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高密度发酵法生产S-腺苷-L-蛋氨酸

学位论文数据集第4-5页
摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
目录第9-14页
第一章 绪论第14-29页
    1.1 S-腺苷-L-蛋氨酸简介第14-17页
        1.1.1 S-腺苷-L-蛋氨酸的分子结构第14页
        1.1.2 S-腺苷-L-蛋氨酸的稳定性第14-15页
        1.1.3 S-腺苷-L-蛋氨酸的生理作用第15-17页
            1.1.3.1 转甲基作用第16-17页
            1.1.3.2 转氨丙基作用第17页
            1.1.3.3 转硫作用第17页
            1.1.3.4 其他方面的作用第17页
    1.2 S-腺苷-L-蛋氨酸的临床应用第17-19页
        1.2.1 肝病第18页
        1.2.2 抑郁症第18页
        1.2.3 纤维性肌痛和偏头痛第18页
        1.2.4 关节炎等其他疾病第18-19页
    1.3 SAM的生产方法和研究现状第19-23页
        1.3.1 化学合成法生产SAM第19-20页
        1.3.2 酶促转化法生产SAM第20-21页
            1.3.2.1 酵母的SAM合成酶第20页
            1.3.2.2 大肠杆菌的SAM合成酶第20-21页
            1.3.2.3 其他来源的SAM合成酶第21页
        1.3.3 发酵法生产SAM第21-23页
    1.4 腺苷蛋氨酸的分离纯化第23-24页
    1.5 酵母菌的高密度发酵第24-27页
        1.5.1 酵母高密度发酵的限制性因素第25-26页
            1.5.1.1 营养源第25页
            1.5.1.2 溶氧第25页
            1.5.1.3 生长抑制物质第25-26页
            1.5.1.4 发酵液流变学第26页
        1.5.2 酵母高密度发酵的研究进展第26-27页
            1.5.2.1 发酵流加方式的改进第26页
            1.5.2.2 提高溶氧第26-27页
            1.5.2.3 防止乙醇的产生和积累第27页
            1.5.2.4 发酵液流变学的改进第27页
    1.6 S-腺苷-L-蛋氨酸的市场前景第27-28页
    1.7 小结第28-29页
第二章 实验材料和方法第29-41页
    2.1 实验材料第29-31页
        2.1.1 主要试剂第29-30页
        2.1.2 主要仪器设备第30-31页
    2.2 菌种和培养基第31-33页
        2.2.1 菌种及保藏第31-32页
        2.2.2 培养基第32-33页
            2.2.2.1 斜面培养基第32页
            2.2.2.2 平板培养基第32页
            2.2.2.3 驯化菌种培养基第32页
            2.2.2.4 种子培养基第32页
            2.2.2.5 摇瓶培养基第32页
            2.2.2.6 高密度发酵培养基第32-33页
            2.2.2.7 高密度发酵流加培养基第33页
            2.2.2.8 代谢产物分析培养基第33页
    2.3 实验方法第33-34页
        2.3.1 培养方法第33页
            2.3.1.1 斜面培养方法第33页
            2.3.1.2 种子培养方法第33页
            2.3.1.3 摇瓶培养方法第33页
        2.3.2 发酵罐高密度发酵培养第33-34页
    2.4 分析方法第34-41页
        2.4.1 细胞干重(Dry Cell Weight,DCW)的测定第34-35页
            2.4.1.1 直接测定细胞干重第34页
            2.4.1.2 分光光度法测定细胞干重第34-35页
        2.4.2 S-腺苷-L-蛋氨酸的定量分析第35-39页
            2.4.2.1 色谱条件一第35-37页
            2.4.2.2 色谱条件二第37-39页
        2.4.3 葡萄糖浓度的测定第39页
        2.4.4 乙醇浓度的测定第39-40页
        2.4.5 其他第40-41页
第三章 发酵菌株的选育和培养条件的优化第41-55页
    3.1 发酵菌株的选育第41-43页
        3.1.1 发酵菌株的初步筛选第41-42页
        3.1.2 对发酵菌株的进一步筛选第42-43页
    3.2 生长曲线的测定第43页
    3.3 温度和pH值的优化第43-45页
        3.3.1 最佳生长温度,pH值的确定第43-44页
        3.3.2 最佳转化温度,pH值的确定第44-45页
    3.4 不同流加葡萄糖方式的优化第45-49页
        3.4.1 恒速流加第46页
        3.4.2 恒残糖流加第46-47页
        3.4.3 乙醇反馈控制流加第47-48页
        3.4.4 三种流加方式的比较第48-49页
    3.5 转速和通气量的优化第49-51页
        3.5.1 转速的优化第49-50页
        3.5.2 通气量的优化第50页
        3.5.3 纯氧实验第50-51页
    3.6 菌种的驯化第51-53页
    3.7 小结第53-55页
第四章 L-蛋氨酸补加方式的研究第55-65页
    4.1 不补加前体L-蛋氨酸的对照实验第55-56页
    4.2 转化时间对SAM积累量的影响第56页
    4.3 前体L-蛋氨酸补加量对SAM积累量的影响第56-57页
    4.4 前体L-蛋氨酸补加时间对生物量,SAM积累量和SAM含量的影响第57-58页
    4.5 L-蛋氨酸补加方式的研究第58-63页
        4.5.1 在培养基中加入L-蛋氨酸第58-59页
        4.5.2 在菌体密度达到比较高水平(60g·L~(-1))时进行流加第59-60页
        4.5.3 在菌体达到高密度时一次性补加前体L-蛋氨酸第60-61页
        4.5.4 在高密度条件下分三次进行补加第61页
        4.5.5 在高密度条件下进行流加第61-62页
        4.5.6 五种不同补加方式的比较第62-63页
    4.6 小结第63-65页
第五章 代谢过程中相关氨基酸的研究第65-74页
    5.1 培养基中加入十二种不同氨基酸的单因素实验第65-66页
    5.2 五种相关氨基酸的不同补加方式的比较第66-70页
        5.2.1 五种氨基酸在培养基中加入的单因素实验第67页
        5.2.2 五种氨基酸在转化时加入的单因素实验第67-69页
        5.2.3 L-组氨酸和L-赖氨酸在培养基中加,其他三种流加的单因素实验第69-70页
    5.3 对L-蛋氨酸等五种氨基酸进行正交实验第70-71页
    5.4 5L发酵罐生物转化过程考察第71-72页
        5.4.1 对照实验第71页
        5.4.2 补加五种氨基酸的实验第71-72页
    5.6 小结第72-74页
第六章 金属离子的研究第74-81页
    6.1 常见金属离子对SAM产量,含量以及生物量的影响第74-75页
    6.2 Cu~(2+)和Ca~(2+)最优补加量的确定第75-77页
    6.3 将Cu~(2+)和Ca~(2+)的最佳补加量应用于高密度发酵第77页
    6.4 Cu~(2+)和Ca~(2+)的吸收曲线的测定第77-79页
        6.4.1 Cu~(2+)和Ca~(2+)标准曲线的绘制第77-78页
        6.4.2 Cu~(2+)和Ca~(2+)吸收曲线的绘制第78-79页
    6.5 小结第79-81页
第七章 结论第81-82页
第八章 问题与建议第82-84页
    8.1 存在的问题第82页
    8.2 建议第82-84页
参考文献第84-88页
致谢第88-89页
研究成果及发表的学术论文第89-90页
作者简介第90-91页
附件第91-92页

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