| 中文摘要 | 第9-16页 |
| ABSTRACT | 第16-23页 |
| 符号说明 | 第24-26页 |
| 第一章 前言 | 第26-48页 |
| 1.1 淀粉的组成特性和用途 | 第26-29页 |
| 1.2 淀粉合成机制 | 第29-41页 |
| 1.2.1 淀粉合成和储藏部位 | 第29页 |
| 1.2.2 淀粉粒的结构 | 第29-30页 |
| 1.2.3 淀粉合成途径 | 第30-31页 |
| 1.2.4 ADP葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase) | 第31-35页 |
| 1.2.4.1 AGPase的分类和编码基因 | 第31-32页 |
| 1.2.4.2 胞质型AGPase的特性 | 第32-33页 |
| 1.2.4.3 AGPase修饰突变型对酶活性及籽粒性状的影响 | 第33-35页 |
| 1.2.5 直链淀粉的合成机制 | 第35-37页 |
| 1.2.5.1 直链淀粉的合成主要由GBSSI负责 | 第35-36页 |
| 1.2.5.2 影响GBSSI合成直链淀粉的因素 | 第36-37页 |
| 1.2.6 支链淀粉的合成机制 | 第37-40页 |
| 1.2.6.1 淀粉分支酶(SBE)的分类和特点 | 第37-38页 |
| 1.2.6.2 SBE的功能研究 | 第38-39页 |
| 1.2.6.3 淀粉去分支酶(DBE) | 第39-40页 |
| 1.2.7 参与淀粉合成各类酶间的相互作用 | 第40-41页 |
| 1.3 提高玉米总淀粉含量和直链淀粉含量的可行途径 | 第41-45页 |
| 1.3.1 利用胚乳突变体对淀粉组成和理化特性的遗传改良 | 第41-42页 |
| 1.3.2 利用RNAi抑制SBE活性提高直链淀粉含量研究 | 第42-45页 |
| 1.3.2.1 RNAi技术的原理 | 第42-43页 |
| 1.3.2.2 RNAi在植物改良中的应用 | 第43-45页 |
| 1.3.2.3 RNAi抑制SBE酶活性提高直链淀粉含量的研究 | 第45页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第45-48页 |
| 第二章 SBEIIRNAi结构转基因玉米后代性状的分析 | 第48-64页 |
| 2.1 材料与方法 | 第48-55页 |
| 2.1.1 植物材料、质粒和菌株 | 第48-51页 |
| 2.1.2 碘结合法测定直链淀粉含量 | 第51-52页 |
| 2.1.3 凝胶渗透法(GPC法)测定直链淀粉含量 | 第52-54页 |
| 2.1.4 电镜观察淀粉粒形态 | 第54-55页 |
| 2.2 结果与分析 | 第55-60页 |
| 2.2.1 SBEIIRNAi结构转基因玉米籽粒淀粉组分的分析 | 第55-57页 |
| 2.2.2 SBEIIRNAi转基因玉米籽粒淀粉粒形态观察 | 第57-58页 |
| 2.2.3 SBEIIRNAi转基因玉米籽粒表型分析 | 第58-60页 |
| 2.3 讨论 | 第60-64页 |
| 第三章 突变型AGPase过表达提高了玉米籽粒淀粉含量和产量 | 第64-89页 |
| 3.1 材料方法 | 第64-74页 |
| 3.1.1 植物材料和质粒及菌种 | 第64页 |
| 3.1.2 Sh2r6hs基因的获得和植物表达载体的构建 | 第64-67页 |
| 3.1.2.1 Sh2r6hs基因的获得 | 第64-66页 |
| 3.1.2.2 植物表达载体的构建 | 第66-67页 |
| 3.1.3 转基因玉米的产生 | 第67-68页 |
| 3.1.3.1 农杆菌的培养 | 第67页 |
| 3.1.3.2 玉米农杆菌介导的转化 | 第67-68页 |
| 3.1.3.3 转基因株系的选择和编号 | 第68页 |
