| 中文摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-17页 |
| 1.1 引言 | 第8页 |
| 1.2 抗体的结构、来源及重要性 | 第8-12页 |
| 1.2.1 抗体的基本结构 | 第8-10页 |
| 1.2.2 抗体的来源 | 第10-11页 |
| 1.2.2.1 多克隆抗体 | 第10页 |
| 1.2.2.2 单克隆抗体 | 第10-11页 |
| 1.2.2.3 基因工程抗体 | 第11页 |
| 1.2.3 抗体的重要价值 | 第11-12页 |
| 1.3 抗体纯化常用的液相色谱技术 | 第12-14页 |
| 1.3.1 沉淀技术 | 第12-13页 |
| 1.3.2 凝胶过滤色谱 | 第13页 |
| 1.3.3 离子交换色谱 | 第13页 |
| 1.3.4 疏水性相互作用色谱 | 第13页 |
| 1.3.5 亲和色谱 | 第13-14页 |
| 1.4 混合模式色谱 | 第14-16页 |
| 1.4.1 简介 | 第14-15页 |
| 1.4.2 混合模式色谱的优点 | 第15页 |
| 1.4.3 混合模式色谱纯化抗体 | 第15-16页 |
| 1.5 本文的主要工作 | 第16-17页 |
| 第二章 混合模式色谱介质的合成及吸附性能研究 | 第17-32页 |
| 2.1 引言 | 第17页 |
| 2.2 材料与方法 | 第17-24页 |
| 2.2.1 实验材料与设备 | 第17-19页 |
| 2.2.2 蛋白质溶液标准曲线 | 第19页 |
| 2.2.3 介质的活化 | 第19-21页 |
| 2.2.3.1 活化过程 | 第20页 |
| 2.2.3.2 测定活化率 | 第20-21页 |
| 2.2.4 配基的偶联 | 第21-22页 |
| 2.2.4.1 偶联方法 | 第21页 |
| 2.2.4.2 测定配基修饰密度 | 第21-22页 |
| 2.2.5 蛋白质吸附平衡实验 | 第22-23页 |
| 2.2.5.1 缓冲液的配制 | 第22页 |
| 2.2.5.2 静态吸附容量测定 | 第22-23页 |
| 2.2.6 动态吸附性能 | 第23-24页 |
| 2.2.7 AN Sepharose Fast Flow 色谱柱的重复使用性能测试 | 第24页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第24-31页 |
| 2.3.1 介质的合成 | 第24页 |
| 2.3.1.1 活化率测定 | 第24页 |
| 2.3.1.2 配基修饰密度的测定 | 第24页 |
| 2.3.2 蛋白质静态吸附平衡实验 | 第24-29页 |
| 2.3.2.1 不同配基修饰密度下γ球蛋白吸附平衡实验 | 第24-25页 |
| 2.3.2.2 不同配基修饰密度下 BSA 吸附平衡实验 | 第25-27页 |
| 2.3.2.3 高浓度 NaCl下γ球蛋白吸附平衡实验 | 第27-28页 |
| 2.3.2.4 高浓度 NaCl下 BSA 吸附平衡实验 | 第28-29页 |
| 2.3.3 动态吸附性能 | 第29-30页 |
| 2.3.4 AN Sepharose Fast Flow 的重复使用性能 | 第30-31页 |
| 2.4 本章小结 | 第31-32页 |
| 第三章 混合模式作用色谱介质纯化抗体 | 第32-48页 |
| 3.1 引言 | 第32页 |
| 3.2 材料与方法 | 第32-38页 |
| 3.2.1 实验材料与设备 | 第32-34页 |
| 3.2.2 抗血清原料液的预处理 | 第34页 |
| 3.2.3 洗脱条件确定 | 第34页 |
| 3.2.4 上样条件优化 | 第34-36页 |
| 3.2.4.1 盐析处理方案 | 第35页 |
| 3.2.4.2 色谱纯化操作 | 第35-36页 |
| 3.2.5 从抗血清中纯化抗体 | 第36-37页 |
| 3.2.6 过量血清上样的抗体纯化 | 第37页 |
| 3.2.7 分析方法 | 第37-38页 |
| 3.2.7.1 Bradford 法测蛋白含量 | 第37页 |
| 3.2.7.2 SDS-PAGE 凝胶电泳 | 第37-38页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第38-46页 |
| 3.3.1 上样条件优化实验 | 第38-40页 |
| 3.3.1.1 盐析处理的纯化结果 | 第38-40页 |
| 3.3.1.2 直接高盐上样和高盐清洗的纯化结果 | 第40页 |
| 3.3.2 不同配基密度下抗血清的纯化结果 | 第40-46页 |
| 3.3.2.1 不同配基密度 AN Sepharose Fast Flow 介质对 RATS 的纯化结果 | 第40-43页 |
| 3.3.2.2 不同配基密度 AN Sepharose Fast Flow 介质对 ASRS 的纯化结果 | 第43-45页 |
| 3.3.2.3 MEP 和 MSSR 对 RATS 和 ASRS 的纯化结果 | 第45-46页 |
| 3.3.3 过量血清上样的抗体纯化结果 | 第46页 |
| 3.4 本章小结 | 第46-48页 |
| 第四章 多柱连续吸附实验纯化抗体 | 第48-51页 |
| 4.1 引言 | 第48页 |
| 4.2 材料与方法 | 第48-49页 |
| 4.2.1 实验材料与设备 | 第48页 |
| 4.2.2 RATS 抗血清原料的预处理 | 第48页 |
| 4.2.3 AN30 SepFF 的三柱串联连续吸附纯化实验 | 第48-49页 |
| 4.2.4 MEP 的三柱串联连续吸附纯化实验 | 第49页 |
| 4.2.5 分析方法 | 第49页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第49-50页 |
| 4.3.1 AN30 SepFF 的三柱串联连续吸附纯化结果 | 第49-50页 |
| 4.3.2 MEP 的三柱串联连续吸附纯化结果 | 第50页 |
| 4.4 本章小结 | 第50-51页 |
| 第五章 结论与展望 | 第51-53页 |
| 5.1 全文总结 | 第51-52页 |
| 5.2 应用展望 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 附录 | 第57-60页 |
| 参研项目和学术成果 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
