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流行性乙型脑炎病毒单克隆抗体的制备与prM-E蛋白抗原捕获ELISA检测方法的建立

摘要第6-7页
Abstract第7-8页
英文缩略表第12-13页
第一章 引言第13-23页
    1.1 分子生物学第13-16页
        1.1.1 JEV结构与基因表达第13-14页
        1.1.2 JEV蛋白第14-15页
        1.1.3 JEV复制周期第15-16页
    1.2 流行病学第16-18页
        1.2.1 JE的流行现状第16-17页
        1.2.2 JE的传播和宿主第17-18页
    1.3 JE的防治第18-19页
    1.4 JE诊断方法第19-22页
        1.4.1 病毒分离鉴定第19-20页
        1.4.2 分子生物学方法第20页
        1.4.3 血清学方法第20-22页
    1.5 研究目的和意义第22-23页
第二章 JEV prM-E蛋白单克隆抗体的制备与鉴定第23-29页
    2.1 实验材料第23页
        2.1.1 实验动物与细胞第23页
        2.1.2 主要试剂第23页
        2.1.3 主要仪器与耗材第23页
    2.2 实验方法第23-26页
        2.2.1 JEV prM-E蛋白表达与纯化第23-24页
        2.2.2 小鼠免疫第24页
        2.2.3 细胞融合第24-25页
        2.2.4 克隆与筛选第25页
        2.2.5 单克隆抗体腹水的制备第25页
        2.2.6 单克隆抗体效价测定与亚类鉴定第25页
        2.2.7 单克隆抗体的Western blot分析第25页
        2.2.8 间接免疫荧光(IFA)鉴定第25-26页
        2.2.9 与西尼罗病毒交叉反应鉴定第26页
    2.3 实验结果第26-29页
        2.3.1 克隆与筛选第26页
        2.3.2 单克隆抗体效价测定与亚类鉴定第26-27页
        2.3.3 单克隆抗体的Western blot分析第27页
        2.3.4 间接免疫荧光(IFA)鉴定第27-28页
        2.3.5 与西尼罗病毒交叉反应鉴定第28-29页
第三章 JEV prM-E蛋白抗原捕获ELISA检测方法的建立第29-48页
    3.1 实验材料第29页
        3.1.1 病毒与主要试剂第29页
        3.1.2 主要仪器与耗材第29页
    3.2 实验方法第29-34页
        3.2.1 单克隆抗体的纯化与检测第29-30页
        3.2.2 单克隆抗体的辣根过氧化物酶标记第30-31页
        3.2.3 标准抗原的纯化与检测第31页
        3.2.4 抗原捕获ELISA方法的条件优化第31-33页
        3.2.5 酶标板保护液的优化第33页
        3.2.6 ELISA阴阳性临界值的确定第33页
        3.2.7 ELISA的重复性试验第33页
        3.2.8 ELISA的特异性试验第33-34页
        3.2.9 ELISA的敏感性试验第34页
        3.2.10 ELISA试剂盒的组装与保存期试验第34页
        3.2.11 ELISA试剂盒检测JEV亚单位疫苗抗原第34页
    3.3 实验结果第34-48页
        3.3.1 单克隆抗体的纯化与检测第34-35页
        3.3.2 标准抗原的纯化与检测第35页
        3.3.3 抗原捕获ELISA方法的条件优化第35-42页
        3.3.4 抗原捕获ELISA方法的建立第42页
        3.3.5 酶标板保护液的优化第42-43页
        3.3.6 ELISA阴阳性临界值的确定第43页
        3.3.7 ELISA的重复性试验第43-44页
        3.3.8 ELISA的特异性试验第44-45页
        3.3.9 ELISA的敏感性试验第45页
        3.3.10 ELISA试剂盒的组装与保存期试验第45-46页
        3.3.11 ELISA试剂盒检测JEV亚单位疫苗抗原第46-48页
第四章 讨论第48-50页
第五章 全文结论第50-51页
参考文献第51-58页
致谢第58-59页
作者简历第59页

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