| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 常用缩略词（Abbreviation） | 第8-13页 |
| 1 前言 | 第13-20页 |
| 1.1 副猪嗜血杆菌简介 | 第13页 |
| 1.2 副猪嗜血杆菌致病机制研究进展 | 第13-14页 |
| 1.3 副猪嗜血杆菌致病相关因子 | 第14-18页 |
| 1.3.1 荚膜与脂多糖在HPS致病过程中的作用 | 第14-16页 |
| 1.3.2 外膜蛋白在HPS致病过程中的作用 | 第16-17页 |
| 1.3.3 其他因子在HPS致病过程中的作用 | 第17-18页 |
| 1.4 脂寡糖合成相关基因研究进展 | 第18页 |
| 1.5 Lgt B、lex-1 的相关研究 | 第18-19页 |
| 1.6 研究目的和意义 | 第19-20页 |
| 第一章 副猪嗜血杆菌lgt B、lex-1 基因缺失株及互补菌株的构建 | 第20-34页 |
| 1 材料与方法 | 第20-28页 |
| 1.1 材料 | 第20-22页 |
| 1.1.1 菌株和质粒 | 第20页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第20页 |
| 1.1.3 溶液的配制 | 第20-21页 |
| 1.1.4 主要仪器 | 第21页 |
| 1.1.5 引物 | 第21-22页 |
| 1.2 方法 | 第22-28页 |
| 1.2.1 细菌的培养和PCR模板的制备 | 第22页 |
| 1.2.2 Lgt B和lex-1 基因缺失株的构建 | 第22-25页 |
| 1.2.2.1 Lgt B、lex-1 基因上臂和下臂的扩增 | 第22-23页 |
| 1.2.2.2 Lgt B、lex-1 上下臂的连接 | 第23-24页 |
| 1.2.2.3 连接产物的转化 | 第24-25页 |
| 1.2.2.4 自然转化SC096菌株 | 第25页 |
| 1.2.3 互补菌株的构建 | 第25-28页 |
| 1.2.3.1 PSF116中间载体的构建 | 第25-26页 |
| 1.2.3.2 互补载体p ZQ003和p ZQ004的构建 | 第26-27页 |
| 1.2.3.3 自然转化 Δlgt B和 Δlex-1 菌株 | 第27-28页 |
| 2 结果与分析 | 第28-32页 |
| 2.1 缺失载体的构建 | 第28-29页 |
| 2.2 互补载体的构建 | 第29-30页 |
| 2.3 缺失株 Δlgt B、Δlex-1 和互补株 Δlgt B-c、Δlex1c的鉴定及分析 | 第30-32页 |
| 3 讨论 | 第32-33页 |
| 4 结论 | 第33-34页 |
| 第二章 副猪嗜血杆菌 Δlgt B和 Δlex-1 缺失株的致病特性研究 | 第34-49页 |
| 1 材料与方法 | 第34-41页 |
| 1.1 材料 | 第34-36页 |
| 1.1.1 菌株 | 第34页 |
| 1.1.2 实验动物 | 第34页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第34页 |
| 1.1.4 溶液的配制 | 第34-35页 |
| 1.1.5 主要仪器 | 第35-36页 |
| 1.2 方法 | 第36-41页 |
| 1.2.1 副猪嗜血杆菌的复壮及培养 | 第36页 |
| 1.2.2 生长曲线的测定 | 第36页 |
| 1.2.3 脂多糖的变化 | 第36-37页 |
| 1.2.3.1 脂多糖的抽提 | 第36页 |
| 1.2.3.2 SDS-PAGE | 第36-37页 |
| 1.2.3.3 银染 | 第37页 |
| 1.2.4 补体介导的血清杀菌试验 | 第37-38页 |
| 1.2.5 PK-15 的粘附入侵 | 第38-40页 |
| 1.2.5.1 细胞培养 | 第38页 |
| 1.2.5.2 细胞粘附试验 | 第38页 |
| 1.2.5.3 细胞入侵试验 | 第38-39页 |
| 1.2.5.4 Real-Time PCR 检测 lgtB 转录水平 | 第39-40页 |
| 1.2.6 豚鼠感染试验 | 第40页 |
| 1.2.6.1 细菌计数 | 第40页 |
| 1.2.6.2 感染豚鼠 | 第40页 |
| 1.2.6.3 临床症状、病理变化 | 第40页 |
| 1.2.7 数据分析 | 第40-41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-45页 |
| 2.1 野生型SC096和缺失菌株的生长曲线的鉴定及分析 | 第41页 |
| 2.2 脂寡糖的鉴定及分析 | 第41-42页 |
| 2.3 血清杀菌试验的结果及分析 | 第42-43页 |
| 2.4 粘附和入侵PK-15 细胞的能力 | 第43-44页 |
| 2.5 豚鼠感染试验的结果及分析 | 第44-45页 |
| 3 讨论 | 第45-48页 |
| 3.1 Lgt B、lex-1 基因缺失株的生长曲线变化 | 第46页 |
| 3.2 Lgt B、lex-1 基因缺失株的脂寡糖变化 | 第46-47页 |
| 3.3 Lgt B、lex-1 基因缺失株的血清抗性 | 第47-48页 |
| 3.4 Lgt B、lex-1 基因缺失菌株的粘附入侵能力 | 第48页 |
| 3.5 Lgt B基因缺失株感染豚鼠结果分析 | 第48页 |
| 4 结论 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-58页 |
| 附录 1 | 第58-59页 |
| 附录 2 | 第59-60页 |
| 附录 3 | 第60页 |
