| 摘要 | 第9-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 缩略词表（Abbreviation） | 第15-16页 |
| 第1章 文献综述 | 第16-33页 |
| 前言 | 第16-17页 |
| 1 抗菌肽的研究概况 | 第17-22页 |
| 1.1 抗菌肽的分类 | 第17页 |
| 1.2 抗菌肽的来源 | 第17-19页 |
| 1.3 抗菌肽的生物学功能 | 第19-21页 |
| 1.4 抗菌肽的应用前景 | 第21-22页 |
| 2 动物防御素的研究进展 | 第22-28页 |
| 2.1 动物防御素的定义与分类 | 第22-24页 |
| 2.2 防御素的生物学活性 | 第24-26页 |
| 2.2.1 抗微生物活性 | 第24-25页 |
| 2.2.2 抗肿瘤活性 | 第25页 |
| 2.2.3 免疫调节作用 | 第25-26页 |
| 2.2.4 在动物生殖中的作用 | 第26页 |
| 2.3 防御素抗微生物作用的机理 | 第26-28页 |
| 3 禽类防御素的研究进展 | 第28-32页 |
| 3.1 禽类防御素的分子结构 | 第28页 |
| 3.2 禽类防御素的进化 | 第28-29页 |
| 3.3 禽类防御素的组织分布与表达调控 | 第29-30页 |
| 3.4 禽类防御素的生物学活性 | 第30-32页 |
| 3.4.1 抗微生物活性 | 第30-31页 |
| 3.4.2 免疫调节作用 | 第31-32页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第32-33页 |
| 第2章 鸵鸟防御素基因的克隆和序列分析 | 第33-47页 |
| 引言 | 第33页 |
| 1 材料与方法 | 第33-39页 |
| 1.1 材料 | 第33-35页 |
| 1.1.1 实验动物 | 第33-34页 |
| 1.1.2 主要仪器设备 | 第34页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第34页 |
| 1.1.4 试剂配制 | 第34-35页 |
| 1.2 方法 | 第35-39页 |
| 1.2.1 取材 | 第35页 |
| 1.2.2 RNA提取 | 第35页 |
| 1.2.3 引物设计 | 第35-36页 |
| 1.2.4 RT-PCR扩增 | 第36-37页 |
| 1.2.5 PCR产物的回收与克隆 | 第37-38页 |
| 1.2.6 连接产物的转化与阳性克隆鉴定 | 第38页 |
| 1.2.7 序列测定与分析 | 第38-39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-44页 |
| 2.1 骨髓总RNA的提取 | 第39页 |
| 2.2 鸵鸟防御素的基因克隆 | 第39-40页 |
| 2.3 基因测序与同源性分析 | 第40-41页 |
| 2.4 氨基酸序列对比分析 | 第41-42页 |
| 2.5 进化树分析 | 第42-44页 |
| 2.6 基因的密码子偏好性分析 | 第44页 |
| 3 讨论 | 第44-47页 |
| 3.1 鸵鸟防御素的基因克隆 | 第44-45页 |
| 3.2 鸵鸟防御素氨基酸序列的特点 | 第45-46页 |
| 3.3 鸵鸟防御素与其他禽类防御素的进化关系 | 第46-47页 |
| 第3章 鸵鸟防御素的原核表达与抗血清制备 | 第47-61页 |
| 引言 | 第47页 |
| 1 材料与方法 | 第47-54页 |
| 1.1 材料 | 第47-50页 |
| 1.1.1 鸵鸟骨髓 | 第47-48页 |
| 1.1.2 主要仪器设备 | 第48页 |
| 1.1.3 菌株与质粒 | 第48页 |
| 1.1.4 主要试剂 | 第48-49页 |
| 1.1.5 试剂配制 | 第49-50页 |
| 1.2 方法 | 第50-54页 |
| 1.2.1 鸵鸟防御素基因的克隆与测序 | 第50页 |
| 1.2.2 基因的优化与人工合成 | 第50页 |
| 1.2.3 重组表达质粒的构建 | 第50-51页 |
| 1.2.4 连接产物转化 | 第51-52页 |
| 1.2.5 重组蛋白的诱导表达 | 第52页 |
| 1.2.6 SDS-PAGE蛋白凝胶电泳 | 第52页 |
