摘要 | 第9-12页 |
ABSTRACT | 第12-14页 |
缩略词表 | 第15-16页 |
第一部分 文献综述 | 第16-47页 |
第一章 植物抗性的研究进展 | 第17-37页 |
1 植物抗性的分类 | 第17-18页 |
2 植物的主动抗性 | 第18-28页 |
2.1 植物的主动抗性的组成 | 第18页 |
2.2 系统获得性抗性研究进展 | 第18-28页 |
2.2.1 系统获得性抗性的特点 | 第19页 |
2.2.2 系统获得性抗性的机制 | 第19-22页 |
2.2.3 参与系统获得性抗性的信号分子及信号途径 | 第22-27页 |
2.2.4 信号途径间的互作 | 第27-28页 |
3 植物抗虫性的研究进展 | 第28-37页 |
3.1 植物与昆虫的关系研究概述 | 第28-29页 |
3.2 植物的抗虫性 | 第29-33页 |
3.2.1 组成抗虫性 | 第29-30页 |
3.2.2 诱导抗虫性 | 第30-33页 |
3.3 大豆抗食叶性害虫研究进展 | 第33-37页 |
3.3.1 大豆食叶性害虫概述 | 第33-34页 |
3.3.2 斜纹夜蛾 | 第34页 |
3.3.3 大豆抗食叶性害虫相关研究 | 第34-37页 |
第二章 蛋白质组学及其在植物研究中的应用 | 第37-45页 |
1 蛋白质组学概念及研究内容 | 第37-38页 |
2 蛋白质组学研究技术 | 第38-40页 |
2.1 蛋白质分离技术 | 第38-39页 |
2.2 蛋白质鉴定技术 | 第39-40页 |
2.3 生物信息学分析 | 第40页 |
3 蛋白质组学在植物研究中的应用 | 第40-45页 |
3.1 蛋白质组学在植物发育过程中的应用 | 第40-41页 |
3.2 蛋白质组学在植物响应逆境胁迫反应中的应用 | 第41-45页 |
3.2.1 非生物胁迫下植物蛋白质组学研究 | 第42页 |
3.2.2 生物胁迫下植物蛋白质组学研究 | 第42-45页 |
第三章 S-腺苷甲硫氨酸合成酶(SAMS) | 第45-47页 |
1 S-腺苷甲硫氨酸合成酶及其生物学意义 | 第45页 |
2 S-腺苷甲硫氨酸合成酶的相关研究 | 第45-47页 |
第二部分 研究报告 | 第47-97页 |
第四章 斜纹夜蛾诱导大豆对斜纹夜蛾抗性的鉴定 | 第49-55页 |
1 材料与方法 | 第49-51页 |
1.1 实验材料 | 第49页 |
1.2 诱导因子 | 第49-50页 |
1.3 材料种植与诱导处理 | 第50页 |
1.4 抗虫性鉴定 | 第50-51页 |
1.4.1 斜纹夜蛾对寄主的双向选择实验 | 第50-51页 |
1.4.2 斜纹夜蛾强迫饲喂实验 | 第51页 |
2 结果与分析 | 第51-53页 |
2.1 斜纹夜蛾对寄主的双向选择实验 | 第51-52页 |
2.2 强迫饲喂实验 | 第52-53页 |
3 讨论 | 第53-55页 |
第五章 斜纹夜蛾诱导后大豆叶片的差异蛋白质组学分析 | 第55-77页 |
1 材料与方法 | 第55-61页 |
1.1 实验材料 | 第55页 |
1.2 诱导因子 | 第55-56页 |
1.3 主要试剂 | 第56页 |
1.4 主要仪器 | 第56页 |
1.5 材料种植及诱导处理 | 第56页 |
1.6 大豆叶片可溶性蛋白的提取 | 第56-57页 |
1.7 蛋白样品的溶解 | 第57页 |
1.8 蛋白质浓度的测定 | 第57-58页 |
1.9 第一向固相pH梯度等电聚焦(IPG-IEF) | 第58-59页 |
1.10 第二向胶条的平衡及SDS-PAGE电泳 | 第59页 |
1.11 染色 | 第59-60页 |
1.11.1 考马斯亮蓝染色 | 第59-60页 |
1.11.2 硝酸银染色 | 第60页 |
