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多效性基因CPR5转化水稻中花11的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-8页
英文缩写词表第8-14页
第一章 绪论第14-30页
   ·根癌农杆菌介导的水稻转化技术第14-19页
     ·根癌农杆菌介导基因转化的机理第15页
     ·根癌农杆菌介导基因转化的特点第15-16页
     ·影响根癌农杆菌介导基因转化的因素第16-19页
   ·水稻再生技术的研究第19-21页
     ·影响水稻再生的因素第19-21页
   ·转基因水稻中外源基因的鉴定第21-22页
   ·水稻耐高温基因工程研究进展第22-24页
     ·几种常见的耐高温基因及其在水稻基因工程中的利用第22-23页
     ·水稻耐高温转基因中存在的问题与对策第23-24页
   ·AtCPR5 基因的介绍第24页
   ·本课题的研究基础第24-27页
     ·AtCPR5 基因的耐热表现第24-25页
     ·AtCPR5 基因与OsCPR5 基因的同源性分析第25-27页
   ·本课题研究的目的意义和内容第27-30页
     ·本课题研究的目的和意义第27-28页
     ·本课题研究的内容第28页
     ·论文的设计思路第28-30页
第二章 AtCPR5 基因和OsCPR5 基因的克隆及载体构建第30-50页
   ·引言第30页
   ·材料与主要仪器第30-33页
     ·实验材料第30-33页
     ·主要仪器第33页
   ·实验方法第33-42页
     ·AtCPR5 基因克隆及载体构建第33-39页
     ·OsCPR5 基因克隆及载体构建第39-42页
   ·结果与分析第42-47页
     ·AtCPR5 基因的RT-PCR 扩增第42页
     ·AtCPR5 与pMD20-T 重组子构建第42-43页
     ·AtCPR5 与pHQSN1 表达载体的连接第43-44页
     ·pHQSN1-AtCPR5 重组子转化根瘤农杆菌的检测第44页
     ·OsCPR5 基因的RT-PCR 扩增第44-45页
     ·OsCPR5 与pMD20-T 重组子菌落PCR 检测第45-46页
     ·OsCPR5 与pMD20-T 重组子酶切检测第46页
     ·OsCPR5 与pHQSN1 表达载体的连接第46-47页
     ·pHQSN1-OsCPR5 重组子转化农杆菌的检测第47页
   ·讨论第47-48页
   ·本章小结第48-50页
第三章 中花11 高效离体再生体系的建立第50-59页
   ·引言第50页
   ·材料与主要仪器第50-51页
     ·实验材料第50-51页
     ·主要仪器第51页
   ·实验方法第51-52页
     ·外植体的消毒处理第51页
     ·愈伤组织的诱导第51页
     ·愈伤组织的继代增殖第51页
     ·愈伤组织的预分化培养第51-52页
     ·愈伤组织的分化再生第52页
   ·结果与分析第52-56页
     ·温度和光照对愈伤组织诱导的影响第52-53页
     ·温度和光照对愈伤组织继代生长的影响第53-54页
     ·温度和光照对愈伤组织再生的影响第54-55页
     ·不同的激素配比对水稻愈伤组织分化和再生的影响第55-56页
   ·讨论第56-58页
   ·本章小结第58-59页
第四章 根癌农杆菌介导的植株转化第59-66页
   ·引言第59页
   ·材料与主要仪器第59-62页
     ·实验材料第59-62页
     ·主要仪器第62页
   ·实验方法第62-63页
     ·“中花11”水稻愈伤组织的诱导和继代第62页
     ·根癌农杆菌的活化及工程菌液的制备第62页
     ·根癌农杆菌转化水稻胚性愈伤组织及抗性苗的获得第62-63页
   ·结果与讨论第63-64页
     ·抗性水稻植株的获得第63-64页
     ·共培养时添加滤纸对胚性愈伤组织生长的影响第64页
   ·讨论第64-65页
   ·本章小结第65-66页
第五章 转化植株的分子检测第66-79页
   ·引言第66页
   ·材料与方法第66-73页
     ·实验材料第66页
     ·实验方法第66-73页
   ·结果与分析第73-77页
     ·转AtCPR5 基因抗性植株的PCR 检测第73-74页
     ·转AtCPR5 基因的Southern blot 检测第74-75页
     ·转AtCPR5 基因的半定量RT-PCR 检测第75-76页
     ·转OsCPR5 基因抗性植株的PCR 检测第76页
     ·转OsCPR5 基因的半定量RT-PCR 检测第76-77页
   ·讨论第77页
   ·本章小结第77-79页
结论与展望第79-82页
 1 结论第79页
 2 创新性第79-80页
 3 展望第80-82页
参考文献第82-89页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第89-90页
致谢第90-91页
附件第91页

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