 糖基化的重要性 | 第25-26页 |
| 1.2.1.2 糖基化的结构与类型 | 第26-27页 |
| 1.2.2 糖基化蛋白质组学研究分离与富集技术策略 | 第27-33页 |
| 1.2.2.1 凝集素亲和法 | 第27-28页 |
| 1.2.2.2 肼化学法 | 第28-30页 |
| 1.2.2.3 硼酸化学法 | 第30-31页 |
| 1.2.2.4 亲水作用法 | 第31-32页 |
| 1.2.2.5 其他方法 | 第32页 |
| 1.2.2.6 分离与富集技术比较 | 第32-33页 |
| 1.2.3 糖基化蛋白质组研究分离与富集新技术总结 | 第33页 |
| 1.3 纳米材料在糖蛋白质组学中的应用 | 第33-36页 |
| 1.3.1 纳米材料概述 | 第33-34页 |
| 1.3.2 纳米材料在糖蛋白质组富集研究的应用 | 第34-36页 |
| 1.4 本论文选题目的、意义和创新点 | 第36-38页 |
| 参考文献 | 第38-57页 |
| 第二章 基于硼酸功能化介孔纳米材料富集糖肽的研究 | 第57-83页 |
| 第一节 硼酸功能化介孔纳米材料的水相制备及其对糖肽的富集研究 | 第57-69页 |
| 2.1.1 引言 | 第57-58页 |
| 2.1.2 实验部分 | 第58-59页 |
| 2.1.2.1 试剂与仪器 | 第58页 |
| 2.1.2.2 MCM-41-GLYMO-APB的合成 | 第58页 |
| 2.1.2.3 标准非糖蛋白Myo和标准糖蛋白HRP的酶解 | 第58-59页 |
| 2.1.2.4 糖基化多肽的富集 | 第59页 |
| 2.1.2.5 MALDI质谱检测 | 第59页 |
| 2.1.3 结果与讨论 | 第59-65页 |
| 2.1.3.1 MCM-41-GLYMO-APB的合成和表征 | 第59-60页 |
| 2.1.3.2 MCM-41-GLYMO-APB富集糖肽的条件优化 | 第60-65页 |
| 2.1.3.2.1 MCM-41-GLYMO-APB对糖肽的富集 | 第60-61页 |
| 2.1.3.2.2 孵育时间的选择 | 第61-62页 |
| 2.1.3.2.3 孵育缓冲液的选择 | 第62-63页 |
| 2.1.3.2.4 清洗方式的选择 | 第63-64页 |
| 2.1.3.2.5 洗脱溶液的选择 | 第64-65页 |
| 2.1.4 小结 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-69页 |
| 第二节 硼酸功能化介孔纳米材料的有机相制备及其对糖肽的富集研究 | 第69-83页 |
| 2.2.1 引言 | 第69页 |
| 2.2.2 实验部分 | 第69-73页 |
| 2.2.2.1 材料和试剂 | 第69-70页 |
| 2.2.2.2 实验仪器 | 第70页 |
| 2.2.2.3 MCM-41-APTES-CPB的制备 | 第70-71页 |
| 2.2.2.4 材料表征 | 第71-72页 |
| 2.2.2.5 标准蛋白质的溶液酶解 | 第72页 |
| 2.2.2.6 MCM-41-APTES-CPB对标准蛋白酶解肽段中糖肽特异性富集 | 第72页 |
| 2.2.2.7 MALDI质谱检测 | 第72-73页 |
| 2.2.3 结果与讨论 | 第73-80页 |
| 2.2.3.1 MCM-41-APTES-CPB的合成 | 第73页 |
| 2.2.3.2 MCM-41-APTES-CPB的表征 | 第73-75页 |
| 2.2.3.3 MCM-41-APTES-CPB对糖肽富集的性能评价 | 第75-80页 |
| 2.2.3.3.1 硼酸功能化前后不同材料对糖肽富集的效果对比 | 第75-77页 |
| 2.2.3.3.2 富集糖基化多肽的选择性分析 | 第77页 |
| 2.2.3.3.3 富集糖基化多肽的检测限分析 | 第77页 |
| 2.2.3.3.4 富集糖基化多肽的富集容量分析 | 第77-79页 |
| 2.2.3.3.5 富集糖基化多肽的回收率分析 | 第79-80页 |
| 2.2.4 小结 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-83页 |
| 第三章 硼酸功能化介孔纳米材料用于高特异性揭示大鼠血清糖肽组 | 第83-112页 |
| 3.1 引言 | 第83-84页 |
| 3.2 实验部分 | 第84-91页 |
| 3.2.1 材料与试剂 | 第84-85页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第85页 |
| 3.2.3 不同方法提取标准蛋白和标准蛋白酶解肽段混合物中多肽 | 第85-86页 |
| 3.2.4 MCM-41对标准蛋白和标准蛋白酶解肽段混合物中多肽连续富集 | 第86页 |
| 3.2.5 MCM-41对胎牛血清多肽组的初步研究 | 第86页 |
| 3.2.6 十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第86-88页 |