| 3.1.4 转基因玉米的分子检测 | 第68-71页 |
| 3.1.4.1 PCR检测 | 第68-69页 |
| 3.1.4.2 real-time RT-PCR检测 | 第69-71页 |
| 3.1.5 转基因玉米的性状分析 | 第71-74页 |
| 3.1.5.1 AGPase酶活性检测 | 第71-73页 |
| 3.1.5.2 植株田间产量及农艺性状测定 | 第73-74页 |
| 3.2 结果与分析 | 第74-86页 |
| 3.2.1 Sh2r6hs基因的获得 | 第74页 |
| 3.2.2 植物表达载体的构建 | 第74-76页 |
| 3.2.3 转基因玉米植株的获得 | 第76-78页 |
| 3.2.4 转基因植株基因表达分析 | 第78-80页 |
| 3.2.5 转基因植株AGPase酶活性测定 | 第80-81页 |
| 3.2.6 转基因植株淀粉含量的测定 | 第81-82页 |
| 3.2.7 转基因植株百粒重 | 第82-83页 |
| 3.2.8 转基因植株籽粒表型分析 | 第83-84页 |
| 3.2.9 转基因植株田间农艺性状及产量分析 | 第84-86页 |
| 3.3 讨论 | 第86-89页 |
| 第四章 过表达GBSSI提高玉米籽粒直链淀粉含量 | 第89-112页 |
| 4.1 材料与方法 | 第89-95页 |
| 4.1.1 植物材料、质粒和菌种 | 第89页 |
| 4.1.2 ZmWx基因的克隆 | 第89-91页 |
| 4.1.2.1 玉米胚乳cDNA模板的合成 | 第89-90页 |
| 4.1.2.2 ZmWx基因的获得 | 第90-91页 |
| 4.1.3 植物表达载体的构建 | 第91-92页 |
| 4.1.4 转基因植株的产生 | 第92页 |
| 4.1.5 转基因玉米的分子检测 | 第92-93页 |
| 4.1.5.1 PCR检测 | 第92-93页 |
| 4.1.5.2 real-time RT-PCR检测 | 第93页 |
| 4.1.6 GBSSI酶活性检测 | 第93-94页 |
| 4.1.7 转基因玉米籽粒淀粉含量的检测 | 第94页 |
| 4.1.8 转基因玉米株系的田间农艺性状和产量测定 | 第94-95页 |
| 4.2 结果与分析 | 第95-109页 |
| 4.2.1 ZmWx基因的克隆 | 第95页 |
| 4.2.2 植物表达载体的构建 | 第95-96页 |
| 4.2.3 转基因株系的产生及分子检测 | 第96-98页 |
| 4.2.4 转基因植株ZmWx基因的表达分析 | 第98-99页 |
| 4.2.5 转基因植株的GBSSI酶活性测定 | 第99-100页 |
| 4.2.6 ZmWx因过表达对籽粒淀粉含量和直链淀粉含量的影响 | 第100-101页 |
| 4.2.7 过表达ZmWx基因对玉米籽粒表型和百粒重的影响 | 第101-102页 |
| 4.2.8 过表达ZmWx基因对玉米田间农艺性状的影响 | 第102-104页 |
| 4.2.9 突变型AGPase过表达玉米与GBSSI过表达玉米聚合材料的初步分析 | 第104-109页 |
| 4.2.9.1 转基因聚合玉米植株的表达分析 | 第105-106页 |
| 4.2.9.2 转基因聚合玉米的AGPase和GBSSI酶的活性测定 | 第106-107页 |
| 4.2.9.3 转基因聚合玉米籽粒总淀粉和直链淀粉含量的变化 | 第107页 |
| 4.2.9.4 转基因聚合植株农艺形状分析 | 第107-109页 |
| 4.3 讨论 | 第109-112页 |
| 第五章 总结和展望 | 第112-117页 |
| 参考文献 | 第117-124页 |
| 致谢 | 第124-125页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文及专利 | 第125-126页 |
| 附件 | 第126页 |
