| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 一、引言 | 第14-25页 |
| 1.1 棉纤维的发育研究进展 | 第14-17页 |
| 1.1.1 棉纤维发育过程 | 第14-16页 |
| 1.1.2 棉纤维发育的分子机制 | 第16-17页 |
| 1.2 油菜素内酯信号通路 | 第17-21页 |
| 1.2.1 油菜素内酯的发现 | 第17-18页 |
| 1.2.2 BR信号通路概述 | 第18-19页 |
| 1.2.3 BR信号通路的分子调控机制 | 第19-21页 |
| 1.3 BZR1简介 | 第21-23页 |
| 1.3.1 BZR1的结构 | 第21页 |
| 1.3.2 BZR1参与油菜素内酯信号通路转导 | 第21-23页 |
| 1.4 立题依据及研究意义 | 第23-25页 |
| 二、材料与方法 | 第25-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-26页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第25页 |
| 2.1.2 载体和菌种 | 第25页 |
| 2.1.3 化学试剂及工具酶 | 第25页 |
| 2.1.4 常用储存液 | 第25页 |
| 2.1.5 常用缓冲液 | 第25页 |
| 2.1.6 常用培养基 | 第25-26页 |
| 2.1.7 常用试剂盒 | 第26页 |
| 2.1.8 仪器设备 | 第26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-35页 |
| 2.2.1 GhBZR1基因及其编码蛋白质序列分析 | 第26页 |
| 2.2.2 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
| 2.2.3 表达载体的构建 | 第27-29页 |
| 2.2.3.1 目的片段的扩增及纯化 | 第27-28页 |
| 2.2.3.2 双酶切目的片段及表达载体 | 第28页 |
| 2.2.3.4 连接产物转化大肠杆菌 | 第28页 |
| 2.2.3.5 阳性菌落的检测 | 第28-29页 |
| 2.2.3.6 质粒的提取 | 第29页 |
| 2.2.3.7 质粒的检测 | 第29页 |
| 2.2.4 棉花实验材料的收取 | 第29页 |
| 2.2.5 棉花叶片DNA的提取 | 第29-30页 |
| 2.2.6 棉纤维RNA的提取、消化及逆转录 | 第30-31页 |
| 2.2.6.1 棉纤维RNA的提取 | 第30页 |
| 2.2.6.2 RNA样品的消化 | 第30-31页 |
| 2.2.7 实时荧光定量PCR | 第31-32页 |
| 2.2.8 酵母双杂交筛库 | 第32页 |
| 2.2.9 转录组 | 第32-33页 |
| 2.2.9.1 实验流程 | 第32-33页 |
| 2.2.9.2 生物信息分析流程 | 第33页 |
| 2.2.10 农杆菌介导的棉花遗传转化 | 第33-35页 |
| 三、实验结果 | 第35-55页 |
| 3.1 GhBZR1的生物信息学分析 | 第35-37页 |
| 3.1.1 GhBZR1序列分析 | 第35页 |
| 3.1.2 GhBZR1蛋白同源性分析 | 第35-36页 |
| 3.1.3 GhBZR1系统进化分析 | 第36-37页 |
| 3.2 GhBZR1基因在棉纤维发育中的作用 | 第37-44页 |
| 3.2.1 棉花遗传转化 | 第37-38页 |
| 3.2.2 T_0代转基因棉花植株检测鉴定 | 第38-39页 |
| 3.2.3 T_1代转基因棉花表型分析 | 第39-40页 |
| 3.2.4 T_2代转基因棉花表型分析 | 第40-44页 |
| 3.3 GhBZR1互作蛋白的筛选及相互作用验证 | 第44-49页 |
| 3.3.1 构建pGBKT7-GhBZR1载体 | 第44-46页 |
| 3.3.2 诱饵质粒转化酵母 | 第46页 |
| 3.3.3 转录自激活活性检测 | 第46-48页 |
| 3.3.4 GhBZR1的互作蛋白筛选鉴定 | 第48-49页 |
| 3.4 GhBZR1转基因棉花纤维的转录组分析 | 第49-55页 |
| 3.4.1 转录组样品的制备及检测 | 第49页 |
| 3.4.2 GhBZR1是BR介导的棉纤维发育过程中一个关键的转录因子 | 第49-51页 |
| 3.4.3 GhBZR1调控BR合成和信号相关的基因表达 | 第51-52页 |
| 3.4.4 GhBZR1在棉纤维伸长发育阶段调控包括细胞活动和生物过程在内的一个广泛的范围 | 第52-53页 |
| 3.4.5 BR信号与其他植物激素信号的交叉 | 第53-55页 |
| 四、讨论 | 第55-58页 |
| 4.1 不同物种间BZR1序列是保守的 | 第55页 |
| 4.2 GhBZR1促进棉纤维伸长发育 | 第55-56页 |
| 4.3 GhBZR1是棉花纤维细胞BR信号通路的主要调控因子 | 第56-57页 |
| 4.4 棉纤维细胞中BR信号通路与其它植物激素信号通路存在交叉作用 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 在校期间发表的论文 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
