摘要 | 第7-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
缩略词表(Abbreviation) | 第13-14页 |
1 前言 | 第14-25页 |
1.1 研究问题的由来 | 第14页 |
1.2 文献综述 | 第14-24页 |
1.2.1 猪繁殖与呼吸综合征 | 第14-15页 |
1.2.2 猪繁殖与呼吸综合征的流行病学特点 | 第15-16页 |
1.2.3 PRRSV的分子特征及理化特性 | 第16页 |
1.2.4 PRRSV的致病机理 | 第16-17页 |
1.2.5 补体系统 | 第17-20页 |
1.2.6 补体系统在病毒感染中的作用 | 第20-22页 |
1.2.7 补体系统与病毒互作研究进展 | 第22-23页 |
1.2.8 PRRSV感染机体后补体系统应答研究进展 | 第23-24页 |
1.3 研究目的和意义 | 第24-25页 |
2 材料与方法 | 第25-34页 |
2.1 材料 | 第25-27页 |
2.1.1 试验动物及样品 | 第25页 |
2.1.2 试剂 | 第25-26页 |
2.1.3 仪器设备 | 第26页 |
2.1.4 生物学数据库和网站 | 第26-27页 |
2.1.5 生物信息分析软件 | 第27页 |
2.2 方法 | 第27-34页 |
2.2.1 技术路线 | 第27页 |
2.2.2 获取通城与大白猪PAMs | 第27-28页 |
2.2.3 TRIzol法提取PAMs中的RNA及质量检测 | 第28页 |
2.2.4 转录组数据分析方法 | 第28-29页 |
2.2.5 定量引物设计与合成 | 第29-30页 |
2.2.6 Real Time qRT-PCR检测 | 第30-31页 |
2.2.7 猪血清的分离方法 | 第31页 |
2.2.8 ELISA检测血清中补体C3 的含量 | 第31-32页 |
2.2.9 免疫组化检测肺组织中补体C3d的含量 | 第32-33页 |
2.2.10 统计分析 | 第33-34页 |
3 结果 | 第34-43页 |
3.1 转录组测序分析 | 第34-35页 |
3.2 定量PCR验证补体差异表达基因关键因子 | 第35-39页 |
3.2.1 补体差异表达基因克隆与检测 | 第35-37页 |
3.2.2 通城猪与大白猪补体C4A和C3AR基因的表达变化 | 第37-38页 |
3.2.3 通城猪与大白猪补体CFP和CFH基因的表达变化 | 第38页 |
3.2.4 通城猪与大白猪补体CD55、CD59 与CLU基因的表达变化 | 第38-39页 |
3.3 免疫组化测定肺组织中补体C3d | 第39-40页 |
3.4 ELISA测定通城猪与大白猪血清中补体C3 含量 | 第40-43页 |
3.4.1 标准曲线的绘制 | 第40-41页 |
3.4.2 根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度 | 第41-43页 |
4 讨论 | 第43-46页 |
4.1 研究思路的相关讨论 | 第43页 |
4.2 补体系统转录组水平上的相关讨论 | 第43-44页 |
4.3 补体系统蛋白水平的相关讨论 | 第44-46页 |
5 小结 | 第46-47页 |
5.1 本研究的主要结论 | 第46页 |
5.2 本研究的创新点与特色 | 第46页 |
5.3 本研究的不足与进一步工作的建议 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-54页 |
附录 | 第54-56页 |
致谢 | 第56-57页 |