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玉米ZmCPK11在ABA诱导的抗氧化防护中的功能分析

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
缩略语第11-13页
第一章 文献综述第13-33页
    1 脱落酸第14-21页
        1.1 ABA在植物适应逆境胁迫中的作用第14-15页
        1.2 ABA信号转导研究进展第15-21页
    2 植物钙依赖性蛋白激酶(CDPKs)研究进展第21-23页
        2.1 CDPK超家族的分类第21页
        2.2 CDPK超家族的特征第21-23页
    3 钙依赖蛋白激酶CDPK第23-30页
        3.1 CDPK的理化性质第23-24页
        3.2 CDPK的结构第24-25页
        3.3 CDPK的底物第25页
        3.4 CDPK亚细胞的定位第25页
        3.5 CDPK活性的调节第25-26页
        3.6 CDPKs在Ca~(2+)信号转导中的作用第26-30页
    4 本实验研究目的与意义第30-33页
第二章 ABA诱导的ZmCPK11的基因克隆、序列分析与亚细胞定位第33-51页
    1 材料与方法第34-43页
        1.1 供试材料第34-35页
        1.2 目标基因的预测与克隆第35-40页
        1.3 ZmCPK11基因的亚细胞定位第40-43页
    2 结果与分析第43-50页
        2.1 RNA纯度分析第43页
        2.2 目标基因的确立第43-44页
        2.3 玉米ZmCPK11基因序列分析第44-46页
        2.4 ZmCPK11基因TA的克隆第46-48页
        2.5 ZmCPK11基因的亚细胞定位第48-50页
    3 讨论第50-51页
第三章 ABA与H_2O_2诱导的ZmCPK11基因表达与激酶活性第51-63页
    1 材料与方法第52-55页
        1.1 供试材料与处理第52-53页
        1.2 RNA提取及cDNA合成第53页
        1.3 蛋白提取第53页
        1.4 半定量RT-PCR表达分析第53页
        1.5 相对定量RT-PCR表达分析第53-54页
        1.6 免疫共沉淀激酶活性反应第54-55页
        1.7 Western-blot第55页
    2 结果与分析第55-61页
        2.1 H_2O_2、ABA和CaCl_2对ZmCPK11的诱导第55-57页
        2.2 水分胁迫信号经过ABA和H_2O_2向下游传递第57-61页
    3 讨论第61-63页
第四章 玉米ZmCPK11基因参与ABA诱导的抗氧化防护第63-77页
    1 材料与方法第64-69页
        1.1 供试材料与处理第64页
        1.2 蛋白提取第64页
        1.3 超氧物歧化酶(SOD)的测定第64-65页
        1.4 抗坏血酸过氧化物酶(APX)测定第65页
        1.5 玉米原生质体分离第65页
        1.6 SOD4、cAPX基因检测第65-66页
        1.7 原生质体RNA提取与cDNA第一链的合成第66页
        1.8 质粒提取第66页
        1.9 ZmCPK11基因dsRNA引物设计第66-67页
        1.10 ZmCPK11基因dsRNA体外合成第67-68页
        1.11 PEG介导转化及ABA处理第68页
        1.12 数据统计分析第68-69页
    2 结果与分析第69-74页
        2.1 ZmCPK11瞬时表达检测第69-70页
        2.2 确定使ZmCPK11基因达到良好瞬时沉默效果的dsRNA的用量第70页
        2.3 ZmCPK11基因瞬时表达对抗氧化防护酶基因表达与酶活性的影响第70-72页
        2.4 ABA作用下ZmCPK11基因沉默对抗氧化防护酶基因表达与酶活性的影响第72-74页
    3 讨论第74-77页
第五章 ABA信号通路中ZmCPK11与ZmMPK5的关系第77-87页
    1 材料与方法第78-79页
        1.1 材料与处理第78-79页
        1.2 原生质体分离与处理第79页
        1.3 dsRNA第79页
        1.4 蛋白提取第79页
        1.5 超氧物歧化酶(SOD)与抗坏血酸过氧化物酶(APX)的测定第79页
        1.6 半定量与定量第79页
        1.7 免疫共沉淀激酶活性反应第79页
    2 结果与分析第79-84页
        2.1 检测ZmMPK5基因沉默效果第79-80页
        2.2 利用抑制剂实验研究ABA诱导下,ZmCPK11与ZmMPK5关系第80页
        2.3 利用原生质体瞬时表达体系研究ABA诱导下,ZmCPK11与ZmMPK5关系第80-82页
        2.4 ZmCPK11与ZmMPK5在ABA诱导的抗氧化防护中的关系第82-84页
    3 讨论第84-87页
第六章 全文结论第87-89页
    1 研究小结第87-88页
        1.1 ZmCPK11基因的克隆、生物学分析以及亚细胞定位第87页
        1.2 ABA与H_2O_2诱导ZmCPK11的基因表达与激酶活性上调第87页
        1.3 玉米ZmCPK11基因参与ABA诱导的抗氧化防护第87页
        1.4 ABA信号通路中ZmCPK11处于ZmMPK5的上游第87-88页
    2 创新之处第88页
        2.2 运用遗传学手段研究了ABA信号转导中ZmCPK11与ZmMPK5之间的关系,明确ZmCPK11作用于ZmMPK5的上游第88页
    3 存在问题与展望第88-89页
参考文献第89-107页
致谢第107页

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