| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 前言 | 第8-19页 |
| 1.1 动物细胞培养技术及其应用 | 第8-10页 |
| 1.1.1 动物细胞培养技术的概述 | 第8-9页 |
| 1.1.2 影响细胞规模化生产产量的因素 | 第9-10页 |
| 1.1.3 动物细胞培养技术在肿瘤研究领域的应用 | 第10页 |
| 1.2 肝癌的概述 | 第10-12页 |
| 1.2.1 肝癌发展及现状 | 第10-11页 |
| 1.2.2 肝癌相关分子生物学发病机制及治疗 | 第11-12页 |
| 1.3 壳聚糖的概述 | 第12-13页 |
| 1.3.1 壳聚糖的简介 | 第12-13页 |
| 1.3.2 壳聚糖及其衍生物在抗肿瘤方面的应用 | 第13页 |
| 1.4 凋亡的概述 | 第13-16页 |
| 1.4.1 凋亡的简介 | 第13-14页 |
| 1.4.2 凋亡的特点 | 第14页 |
| 1.4.3 细胞凋亡的过程 | 第14-15页 |
| 1.4.4 细胞凋亡的靶向治疗 | 第15-16页 |
| 1.5 蛋白质组学在癌症生物学特性研究中的应用 | 第16-18页 |
| 1.5.1 蛋白质组学及其相关技术的概述 | 第16-17页 |
| 1.5.2 蛋白质组学在肝癌研究中的应用 | 第17-18页 |
| 1.6 本课题研究的内容及意义 | 第18-19页 |
| 1.6.1 研究内容 | 第18页 |
| 1.6.2 研究目的与意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-23页 |
| 2.1.1 实验试剂及药品 | 第19-20页 |
| 2.1.2 实验仪器与设备 | 第20-21页 |
| 2.1.3 实验用细胞株及硒酸壳聚糖制备 | 第21-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-37页 |
| 2.2.1 HepG2细胞株的日常维系 | 第23-24页 |
| 2.2.2 滚瓶培养条件的探究及优化 | 第24-26页 |
| 2.2.3 硒酸壳聚糖诱导HepG2细胞凋亡的研究 | 第26-29页 |
| 2.2.4 硒酸壳聚糖作用前后HepG2细胞蛋白差异变化 | 第29-37页 |
| 3 结果与讨论 | 第37-54页 |
| 3.1 HepG2细胞滚瓶培养条件 | 第37-41页 |
| 3.1.1 转速区间 | 第37页 |
| 3.1.2 培养基的用量 | 第37-38页 |
| 3.1.3 细胞接种的量 | 第38页 |
| 3.1.4 培养时间 | 第38-39页 |
| 3.1.5 培养基添加的方式 | 第39页 |
| 3.1.6 正交法优化培养条件 | 第39-41页 |
| 3.2 硒酸壳聚糖对HepG2细胞的生物活性的影响 | 第41-45页 |
| 3.2.1 硒酸壳聚糖对HepG2细胞的增殖抑制 | 第41页 |
| 3.2.2 电镜观察细胞形态变化 | 第41-42页 |
| 3.2.3 硒酸壳聚糖对HepG2细胞周期的影响 | 第42-43页 |
| 3.2.5 RH-123检测硒酸壳聚糖作用下细胞线粒体膜电位的变化 | 第43-44页 |
| 3.2.6 Annexin V-FITC/PI对硒酸壳聚糖诱导HepG2细胞凋亡的结果分析 | 第44-45页 |
| 3.3 硒酸壳聚糖作用后HepG2细胞蛋白变化 | 第45-54页 |
| 3.3.1 Brandford检测用于SDS-PAGE电泳的蛋白含量 | 第45-46页 |
| 3.3.2 SDS-PAGE凝胶电泳检测硒酸壳聚糖作用后HepG2细胞蛋白变化 | 第46-47页 |
| 3.3.3 Brandford检测用于2-DE电泳的全蛋白的测定 | 第47页 |
| 3.3.4 二维电泳凝胶图谱 | 第47-49页 |
| 3.3.5 差异表达蛋白的MALDI-TOF/TOF-MS质谱鉴定结果 | 第49-54页 |
| 4 结论 | 第54-55页 |
| 5 展望 | 第55-56页 |
| 6 参考文献 | 第56-63页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第63-64页 |
| 8 致谢 | 第64页 |
