| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略语 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-33页 |
| 1 脱落酸 | 第14-21页 |
| 1.1 ABA在植物适应逆境胁迫中的作用 | 第14-15页 |
| 1.2 ABA信号转导研究进展 | 第15-21页 |
| 2 植物钙依赖性蛋白激酶(CDPKs)研究进展 | 第21-23页 |
| 2.1 CDPK超家族的分类 | 第21页 |
| 2.2 CDPK超家族的特征 | 第21-23页 |
| 3 钙依赖蛋白激酶CDPK | 第23-30页 |
| 3.1 CDPK的理化性质 | 第23-24页 |
| 3.2 CDPK的结构 | 第24-25页 |
| 3.3 CDPK的底物 | 第25页 |
| 3.4 CDPK亚细胞的定位 | 第25页 |
| 3.5 CDPK活性的调节 | 第25-26页 |
| 3.6 CDPKs在Ca~(2+)信号转导中的作用 | 第26-30页 |
| 4 本实验研究目的与意义 | 第30-33页 |
| 第二章 ABA诱导的ZmCPK11的基因克隆、序列分析与亚细胞定位 | 第33-51页 |
| 1 材料与方法 | 第34-43页 |
| 1.1 供试材料 | 第34-35页 |
| 1.2 目标基因的预测与克隆 | 第35-40页 |
| 1.3 ZmCPK11基因的亚细胞定位 | 第40-43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-50页 |
| 2.1 RNA纯度分析 | 第43页 |
| 2.2 目标基因的确立 | 第43-44页 |
| 2.3 玉米ZmCPK11基因序列分析 | 第44-46页 |
| 2.4 ZmCPK11基因TA的克隆 | 第46-48页 |
| 2.5 ZmCPK11基因的亚细胞定位 | 第48-50页 |
| 3 讨论 | 第50-51页 |
| 第三章 ABA与H_2O_2诱导的ZmCPK11基因表达与激酶活性 | 第51-63页 |
| 1 材料与方法 | 第52-55页 |
| 1.1 供试材料与处理 | 第52-53页 |
| 1.2 RNA提取及cDNA合成 | 第53页 |
| 1.3 蛋白提取 | 第53页 |
| 1.4 半定量RT-PCR表达分析 | 第53页 |
| 1.5 相对定量RT-PCR表达分析 | 第53-54页 |
| 1.6 免疫共沉淀激酶活性反应 | 第54-55页 |
| 1.7 Western-blot | 第55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-61页 |
| 2.1 H_2O_2、ABA和CaCl_2对ZmCPK11的诱导 | 第55-57页 |
| 2.2 水分胁迫信号经过ABA和H_2O_2向下游传递 | 第57-61页 |
| 3 讨论 | 第61-63页 |
| 第四章 玉米ZmCPK11基因参与ABA诱导的抗氧化防护 | 第63-77页 |
| 1 材料与方法 | 第64-69页 |
| 1.1 供试材料与处理 | 第64页 |
| 1.2 蛋白提取 | 第64页 |
| 1.3 超氧物歧化酶(SOD)的测定 | 第64-65页 |
| 1.4 抗坏血酸过氧化物酶(APX)测定 | 第65页 |
| 1.5 玉米原生质体分离 | 第65页 |
| 1.6 SOD4、cAPX基因检测 | 第65-66页 |
| 1.7 原生质体RNA提取与cDNA第一链的合成 | 第66页 |
| 1.8 质粒提取 | 第66页 |
| 1.9 ZmCPK11基因dsRNA引物设计 | 第66-67页 |
| 1.10 ZmCPK11基因dsRNA体外合成 | 第67-68页 |
| 1.11 PEG介导转化及ABA处理 | 第68页 |
| 1.12 数据统计分析 | 第68-69页 |
| 2 结果与分析 | 第69-74页 |
| 2.1 ZmCPK11瞬时表达检测 | 第69-70页 |
| 2.2 确定使ZmCPK11基因达到良好瞬时沉默效果的dsRNA的用量 | 第70页 |
| 2.3 ZmCPK11基因瞬时表达对抗氧化防护酶基因表达与酶活性的影响 | 第70-72页 |
| 2.4 ABA作用下ZmCPK11基因沉默对抗氧化防护酶基因表达与酶活性的影响 | 第72-74页 |
| 3 讨论 | 第74-77页 |
| 第五章 ABA信号通路中ZmCPK11与ZmMPK5的关系 | 第77-87页 |
| 1 材料与方法 | 第78-79页 |
| 1.1 材料与处理 | 第78-79页 |
| 1.2 原生质体分离与处理 | 第79页 |
| 1.3 dsRNA | 第79页 |
| 1.4 蛋白提取 | 第79页 |
| 1.5 超氧物歧化酶(SOD)与抗坏血酸过氧化物酶(APX)的测定 | 第79页 |
| 1.6 半定量与定量 | 第79页 |
| 1.7 免疫共沉淀激酶活性反应 | 第79页 |
| 2 结果与分析 | 第79-84页 |
| 2.1 检测ZmMPK5基因沉默效果 | 第79-80页 |
| 2.2 利用抑制剂实验研究ABA诱导下,ZmCPK11与ZmMPK5关系 | 第80页 |
| 2.3 利用原生质体瞬时表达体系研究ABA诱导下,ZmCPK11与ZmMPK5关系 | 第80-82页 |
| 2.4 ZmCPK11与ZmMPK5在ABA诱导的抗氧化防护中的关系 | 第82-84页 |
| 3 讨论 | 第84-87页 |
| 第六章 全文结论 | 第87-89页 |
| 1 研究小结 | 第87-88页 |
| 1.1 ZmCPK11基因的克隆、生物学分析以及亚细胞定位 | 第87页 |
| 1.2 ABA与H_2O_2诱导ZmCPK11的基因表达与激酶活性上调 | 第87页 |
| 1.3 玉米ZmCPK11基因参与ABA诱导的抗氧化防护 | 第87页 |
| 1.4 ABA信号通路中ZmCPK11处于ZmMPK5的上游 | 第87-88页 |
| 2 创新之处 | 第88页 |
| 2.2 运用遗传学手段研究了ABA信号转导中ZmCPK11与ZmMPK5之间的关系,明确ZmCPK11作用于ZmMPK5的上游 | 第88页 |
| 3 存在问题与展望 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-107页 |
| 致谢 | 第107页 |
