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CBFβ对Vif功能的调控以及进化压力下Vif功能的选择性研究

前言第4-5页
中文摘要第5-8页
Abstract第8-9页
英文缩略词表第13-15页
第1章 绪论第15-35页
    1.1 背景知识第15-32页
        1.1.1 人类获得性免疫缺陷病毒-艾滋病病毒简介第15-19页
        1.1.2 艾滋病病毒辅助蛋白与宿主内的抗病毒因子的相互作用进展第19-23页
        1.1.3 HIV-1 辅助蛋白Vif的结构和功能的介绍第23-28页
        1.1.4 CBFβ 蛋白的简介第28-32页
    1.2 论文设计第32-35页
        1.2.1 论文设计的目的和意义第32-33页
        1.2.2 实验设计第33-35页
第2章 材料与方法第35-47页
    2.1 实验相关材料、仪器和试剂第35-40页
        2.1.1 质粒构建第35-38页
        2.1.2 实验仪器第38页
        2.1.3 实验试剂第38-39页
        2.1.4 抗体第39页
        2.1.5 菌株和细胞系第39-40页
    2.2 实验方法第40-47页
        2.2.1 PCR以及定点突变PCR产物第40页
        2.2.2 胶回收第40-41页
        2.2.3 蓝白斑筛选以及目的载体连接第41-42页
        2.2.4 大提质粒第42页
        2.2.5 细胞培养第42-43页
        2.2.6 LIPOFECTAMIN 2000 转染第43页
        2.2.7 电穿孔细胞转染第43页
        2.2.8 CBFβ 敲除稳定表达细胞系的建立第43-44页
        2.2.9 Western blot第44页
        2.2.10 免疫共沉淀第44-45页
        2.2.11 流式细胞仪检测细胞周期第45页
        2.2.12 双荧光报告基因luciferase荧光素酶报告基因检测系统第45-46页
        2.2.13 细胞复苏及细胞培养第46-47页
第3章 结果与讨论第47-89页
    3.1 CBFβ 对于帮助Vif降解A3G以及RUNX1介导的转录调控的功能区的研究第47-60页
        3.1.1 CBFβ N端 1-126 氨基酸是能够帮助Vif降解A3G的最短功能区第47-50页
        3.1.2 CBFβ 1-130,能够调控RUNX1c介导的下游基因的转录第50-51页
        3.1.3 CBFβ 通过不同的功能区帮助Vif和RUNX1的功能第51-54页
        3.1.4 CBFβ Loop3的突变对于RUNX1c和Vif功能的影响第54-57页
        3.1.5 CBFβ 结构中其他的Loops的突变对于RUNX1c和Vif功能的影响第57-59页
        3.1.6 讨论第59-60页
        3.1.7 小结第60页
    3.2 CBFβ 对于Vif调控细胞周期功能的研究以及机制的初步探讨第60-71页
        3.2.1 CBFβ 对于Vif诱导G2/M细胞周期阻滞的功能是必须的。第60-63页
        3.2.2 Vif的点突变对于诱导细胞G2/M期阻滞功能的影响。第63-65页
        3.2.3 CBFβ 的点突变对于Vif恢复其细胞周期阻滞的功能的作用第65-67页
        3.2.4 蛋白酶抑制剂MG132能够抑制Vif诱导的G2/M细胞周期阻滞。第67-70页
        3.2.5 讨论第70页
        3.2.6 小结第70-71页
    3.3 在进化压力下,HIV-1 Vif蛋白在调控细胞周期G2/M期阻滞以及拮抗A3H的功能的选择性研究第71-89页
        3.3.1 拮抗A3H功能的Vif蛋白,不能够诱导细胞G2/M期阻滞。第71-74页
        3.3.2 能够诱导细胞G2/M期阻滞的Vif蛋白不能够拮抗A3H第74-76页
        3.3.3 Vif的N端48位的氨基酸对于细胞周期阻滞或者A3H降解的功能很重要第76-78页
        3.3.4 影响Vif细胞周期阻滞功能的关键位点第78-80页
        3.3.5 Vif蛋白结构中N端功能区对于诱导细胞周期G2/M阻滞以及拮抗宿主APOBEC抗病毒因子的两个功能很重要第80-82页
        3.3.6 Vif拮抗A3H hap II以及诱导细胞G2/M期阻滞功能的结构域第82-85页
        3.3.7 讨论第85-86页
        3.3.8 小结第86-89页
第4章 结论第89-91页
参考文献第91-101页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第101-104页
致谢第104页

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