| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 1 综述 | 第12-21页 |
| 1.1 生物钟 | 第12-13页 |
| 1.2 生物钟基因和分子机制 | 第13-15页 |
| 1.3 生物钟与繁殖 | 第15-16页 |
| 1.4 内分泌激素 | 第16-19页 |
| 1.4.1 糖皮质激素 | 第16-17页 |
| 1.4.2 性激素 | 第17-19页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-38页 |
| 2.1 样本采集 | 第21-22页 |
| 2.2 组织总RNA的提取和纯化 | 第22-24页 |
| 2.3 总RNA完整性、质量和浓度检测 | 第24页 |
| 2.4 cDNA第一链合成 | 第24-25页 |
| 2.5 简并引物设计与验证 | 第25-28页 |
| 2.5.1 简并引物设计 | 第25页 |
| 2.5.2 普通PCR扩增 | 第25-26页 |
| 2.5.3 PCR产物回收与纯化 | 第26-27页 |
| 2.5.4 DNA测序与分析 | 第27-28页 |
| 2.6 实时荧光定量PCR引物的设计与筛选 | 第28-32页 |
| 2.7 大蟾蜍繁殖期生物钟基因实时荧光定量PCR分析 | 第32-33页 |
| 2.8 血清激素分析 | 第33-37页 |
| 2.8.1 皮质酮测定 | 第33-34页 |
| 2.8.2 雌二醇测定 | 第34-36页 |
| 2.8.3 睾酮测定 | 第36-37页 |
| 2.9 数据统计与分析 | 第37-38页 |
| 3 结果 | 第38-51页 |
| 3.1 中华大蟾蜍繁殖期肤色变化 | 第38-39页 |
| 3.2 中华大蟾蜍脑组织核心生物钟基因表达变化 | 第39-44页 |
| 3.3 中华大蟾蜍肝组织核心生物钟基因表达变化 | 第44-48页 |
| 3.4 血清皮质酮水平的变化 | 第48-49页 |
| 3.5 血清性激素水平的变化 | 第49-51页 |
| 4 讨论 | 第51-55页 |
| 4.1 繁殖峰期和末期核心生物钟基因表达变化 | 第51-53页 |
| 4.2 内分泌激素水平变化 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 攻读学位期间发表的研究论文 | 第68页 |
| 攻读学位期间参加的科研项目和学术会议 | 第68-70页 |