摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 文献综述 | 第10-21页 |
1.1 概述 | 第10页 |
1.2 昆虫的色素代谢途径 | 第10-12页 |
1.3 家蚕体色突变体的研究进展 | 第12-14页 |
1.3.1 眼色素相关突变体的研究 | 第12-13页 |
1.3.2 黑色素相关突变体的研究 | 第13页 |
1.3.3 蝶呤类代谢途径相关突变体 | 第13-14页 |
1.4 家蚕Sel突变体 | 第14-15页 |
1.5 Sel候补基因的研究进展 | 第15-21页 |
1.5.1 GTPCH | 第15-16页 |
1.5.2 PBGD | 第16-17页 |
1.5.3 ADAR编辑酶 | 第17-21页 |
2 引言 | 第21-23页 |
2.1 研究目的及意义 | 第21页 |
2.2 主要研究内容 | 第21-22页 |
2.2.1 家蚕Sel候补基因的筛选 | 第21-22页 |
2.2.2 家蚕ADAR全长cDNA的克隆、选择性拼接和原核表达分析 | 第22页 |
2.3 技术路线及实验方案 | 第22-23页 |
3 材料和方法 | 第23-36页 |
3.1 实验材料 | 第23页 |
3.2 仪器与试剂 | 第23-26页 |
3.2.1 主要仪器 | 第23-24页 |
3.2.2 主要试剂 | 第24-26页 |
3.3 实验方法 | 第26-36页 |
3.3.1 引物的设计与合成 | 第26-27页 |
3.3.2 家蚕DNA的提取 | 第27-28页 |
3.3.3 家蚕总RNA的提取 | 第28页 |
3.3.4 RNA的检测 | 第28页 |
3.3.5 第一条链cDNA的合成 | 第28-29页 |
3.3.6 PCR反应体系和条件 | 第29页 |
3.3.7 PCR产物割胶回收 | 第29页 |
3.3.8 PCR产物直接测序 | 第29页 |
3.3.9 cDNA扩增产物与T载体的连接反应 | 第29-30页 |
3.3.10 连接产物转化感受态细胞 | 第30页 |
3.3.11 突变位点的碱基验证 | 第30页 |
3.3.12 RT-PCR分析各基因的转录模式 | 第30页 |
3.3.13 5’或 3’RACE第一条链cDNA的合成 | 第30-31页 |
3.3.14 BmADAR的部分片段的扩增 | 第31页 |
3.3.15 BmADAR的 5’端或 3’端片段的扩增 | 第31-33页 |
3.3.17 BmADAR cDNA的选择性拼接 | 第33页 |
3.3.18 BmADAR的A-to-I RNA编辑分析 | 第33页 |
3.3.19 BmADAR的表达模式分析 | 第33页 |
3.3.20 重组质粒的构建 | 第33-34页 |
3.3.21 重组BmADARa的原核表达 | 第34-36页 |
4 结果与分析 | 第36-48页 |
4.1 家蚕Sel候补基因的筛选 | 第36-39页 |
4.1.1 BmGTPCH和BmPBGD的克隆及序列分析 | 第36-37页 |
4.1.2 F2代突变位点的重测序 | 第37-38页 |
4.1.3 BmGTPCH和BmPBGD的时空表达模式分析 | 第38-39页 |
4.2 家蚕ADAR全长cDNA的克隆、选择性拼接和原核表达分析 | 第39-48页 |
4.2.1 BmADAR基因部分片段的扩增 | 第39-40页 |
4.2.2 BmADAR的A-to-I编辑位点分析 | 第40页 |
4.2.3 BmADAR 5’端和 3’端序列的扩增 | 第40-41页 |
4.2.4 BmADAR全长cDNA的克隆及选择性拼接分析 | 第41-42页 |
4.2.5 BmADAR的表达模式分析 | 第42-43页 |
4.2.6 BmADARa的氨基酸序列分析及同源性比较 | 第43-45页 |
4.2.7 重组BmADARa的表达与鉴定 | 第45-48页 |
5 讨论 | 第48-52页 |
6 结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
个人简介 | 第62页 |