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PRMT-1对秀丽线虫SKN-1的甲基化修饰影响氧压力抗性和衰老的研究

中文摘要第3-4页
英文摘要第4-5页
第一部分 研究背景第8-20页
    一、氧压力抗性与衰老的相关性第8-9页
    二、SKN-1 的研究进展第9-15页
        (一) SKN-1 蛋白的结构和表达模式第9-11页
        (二) SKN-1 对氧压力抗性及衰老的调控作用第11-13页
        (三) SKN-1 的磷酸化修饰对其功能的调控作用第13-15页
    三、PRMTS的研究进展第15-18页
        (一) PRMTs的发现和分类第15-17页
        (二) PRMT-1 的功能第17-18页
    四、本论文的研究内容和意义第18-20页
        (一)立题依据第18-19页
        (二)研究内容和意义第19-20页
第二部分 实验材料与方法第20-36页
    一、实验材料第20-21页
        (一)实验线虫品系第20页
        (二)细菌菌株与载体第20页
        (三)主要试剂第20-21页
        (四)主要仪器第21页
    二、实验方法第21-36页
        (一)线虫培养及同期化处理第21-22页
        (二)线虫的RNAi处理第22-23页
        (三)寿命检测第23-25页
        (四)线虫杂交品系构建第25页
        (五) RT-PCR第25-28页
        (六)质粒构建第28-31页
        (七) Western Blot检测第31-32页
        (八) IPTG诱导的原核蛋白的表达及纯化第32-33页
        (九) Gst-Pulldown第33-34页
        (十)蛋白质免疫共沉淀(co-IP)第34页
        (十一) 激光共聚焦检测荧光蛋白表达第34-35页
        (十二) 体外甲基化反应第35-36页
第三部分 实验结果与分析第36-44页
    一、秀丽线虫体内SKN-1 的精氨酸存在非对称性二甲基化修饰第36页
    二、SKN-1 对线虫衰老及氧压力抗性的调控作用依赖于PRMT-1第36-37页
    三、SKN-1 与PRMT-1 能够相互结合第37-38页
    四、PRMT-1 对SKN-1 的484和 516 位精氨酸进行非对称二甲基化修饰第38-39页
    五、PRMT-1 影响氧压力条件下SKN-1 在线虫肠细胞核内的积累第39-40页
    六、PRMT-1 对SKN-1 入核及抗氧压力的调控过程与GSK-3 相关第40-42页
    七、PRMT-1对SKN-1入核及抗氧压力的调控过程与GSK-3相关第42-44页
第四部分 讨论第44-46页
主要结论第46-47页
参考文献第47-53页
致谢第53页

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