| 1.2.7 重组蛋白的纯化与复性 | 第52-53页 |
| 1.2.8 重组蛋白抗菌活性鉴定 | 第53页 |
| 1.2.9 鸵鸟防御素抗血清的制备 | 第53-54页 |
| 1.2.10间接ELISA检测血清抗体的程序 | 第54页 |
| 2 结果与分析 | 第54-58页 |
| 2.1 鸵鸟Av BD2和Av BD7基因的序列优化 | 第54-55页 |
| 2.2 重组表达质粒的构建 | 第55-56页 |
| 2.3 重组蛋白的表达与纯化 | 第56-57页 |
| 2.4 重组蛋白抗菌活性检测 | 第57-58页 |
| 2.5 鸵鸟防御素抗血清的ELISA检测 | 第58页 |
| 3 讨论 | 第58-61页 |
| 3.1 禽类防御素的人工表达 | 第58-59页 |
| 3.2 鸵鸟防御素的原核表达 | 第59页 |
| 3.3 表达产物的抗菌活性 | 第59-60页 |
| 3.4 鸵鸟防御素多克隆抗体的制备 | 第60-61页 |
| 第4章 鸵鸟防御素AVBD2和AVBD7的组织分布研究 | 第61-75页 |
| 前言 | 第61-62页 |
| 1 材料与方法 | 第62-66页 |
| 1.1 试验材料 | 第62-63页 |
| 1.1.1 试验动物 | 第62页 |
| 1.1.2 主要仪器设备 | 第62页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第62页 |
| 1.1.4 试剂配制 | 第62-63页 |
| 1.2 试验方法 | 第63-66页 |
| 1.2.1 样品采集及处理 | 第63页 |
| 1.2.2 组织总RNA提取 | 第63页 |
| 1.2.3 引物设计 | 第63-64页 |
| 1.2.4 RT-PCR扩增 | 第64页 |
| 1.2.5 real time-PCR扩增 | 第64-65页 |
| 1.2.6 石蜡切片制备 | 第65页 |
| 1.2.7 免疫组化分析 | 第65-66页 |
| 2 结果与分析 | 第66-72页 |
| 2.1 鸵鸟防御素的RT-PCR扩增 | 第66-67页 |
| 2.2 real time-PCR扩增 | 第67-68页 |
| 2.3 免疫组化分析 | 第68-72页 |
| 3 讨论 | 第72-75页 |
| 3.1 鸵鸟防御素m RNA在不同组织中的表达 | 第72-73页 |
| 3.2 禽类防御素组织表达的影响因素 | 第73-74页 |
| 3.3 鸵鸟防御素在免疫器官中的分布 | 第74-75页 |
| 第5章 鸵鸟防御素的抗菌活性及稳定性 | 第75-83页 |
| 前言 | 第75-76页 |
| 1 材料与方法 | 第76-78页 |
| 1.1 试验材料 | 第76-77页 |
| 1.1.1 菌株 | 第76页 |
| 1.1.2 主要仪器设备 | 第76页 |
| 1.1.3 主要试剂及配制 | 第76-77页 |
| 1.2 试验方法 | 第77-78页 |
| 1.2.1 鸵鸟防御素成熟肽段的合成 | 第77页 |
| 1.2.2 鸵鸟防御素对常见病原菌的抗菌活性 | 第77页 |
| 1.2.3 盐离子浓度对鸵鸟防御素抗菌活性的影响 | 第77-78页 |
| 1.2.4 温度和p H对鸵鸟防御素抗菌活性的影响 | 第78页 |
| 2 结果与分析 | 第78-80页 |
| 2.1 鸵鸟防御素的抗菌活性 | 第78-79页 |
| 2.2 Na Cl浓度对鸵鸟防御素抗菌活性的影响 | 第79-80页 |
| 2.3 温度和p H对鸵鸟防御素抗菌活性的影响 | 第80页 |
| 3 讨论 | 第80-83页 |
| 3.1 鸵鸟防御素的抗菌活性 | 第80-81页 |
| 3.2 盐离子浓度、温度和p H对鸵鸟防御素抗菌活性的影响 | 第81-83页 |
| 全文结论 | 第83-84页 |
| 本研究的主要创新点 | 第84-85页 |
| 下一步研究计划 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-100页 |
| 附录1 个人简介 | 第100-101页 |
| 附录2 博士期间发表的论文 | 第101-102页 |
| 附录3 已提交的鸵鸟基因序列 | 第102-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
