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猪多个组织中lincRNA及sORF的鉴定与功能验证

摘要第7-9页
Abstract第9-10页
缩略词表(Abbreviation)第11-12页
1 前言第12-21页
    1.1 研究问题的由来第12页
    1.2 文献综述第12-20页
        1.2.1 基因间长链非编码RNA(lincRNA)及其特征第12-14页
        1.2.2 lincRNA的功能研究第14-17页
        1.2.3 部分lincRNA编码微肽第17-19页
        1.2.4 RPL41研究进展第19-20页
    1.3 研究的目的和意义第20-21页
2 材料和方法第21-45页
    2.1 材料第21-25页
        2.1.1 数据与试验样品第21页
        2.1.2 引物及真核表达载体第21-23页
        2.1.3 主要试剂与抗体第23页
        2.1.4 主要仪器与设备第23-24页
        2.1.5 生物学数据库与相关网站第24页
        2.1.6 生物信息分析软件第24-25页
    2.2 方法第25-45页
        2.2.1 技术路线第25页
        2.2.2 引物设计第25-31页
        2.2.3 RNA提取及质量检测第31-32页
        2.2.4 RT-PCR验证新鉴定的lincRNA第32-33页
        2.2.5 3’RACE确定新鉴定lincRNA的末端第33-36页
        2.2.6 RPL41(G14)物种间多序列比对第36页
        2.2.7 RPL41(G14)第3个内含子的确定第36页
        2.2.8 重组质粒的构建第36-39页
        2.2.9 重组质粒转染细胞第39-43页
        2.2.10 相对荧光定量PCR检测第43-45页
3 结果第45-59页
    3.1 猪多个组织lincRNA的高通量鉴定及基本特征分析第45-48页
        3.1.1 转录组数据筛选鉴定lincRNA第45页
        3.1.2 lincRNA的基本特征第45-48页
    3.2 RT-PCR验证新鉴定的lincRNA第48页
    3.3 3’RACE确定新鉴定lincRNA的末端第48-50页
    3.4 RPL41(G14)微肽基因的序列分析与功能研究第50-54页
        3.4.1 猪RPL41序列与其他物种多序列比对第50-51页
        3.4.2 真核表达载体pc DNA3.1-RPL41-EGFP重组质粒的构建第51页
        3.4.3 pcDNA3.1-RPL41-EGFP重组质粒的表达验证及siRNA干扰效果第51-53页
        3.4.4 RPL41对荧光素酶表达的影响第53-54页
    3.5 超表达及干扰RPL41后数据分析及初步实验验证第54-59页
        3.5.1 二代测序数据及差异表达基因的GO分析结果第54-57页
        3.5.2 Q-PCR验证部分差异表达基因在细胞内的表达第57-59页
4 讨论第59-63页
    4.1 lincRNA的筛选及验证的相关讨论第59页
    4.2 部分lincRNA中存在s ORF且能编码微肽的相关讨论第59-60页
    4.3 利用双荧光素酶报告系统研究RPL41的作用第60-61页
    4.4 关于RPL41在基因转录过程中的作用的相关讨论第61-63页
5 小结第63-65页
    5.1 本研究的主要结论第63页
    5.2 本研究的创新点与特色第63页
    5.3 本研究的不足之处与进一步的工作展望第63-65页
参考文献第65-70页
附录第70-75页
致谢第75-76页

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