中文摘要 | 第3-4页 |
英文摘要 | 第4-5页 |
第一部分 研究背景 | 第8-20页 |
一、氧压力抗性与衰老的相关性 | 第8-9页 |
二、SKN-1 的研究进展 | 第9-15页 |
(一) SKN-1 蛋白的结构和表达模式 | 第9-11页 |
(二) SKN-1 对氧压力抗性及衰老的调控作用 | 第11-13页 |
(三) SKN-1 的磷酸化修饰对其功能的调控作用 | 第13-15页 |
三、PRMTS的研究进展 | 第15-18页 |
(一) PRMTs的发现和分类 | 第15-17页 |
(二) PRMT-1 的功能 | 第17-18页 |
四、本论文的研究内容和意义 | 第18-20页 |
(一)立题依据 | 第18-19页 |
(二)研究内容和意义 | 第19-20页 |
第二部分 实验材料与方法 | 第20-36页 |
一、实验材料 | 第20-21页 |
(一)实验线虫品系 | 第20页 |
(二)细菌菌株与载体 | 第20页 |
(三)主要试剂 | 第20-21页 |
(四)主要仪器 | 第21页 |
二、实验方法 | 第21-36页 |
(一)线虫培养及同期化处理 | 第21-22页 |
(二)线虫的RNAi处理 | 第22-23页 |
(三)寿命检测 | 第23-25页 |
(四)线虫杂交品系构建 | 第25页 |
(五) RT-PCR | 第25-28页 |
(六)质粒构建 | 第28-31页 |
(七) Western Blot检测 | 第31-32页 |
(八) IPTG诱导的原核蛋白的表达及纯化 | 第32-33页 |
(九) Gst-Pulldown | 第33-34页 |
(十)蛋白质免疫共沉淀(co-IP) | 第34页 |
(十一) 激光共聚焦检测荧光蛋白表达 | 第34-35页 |
(十二) 体外甲基化反应 | 第35-36页 |
第三部分 实验结果与分析 | 第36-44页 |
一、秀丽线虫体内SKN-1 的精氨酸存在非对称性二甲基化修饰 | 第36页 |
二、SKN-1 对线虫衰老及氧压力抗性的调控作用依赖于PRMT-1 | 第36-37页 |
三、SKN-1 与PRMT-1 能够相互结合 | 第37-38页 |
四、PRMT-1 对SKN-1 的484和 516 位精氨酸进行非对称二甲基化修饰 | 第38-39页 |
五、PRMT-1 影响氧压力条件下SKN-1 在线虫肠细胞核内的积累 | 第39-40页 |
六、PRMT-1 对SKN-1 入核及抗氧压力的调控过程与GSK-3 相关 | 第40-42页 |
七、PRMT-1对SKN-1入核及抗氧压力的调控过程与GSK-3相关 | 第42-44页 |
第四部分 讨论 | 第44-46页 |
主要结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-53页 |
致谢 | 第53页 |