| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第13-24页 |
| 1.1 泛素/26S蛋白酶体系统 | 第13页 |
| 1.2 泛素 | 第13-16页 |
| 1.2.1 泛素的结构 | 第14-15页 |
| 1.2.2 泛素的分布 | 第15页 |
| 1.2.3 泛素的种类 | 第15-16页 |
| 1.3 泛素启动酶系统 | 第16-18页 |
| 1.3.1 泛素活化酶（E1） | 第16-17页 |
| 1.3.2 泛素结合酶（E2） | 第17页 |
| 1.3.3 泛素连接酶（E3） | 第17-18页 |
| 1.4 26S蛋白酶体 | 第18-19页 |
| 1.5 泛素/26S蛋白酶体途径的功能 | 第19-21页 |
| 1.5.1 泛素/26S蛋白酶体途径与植物激素信号途径 | 第19-20页 |
| 1.5.2 泛素/26S蛋白酶体途径参与细胞周期调控 | 第20页 |
| 1.5.3 泛素/26S蛋白酶体途径参与生物的胁迫适应过程 | 第20-21页 |
| 1.6 植物启动子的研究进展 | 第21-23页 |
| 1.6.1 组成型启动子 | 第21-22页 |
| 1.6.2 诱导型启动子 | 第22页 |
| 1.6.3 组织特异性启动子 | 第22-23页 |
| 1.7 本研究的目的及意义 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-26页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第24页 |
| 2.1.2 小麦与短柄草的培养及处理 | 第24页 |
| 2.1.2.1 用于遗传转化的短柄草实验材料的培养 | 第24页 |
| 2.1.2.2 用于基因克隆与基因表达分析的小麦实验材料的处理 | 第24页 |
| 2.1.2.3 实验材料的处理 | 第24页 |
| 2.1.3 菌株与转化质粒 | 第24页 |
| 2.1.4 酶与生化试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.5 实验引物 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-40页 |
| 2.2.1 CTAB法提取短柄草基因组DNA | 第26页 |
| 2.2.2 Trizol法提取RNA | 第26-27页 |
| 2.2.3 反转录cDNA第一条链的合成 | 第27页 |
| 2.2.4 Ta-Ub2基因的克隆 | 第27-28页 |
| 2.2.5 琼脂糖凝胶回收 | 第28页 |
| 2.2.6 链接反应 | 第28页 |
| 2.2.7 大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第28-29页 |
| 2.2.8 菌落筛选 | 第29页 |
| 2.2.9 DNA序列测定 | 第29页 |
| 2.2.10 大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第29-30页 |
| 2.2.11 表达载体的构建 | 第30页 |
| 2.2.12 农杆菌转化 | 第30-31页 |
| 2.2.13 短柄草转化 | 第31-33页 |
| 2.2.13.1 愈伤组织诱导 | 第31页 |
| 2.2.13.2 农杆菌侵染愈伤组织 | 第31页 |
| 2.2.13.3 转基因植株的筛选与再生 | 第31-32页 |
| 2.2.13.4 转基因短柄草的PCR鉴定 | 第32页 |
| 2.2.13.5 荧光定量PCR | 第32-33页 |
| 2.2.14 蛋白杂交检测 | 第33-36页 |
| 2.2.14.1 植物总蛋白的提取 | 第33页 |
| 2.2.14.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第33-34页 |
| 2.2.14.3 半干法蛋白转移 | 第34-35页 |
| 2.2.14.4 封闭及杂交 | 第35-36页 |
| 2.2.15 生理指标测定 | 第36-39页 |
| 2.2.15.1 失水速率的测定 | 第36页 |
| 2.2.15.2 叶片相对含水量的测定 | 第36页 |
| 2.2.15.3 叶绿素含量的测定 | 第36页 |
| 2.2.15.4 土壤含水量的测定 | 第36-37页 |
| 2.2.15.5 叶片渗透势的测定 | 第37页 |
| 2.2.15.6 脯氨酸含量的测定 | 第37页 |
| 2.2.15.7 可溶性糖的测定（蒽酮法） | 第37-38页 |
| 2.2.15.8 DAB和NBT染色 | 第38页 |
| 2.2.15.9 过氧化氢含量的测定 | 第38页 |
| 2.2.15.10 超氧阴离子自由基的测定 | 第38页 |
| 2.2.15.11 丙二醛（MDA）的含量测定 | 第38-39页 |
| 2.2.15.12 抗氧化酶活性的测定 | 第39页 |
| 2.2.15.13 电导法测量植物电解质外渗 | 第39页 |
| 2.2.16 统计分析 | 第39-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-55页 |
| 3.1 Ta-Ub2序列系统进化分析 | 第40页 |
| 3.2 Ta-Ub2基因在小麦中的表达模式分析 | 第40-41页 |
| 3.2.1 Ta-Ub2基因在小麦不同部位的表达 | 第40-41页 |
| 3.2.2 Ta-Ub2基因对不同非生物胁迫处理的响应模式 | 第41页 |
| 3.3 转基因短柄草的获得 | 第41-44页 |
| 3.3.1 表达载体的构建 | 第41-42页 |
| 3.3.2 短柄草的遗传转化 | 第42-43页 |
| 3.3.3 转基因短柄草的筛选鉴定 | 第43-44页 |
| 3.4 转基因短柄草植株的表型分析 | 第44-45页 |
| 3.5 Ta-Ub2基因在短柄草逆境适应中的功能分析 | 第45-48页 |
| 3.5.1 转Ta-Ub2基因短柄草在干旱胁迫下的生长分析 | 第45-46页 |
| 3.5.2 过表达与诱导表达小麦Ta-Ub2基因对短柄草盐胁迫和低温胁迫耐性的影响 | 第46-48页 |
| 3.6 过表达与诱导表达小麦Ta-Ub2基因提高短柄草抗逆性的生理生化及分子机制分析 | 第48-50页 |
| 3.6.1 干旱胁迫下Ta-Ub2的过表达提高了短柄草多聚泛素蛋白的积累 | 第48-49页 |
| 3.6.2 干旱胁迫对转基因短柄草渗透调节能力的影响 | 第49-50页 |
| 3.7 过表达与诱导表达Ta-Ub2基因对转基因短柄草抗氧化能力的影响 | 第50-55页 |
| 3.7.1 干旱胁迫对转基因短柄草过氧化氢含量和超氧阴离子自由基产生速率的影响 | 第50-51页 |
| 3.7.2 干旱胁迫对转基因短柄草蛋白质羰基化水平及MDA含量的影响 | 第51-52页 |
| 3.7.3 干旱胁迫对转基因短柄草抗氧化酶活性的影响 | 第52-53页 |
| 3.7.4 干旱胁迫对转基因短柄草抗氧化酶相关基因及CBF转录因子基因表达的影响 | 第53-55页 |
| 4 讨论 | 第55-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第68页 |
