| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 目录 | 第10-14页 |
| 英文缩写-中文对照表 | 第14-16页 |
| 综述 | 第16-36页 |
| 1. 猪繁殖与呼吸综合征 | 第16-25页 |
| 1.1 病原学 | 第16-17页 |
| 1.2 流行病学 | 第17-18页 |
| 1.3 致病机理 | 第18-19页 |
| 1.4 免疫学特性 | 第19-21页 |
| 1.4.1 体液免疫 | 第19-20页 |
| 1.4.2 细胞免疫 | 第20-21页 |
| 1.4.3 细胞因子 | 第21页 |
| 1.5 诊断技术 | 第21-25页 |
| 1.5.1 病毒分离 | 第22页 |
| 1.5.2 RT-PCR | 第22-23页 |
| 1.5.3 血清中和试验 | 第23-24页 |
| 1.5.4 酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第24页 |
| 1.5.5 间接免疫荧光试验(IFA) | 第24页 |
| 1.5.6 胶体金免疫检测技术(GIA) | 第24-25页 |
| 2. PRRSV的中和抗体 | 第25-28页 |
| 2.1 中和抗体的作用 | 第25-26页 |
| 2.2 中和表位的研究进展 | 第26-27页 |
| 2.3 中和抗体的延迟产生 | 第27-28页 |
| 3. PRRSV的疫苗研究进展 | 第28-30页 |
| 3.1 灭活疫苗 | 第28-29页 |
| 3.2 弱毒疫苗 | 第29-30页 |
| 3.3 基因工程疫苗 | 第30页 |
| 4. 纳米颗粒疫苗 | 第30-32页 |
| 4.1 疏水性纳米颗粒 | 第31页 |
| 4.2 亲水性纳米颗粒 | 第31-32页 |
| 5. 黏膜免疫系统 | 第32-33页 |
| 6. 疫苗免疫效果评价 | 第33页 |
| 7. 口腔液 | 第33-36页 |
| 本研究的目的意义及立题依据 | 第36-37页 |
| 第一章 建立一种使用猪口腔液检测猪繁殖与呼吸综合征病毒特异性中和抗体的方法 | 第37-58页 |
| 摘要 | 第37-38页 |
| ABSTRACT | 第38-39页 |
| 1. 引言 | 第39-40页 |
| 2. 材料和方法 | 第40-44页 |
| 2.1 试验材料 | 第40-42页 |
| 2.1.1 细胞系和病毒毒株 | 第40-41页 |
| 2.1.2 其它试剂 | 第41页 |
| 2.1.3 标准化样品 | 第41页 |
| 2.1.4 临床样品 | 第41-42页 |
| 2.2 试验方法 | 第42-44页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第42页 |
| 2.2.2 病毒增殖 | 第42-43页 |
| 2.2.3 口腔液和血液的采集 | 第43页 |
| 2.2.4 PRRSV中和抗体的测定 | 第43页 |
| 2.2.5 方法的特异性和敏感性 | 第43-44页 |
| 2.2.6 重复性 | 第44页 |
| 2.2.7 用ELISA法检测PRRSV特异性和非特异性抗体 | 第44页 |
| 2.2.8 PRRSV RNA拷贝数的检测 | 第44页 |
| 2.2.9 统计分析和数据处理 | 第44页 |
| 3. 结果 | 第44-55页 |
| 3.1 用猪口腔液测定PRRSV中和抗体滴度的中和试验方法的建立 | 第44-47页 |
| 3.2 用猪口腔液测定PRRSV中和抗体滴度中和试验方法的验证 | 第47-50页 |
| 3.3 仔猪口腔液中母源PRRSV中和抗体的检测 | 第50-54页 |
| 3.4 应用口腔液样品检测中和抗体方法的特异性和敏感性判定 | 第54-55页 |
| 3.5 重复性 | 第55页 |
| 4. 讨论 | 第55-57页 |
| 5. 小结 | 第57-58页 |
| 第二章 应用猪口腔液评估灭活PRRSV纳米颗粒疫苗与不同佐剂联合使用的交叉保护免疫效果 | 第58-84页 |
| 摘要 | 第58-59页 |
| ABSTRACT | 第59-60页 |
| 1. 引言 | 第60-62页 |
| 2. 材料和方法 | 第62-68页 |
| 2.1 试验材料 | 第62-63页 |
| 2.1.1 细胞系和病毒毒株 | 第62页 |
| 2.1.2 其它试剂 | 第62页 |
| 2.1.3 试验动物 | 第62-63页 |
| 2.2 试验方法 | 第63-68页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第63页 |
| 2.2.2 病毒增殖与纯化 | 第63页 |
| 2.2.3 病毒的灭活 | 第63页 |
| 2.2.4 PLGA纳米颗粒疫苗的制备 | 第63-64页 |
| 2.2.5 测定纳米颗粒包埋PRRSV蛋白的效率 | 第64页 |
| 2.2.6 动物试验 | 第64-65页 |
| 2.2.7 口腔液和血液的采集 | 第65-66页 |
| 2.2.8 黏膜相关组织(Lung,TBLN,BALfluid)样品的采集 | 第66页 |
| 2.2.9 试验样品病毒滴度和中和抗体效价的测定 | 第66-67页 |
| 2.2.10 Real-time PCR检测PRRSV RNA拷贝数 | 第67页 |
| 2.2.11 PRRSV特异性IgA和IgG抗体分析 | 第67-68页 |
| 2.2.12 统计分析 | 第68页 |
| 3. 结果 | 第68-81页 |
| 3.1 PRRSV纳米颗粒疫苗特征 | 第68-69页 |
| 3.2 临床症状及体温和生长参数 | 第69-71页 |
| 3.3 黏膜相关组织的检测情况 | 第71-75页 |
| 3.3.1 PRRSV病原检测情况 | 第71-72页 |
| 3.3.2 黏膜相关组织的PRRSV中和抗体检测 | 第72-73页 |
| 3.3.3 黏膜相关组织的特异性免疫球蛋白检测 | 第73-75页 |
| 3.4 血清样品检测 | 第75-77页 |
| 3.4.1 血清中的病毒量 | 第75-76页 |
| 3.4.2 血清中的体液免疫应答 | 第76-77页 |
| 3.5 口腔液样品检测 | 第77-81页 |
| 3.5.1 猪口腔液中PRRSV病原检测情况 | 第77-78页 |
| 3.5.2 猪口腔液样品的PRRSV中和抗体水平 | 第78-79页 |
| 3.5.3 猪口腔液样品中的PRRSV特异性IgA和IgG抗体水平 | 第79-81页 |
| 4. 讨论 | 第81-83页 |
| 5. 小结 | 第83-84页 |
| 结论 | 第84-85页 |
| 创新点 | 第85-86页 |
| 后续研究展望 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-107页 |
| 致谢 | 第107-108页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第108页 |