| 3.2.7 大鼠血清样品的制备 | 第88页 |
| 3.2.8 血清中掺杂标准糖基化肽段的富集 | 第88-89页 |
| 3.2.9 MALDI质谱检测 | 第89页 |
| 3.2.10 大鼠血清中内源性糖基化肽段的富集 | 第89-90页 |
| 3.2.11 一维纳升级液相色谱-串联质谱分析 | 第90页 |
| 3.2.12 数据库搜索和质谱数据分析 | 第90-91页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第91-100页 |
| 3.3.1 标准蛋白和标准蛋白酶解肽段混合物中多肽富集方法的比较 | 第91-92页 |
| 3.3.2 MCM-1对标准蛋白和标准蛋白酶解肽段混合物中多肽的富集 | 第92-93页 |
| 3.3.3 MCM-41对胎牛血清多肽组的初步研究 | 第93-94页 |
| 3.3.4 MCM-41-APTES-CPB对蛋白质吸附的尺寸排阻效应 | 第94-96页 |
| 3.3.5 MCM-41-APTES-CPB对血清中掺杂标准糖基化肽段的富集 | 第96-97页 |
| 3.3.6 MCM-41-APTES-CPB高特异性揭示大鼠血清糖肽组 | 第97-100页 |
| 3.4 小结 | 第100-101页 |
| 附录 | 第101-107页 |
| 参考文献 | 第107-112页 |
| 第四章 硼酸功能化介孔纳米材料用于高特异性揭示蝰蛇蛇毒糖肽组 | 第112-142页 |
| 4.1 引言 | 第112-113页 |
| 4.2 实验部分 | 第113-116页 |
| 4.2.1 试剂与材料 | 第113页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第113-114页 |
| 4.2.3 多种样品前处理方法对蛇毒中糖肽的富集 | 第114-115页 |
| 4.2.3.1 乙腈沉淀结合PNGase F酶切 | 第114页 |
| 4.2.3.2 超滤结合PNGase F酶切 | 第114页 |
| 4.2.3.3 乙腈沉淀结合肼树脂富集 | 第114-115页 |
| 4.2.3.4 超滤结合肼树脂富集 | 第115页 |
| 4.2.3.5 硼酸功能化介孔纳米材料富集 | 第115页 |
| 4.2.4 一维纳升级液相色谱-串联质谱分析 | 第115-116页 |
| 4.2.5 数据库搜索和质谱数据分析 | 第116页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第116-123页 |
| 4.3.1 不同样品处理方法的结果比较分析 | 第116-118页 |
| 4.3.2 硼酸功能化介孔纳米材料高特异性揭示蛇毒糖肽组 | 第118-119页 |
| 4.3.3 鉴定糖肽及对应蛋白的分析 | 第119-123页 |
| 4.4 小结 | 第123-124页 |
| 附录 | 第124-139页 |
| 参考文献 | 第139-142页 |
| 第五章 肼功能化聚合物磁性纳米复合材料的制备及其对糖肽的富集研究 | 第142-172页 |
| 5.1 引言 | 第142-144页 |
| 5.2 实验部分 | 第144-151页 |
| 5.2.1 试剂与材料 | 第144-145页 |
| 5.2.2 实验仪器 | 第145-146页 |
| 5.2.3 肼功能化聚合物磁性纳米复合材料的制备 | 第146-148页 |
| 5.2.3.1 羧基聚合物磁性纳米复合材料的制备 | 第146页 |
| 5.2.3.2 肼功能化聚合物磁性纳米复合材料的制备 | 第146-148页 |
| 5.2.4 肼功能化聚合物磁性纳米复合材料中肼基团密度的测定 | 第148页 |
| 5.2.5 肼功能化聚合物磁性纳米复合材料的表征 | 第148页 |
| 5.2.6 肠癌病人血清溶液酶解 | 第148-149页 |
| 5.2.7 肼功能化聚合物磁性纳米复合材料和肼树脂对糖肽的富集 | 第149页 |
| 5.2.8 一维纳升级液相色谱-串联质谱分析 | 第149-150页 |
| 5.2.9 数据库搜索和质谱数据分析 | 第150-151页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第151-157页 |
| 5.3.1 肼功能化聚合物磁性纳米复合材料的制备和表征 | 第151-152页 |
| 5.3.2 肼功能化聚合物磁性纳米复合材料对糖肽的富集效果 | 第152-155页 |
| 5.3.3 Fe_3O_4@PMAH与肼树脂比较对糖肽的富集效果 | 第155-156页 |
| 5.3.4 Fe_3O_4@PMAH对糖肽富集条件的优化 | 第156-157页 |
| 5.3.5 Fe_3O_4@PMAH对肠癌病人血清酶解物中糖肽富集 | 第157页 |
| 5.4 小结 | 第157-159页 |
| 附录 | 第159-169页 |
| 参考文献 | 第169-172页 |
| 博士学位攻读期间学术发表情况 | 第172-173页 |
| 致谢 | 第173-175页 |