1.12 图像扫描与分析 | 第60页 |
1.13 胶内酶解及蛋白质点的质谱分析 | 第60-61页 |
1.14 差异蛋白点的生物信息学分析 | 第61页 |
1.15 荧光定量PCR分析 | 第61页 |
2 结果与分析 | 第61-72页 |
2.1 蛋白质浓度的测定 | 第61-62页 |
2.2 不同染色方法的2-DE凝胶图谱的比较 | 第62页 |
2.3 不同时间叶片的蛋白质组研究 | 第62-68页 |
2.3.1 2-DE图谱分析 | 第62-67页 |
2.3.2 差异表达蛋白点的质谱分析与鉴定 | 第67-68页 |
2.4 差异表达蛋白点在转录水平上的表达分析 | 第68-72页 |
3 讨论 | 第72-77页 |
3.1 双向电泳图谱分析 | 第72页 |
3.2 差异蛋白点的质谱分析 | 第72-73页 |
3.3 差异表达蛋白的转录和翻译水平分析 | 第73页 |
3.4 差异表达蛋白的功能分析 | 第73-77页 |
第六章 大豆S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因1(GmSAMS1)的克隆与功能分析 | 第77-97页 |
1. 材料与方法 | 第77-85页 |
1.1 实验材料 | 第77-78页 |
1.2 试剂与仪器 | 第78页 |
1.2.1 主要试剂 | 第78页 |
1.2.2 主要仪器 | 第78页 |
1.3 引物合成及测序 | 第78页 |
1.4 植物基因组DNA的提取方法 | 第78-79页 |
1.5 总RNA的提取、纯化及cDNA第一链的合成 | 第79-81页 |
1.5.1 总RNA的提取(TRIZOL法) | 第79页 |
1.5.2 RNA的纯化 | 第79-80页 |
1.5.3 cDNA第一链的合成 | 第80-81页 |
1.6 GmSAMS1基因的克隆 | 第81-82页 |
1.7 GmSAMS1基因及氨基酸的序列分析 | 第82页 |
1.8 植物表达载体的构建 | 第82-83页 |
1.9 细胞定位 | 第83页 |
1.10 农杆菌介导叶盘法转化烟草 | 第83-85页 |
1.10.1 受体材料准备 | 第83-84页 |
1.10.2 农杆菌的培养 | 第84页 |
1.10.3 农杆菌浸染叶盘 | 第84页 |
1.10.4 继代选择培养 | 第84页 |
1.10.5 生根培养 | 第84-85页 |
1.11 转基因烟草阳性植株的鉴定 | 第85页 |
1.12 转基因烟草的抗虫性实验 | 第85页 |
1.12.1 斜纹夜蛾对寄主的双向选择实验 | 第85页 |
1.12.2 强迫饲喂实验 | 第85页 |
2 结果与分析 | 第85-94页 |
2.1 斜纹夜蛾诱导后大豆叶片内SAMS的变化 | 第85-86页 |
2.2 GmSAMS1基因的克隆 | 第86-87页 |
2.3 GmSAMS1基因的生物信息学分析 | 第87-90页 |
2.4 植物表达载体的构建 | 第90页 |
2.5 细胞定位 | 第90页 |
2.6 转基因烟草阳性检测 | 第90-91页 |
2.7 转基因烟草的抗虫性鉴定 | 第91-94页 |
2.7.1 斜纹夜蛾对寄主的双向选择实验 | 第92-93页 |
2.7.2 强迫饲喂实验 | 第93-94页 |
3 讨论 | 第94-97页 |
3.1 SAMS基因的克隆 | 第94-95页 |
3.2 SAMS基因的功能分析 | 第95-97页 |
全文结论 | 第97-99页 |
本研究创新之处 | 第99-101页 |
参考文献 | 第101-115页 |
附录 | 第115-121页 |
攻读博士学位期间发表及待发表的研究论文 | 第121-123页 |
致谢 | 第123页 |