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组蛋白乙酰转移酶Enok在果蝇雌性生殖干细胞命运维持与翅脉形成中的功能研究

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-9页
第一章 绪论第14-43页
    1.1 黑腹果蝇:优秀的模式生物第14-17页
    1.2 干细胞与微环境第17-20页
        1.2.1 干细胞的定义与基本属性第18页
        1.2.2 干细胞的微环境第18-20页
            1.2.2.1 干细胞微环境的定义第18-19页
            1.2.2.2 干细胞微环境的作用机制第19-20页
    1.3 果蝇雌性生殖干细胞与其微环境第20-23页
        1.3.1 果蝇雌性生殖干细胞与其微环境简介第20-22页
        1.3.2 果蝇雌性生殖干细胞的辨识第22页
        1.3.3 果蝇雌性生殖干细胞的形成第22-23页
    1.4 果蝇雌性生殖干细胞的维持与分化调控第23-38页
        1.4.1 粘着连接(Adherens Junction)第23-24页
        1.4.2 BMP-Bam 调控途径第24-26页
        1.4.3 BMP 信号的调控第26-29页
            1.4.3.1 BMP 配体的表达调控第26页
            1.4.3.2 BMP 配体的扩散调控第26-27页
            1.4.3.3 BMP 信号的接收与转导调控第27-28页
            1.4.3.4 其他 BMP 信号调节因子第28-29页
        1.4.4 Nos/Pum 调控途径第29-30页
        1.4.5 miRNA 调控途径第30-31页
        1.4.6 帽细胞的维持第31-32页
        1.4.7 表观遗传学调控第32-38页
            1.4.7.1 干细胞的表观调控第32-33页
            1.4.7.2 果蝇雌性生殖干细胞维持与分化的表观调控第33-38页
    1.5 组蛋白乙酰化与乙酰转移酶第38-42页
        1.5.1 组蛋白乙酰化第38-40页
        1.5.2 果蝇组蛋白乙酰转移酶 Enok第40-42页
    1.6 本论文的研究目的、内容及意义第42-43页
第二章 材料与方法第43-63页
    2.1 实验材料第43-50页
        2.1.1 果蝇品系第43-45页
        2.1.2 主要试剂第45-50页
            2.1.2.1 果蝇食物(玉米粉-红糖-酵母培养基)第45-46页
            2.1.2.2 常用溶液配方第46-47页
            2.1.2.3 抗体及荧光染料第47-50页
    2.2 实验方法第50-63页
        2.2.1 果蝇遗传操作第50-57页
            2.2.1.1 Gal4/UAS 二元表达系统第50-53页
            2.2.1.2 FLP/FRT 嵌合突变分析技术第53-55页
            2.2.1.3 RNAi第55-57页
        2.2.2 果蝇显微解剖第57页
        2.2.3 免疫荧光染色第57-58页
        2.2.4 制片与观察成像第58-59页
        2.2.5 计数方法第59-60页
        2.2.6 统计方法第60页
        2.2.7 UAS-enok 转基因果蝇构建第60页
        2.2.8 定量与半定量 RT-PCR第60-63页
第三章 实验结果第63-107页
    果蝇生殖干细胞命运维持部分第63-94页
        3.1 Enok 在果蝇雌性生殖干细胞内部调控其命运维持第63-80页
            3.1.1 enok 在果蝇雌性生殖细胞中丧失功能导致干细胞自我更新缺陷第63-68页
            3.1.2 Enok 通过 BMP-Bam 非依赖途径调控生殖干细胞的命运维持第68-71页
            3.1.3 DE-Cad 介导的生殖干细胞与微环境细胞间的细胞粘着不依赖于干细胞中 Enok 的功能第71-72页
            3.1.4 Enok 调节生殖干细胞的维持不依赖于 Nos/Pum 途径第72-73页
            3.1.5 Enok 通过抑制 Bruno 的表达调控生殖干细胞的命运维持第73-77页
            3.1.6 Enok 在生殖细胞内部不参与其逐步分化的调节第77-78页
            3.1.7 Enok 在雌性生殖细胞中调节组蛋白 H3K14 的乙酰化第78-80页
            3.1.8 小结第80页
        3.2 Enok 在干细胞微环境中调控果蝇雌性生殖干细胞的命运维持第80-94页
            3.2.1 下调果蝇雌性生殖干细胞微环境中 enok 的表达导致干细胞的维持缺陷第80-83页
            3.2.2 Enok 在生殖干细胞微环境中调节 BMP 信号的输出第83-85页
            3.2.3 帽细胞中 enok 突变不影响 DE-Cad 介导的细胞粘着第85-86页
            3.2.4 Enok 在帽细胞中调控其数量的维持第86-89页
            3.2.5 Enok 通过调节 Notch 信号活性来调控帽细胞的数量第89-93页
            3.2.6 小结第93-94页
    果蝇翅脉形成部分第94-107页
        3.3 Enok 调节果蝇翅脉的形成第94-104页
            3.3.1 背景介绍第94-96页
            3.3.2 Enok 在翅膀发育中丧失功能导致额外翅脉的生成第96-97页
            3.3.3 Enok 可能不调节已知参与翅脉形成的信号通路第97-101页
            3.3.4 Enok 通过调节 Dll 的表达控制翅脉的形成第101-102页
            3.3.5 Enok 在果蝇翅成虫盘中调节组蛋白 H3K14 的乙酰化第102-103页
            3.3.6 小结第103-104页
        3.4 结论第104-107页
第四章 讨论第107-114页
    4.1 Bruno 在 Enok 介导的生殖干细胞命运调控中的作用第107-108页
    4.2 Enok 在雌性生殖细胞中调节组蛋白乙酰化第108-109页
    4.3 Enok 在果蝇生殖干细胞微环境中调节 Notch 信号通路第109-110页
    4.4 Enok 与干细胞的营养和衰老第110-111页
    4.5 Enok 在翅成虫盘中调节 Dll 的表达第111-112页
    4.6 总结与展望第112-114页
参考文献第114-134页
附录一 筛选 JNK 信号通路的调节因子与效应因子第134-152页
    S1.1 研究背景第134-136页
    S1.2 筛选实验设计第136-138页
    S1.3 筛选结果第138页
    S1.4 Rno第138-146页
        S1.4.1 胸部闭合第139-140页
        S1.4.2 雄性生殖器旋转第140-141页
        S1.4.3 卵背部附件延伸第141-142页
        S1.4.4 与 JNK 信号通路的关系第142-146页
    S1.5 总结与讨论第146-147页
    S1.6 参考文献第147-152页
附录二 主要缩写对照表第152-153页
附录三 补充表格第153-158页
攻读博士学位期间已发表或录用的论文第158-159页
致谢第159-160页

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