| 中文摘要 | 第7-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 第1章 文献综述 | 第22-50页 |
| 第1节 CDK2AP1与肿瘤 | 第23-40页 |
| 1.1 细胞周期及细胞周期调节蛋白 | 第23-25页 |
| 1.2 CDK2AP1基因的发现及命名 | 第25页 |
| 1.3 CDK2AP1结构及形态学特点 | 第25-26页 |
| 1.4 CDK2AP1功能及作用机制 | 第26-29页 |
| 1.5 胚胎性别发育与CDK2AP1 | 第29-30页 |
| 1.6 CDK2AP1对性腺及胚胎的影响 | 第30页 |
| 1.7 CDK2AP1与肿瘤的相关性 | 第30-39页 |
| 1.8 顺铂治疗效果与CDK2AP1 | 第39页 |
| 1.9 对CDKZAPI的研究才刚刚开始 | 第39-40页 |
| 第2节 肺癌与基因治疗 | 第40-50页 |
| 2.1 利用基因技术进行肺癌早期诊断 | 第40-41页 |
| 2.2 基因技术应用于肺癌治疗 | 第41-48页 |
| 2.3 基因治疗肺癌尚存在的问题及期望 | 第48-50页 |
| 第2章 CDK2AP1过表达和RNA1-CDK2AP1慢病毒表达载体的构建与鉴定 | 第50-100页 |
| 第1节 材料和方法 | 第51-84页 |
| 1 实验材料 | 第51-54页 |
| 1.1 材料 | 第51-53页 |
| 1.2 主要仪器 | 第53-54页 |
| 1.3 质粒与菌株 | 第54页 |
| 1.4 实验组织及细胞 | 第54页 |
| 1.5 抗体 | 第54页 |
| 1.6 培养基 | 第54页 |
| 2 实验方法 | 第54-84页 |
| 2.1 CDK2AP1siRNA的序列的设计和RNAi的慢病毒载体的构建 | 第54-63页 |
| 2.2 CDK2AP1过表达载体构建 | 第63-68页 |
| 2.3 Western Blot外源筛选有效靶点 | 第68-72页 |
| 2.4 有效靶点慢病毒大量包装及滴度测定 | 第72-74页 |
| 2.5 RT-PCR验证基因表达水平 | 第74-79页 |
| 2.6 Western blot验证表达水平 | 第79-84页 |
| 第2节 实验结果 | 第84-94页 |
| 1 构建siRNA-CDK2AP1慢病毒载体及鉴定 | 第84-86页 |
| 1.1 酶切vshRNA载体的鉴定 | 第84页 |
| 1.2 构建的siRNA-CDK2AP1慢病毒载体的鉴定 | 第84-86页 |
| 2 基因CDK2AP1过表达载体pGC-FU-CDK2AP1的鉴定 | 第86-88页 |
| 3 Western blot筛选外源靶点 | 第88-89页 |
| 4 慢病毒载体的包装及滴度测定 | 第89-90页 |
| 5 RT-PCR检测转录影响 | 第90-93页 |
| 5.1 慢病毒载体对人肺癌A549细胞的感染情况 | 第90页 |
| 5.2 RT-PCR检测CDK2AP1过表达及siRNA组在肺癌A549细胞中目的基因转录的效果 | 第90-93页 |
| 6 Western blot方法检验siRNACDK2AP1及CDK2AP1对人肺癌A549细胞目的基因表达的影响 | 第93-94页 |
| 第3节 讨论 | 第94-100页 |
| 第3章 CDK2AP1对人肺癌A549细胞功能影响的体外实验研究 | 第100-130页 |
| 第1节 材料和方法 | 第101-112页 |
| 1 材料 | 第101页 |
| 1.1 主要试剂 | 第101页 |
| 1.2 主要仪器 | 第101页 |
| 2 实验方法 | 第101-112页 |
| 2.1 慢病毒感染肺癌细胞 | 第101-102页 |
| 2.2 流式细胞仪检测基因CDK2AP1对细胞周期的影响 | 第102-105页 |
| 2.3 CDK2AP1对细胞增殖的影响 | 第105-106页 |
| 2.4 CDK2AP1对细胞DNA合成的影响 | 第106-108页 |
| 2.5 CDK2AP1对细胞侵袭性的影响 | 第108-109页 |
| 2.6 细胞克隆形成实验 | 第109-112页 |
| 第2节 结果 | 第112-121页 |
| 1 CDK2AP1对人肺癌A549细胞生长周期的影响 | 第112-114页 |
| 2 MTT比色实验法检测细胞增殖抑制实验 | 第114-116页 |
| 3 CDK2AP1对细胞DNA合成的影响 | 第116-117页 |
| 4 CDK2AP1对人肺癌A549细胞侵袭、运动能力的影响 | 第117-119页 |
| 5 细胞克隆形成试验 | 第119-121页 |
| 第3节 讨论 | 第121-130页 |
| 第4章 CDK2AP1对A549人肺癌裸鼠移植瘤生长影响的体内实验研究 | 第130-144页 |
| 第1节 材料与方法 | 第131-134页 |
| 1 主要材料与来源 | 第131页 |
| 2 实验动物 | 第131页 |
| 3 实验方法 | 第131-134页 |
| 3.1 人肺癌A549细胞的培养、慢病毒转染及裸鼠肺癌移植瘤模型的建立 | 第131-133页 |
| 3.2 观察项目 | 第133页 |
| 3.3 实验结果数据处理 | 第133-134页 |
| 第2节 实验结果 | 第134-137页 |
| 1 观察裸鼠肿瘤出瘤时间、大小、称重 | 第134-137页 |
| 第3节 讨论 | 第137-144页 |
| 第5章 结论 | 第144-146页 |
| 参考文献 | 第146-158页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第158-160页 |
| 致谢 | 第160-161页 |
| 发表的SCI文章 | 第161-165页 |
