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新型杀菌剂氰烯菌酯对禾谷镰刀菌的作用机制研究

致谢第6-8页
摘要第8-10页
ABSTRACT第10-11页
引言第14-16页
第一章 文献综述第16-32页
    1. 小麦赤霉病研究概况第16-30页
        1.1 赤霉病对粮食产量的危害第16-17页
        1.2 赤霉病对食品安全和生命健康的威胁第17-20页
        1.3 赤霉病菌的生物学特征第20-21页
        1.4 小麦赤霉病的流行规律第21-24页
        1.5 赤霉病菌和寄主互作机制第24-26页
        1.6 小麦赤霉病防控关键措施第26-30页
    2. 本研究的目的和意义第30-32页
第二章 实验材料与方法第32-63页
    1. 实验材料第32-33页
        1.1 菌株和载体第32-33页
        1.2 致病性实验供试植物第33页
    2. 实验方法第33-63页
        2.1 禾谷镰刀菌的培养与保存第33页
        2.2 禾谷镰刀菌基因组DNA小量制备第33页
        2.3 PCR技术第33-34页
        2.4 DNA琼脂糖凝胶电泳第34-35页
        2.5 PCR产物纯化回收第35页
        2.6 基因克隆技术第35-37页
        2.7 禾谷镰刀菌基因敲除载体的构建第37-38页
        2.8 禾谷镰刀菌基因回补载体的构建第38-41页
        2.9 PEG介导的禾谷镰刀菌原生质体遗传转化第41-43页
        2.10 禾谷镰刀菌紫外诱变第43页
        2.11 禾谷镰刀菌基因沉默的方法第43页
        2.12 禾谷镰刀菌基因组DNA大量提取(CTAB法)第43-44页
        2.13 禾谷镰刀菌基因组DNA Southern blot分析第44-49页
        2.14 禾谷镰刀菌总RNA的提取以及cDNA合成第49-50页
        2.15 基因组表达谱solexa测序第50-51页
        2.16 禾谷镰刀菌表型测定第51-55页
        2.17 酵母双杂交分析第55-56页
        2.18 Western blot印迹分析第56-59页
        2.19 蛋白免疫共沉淀第59-60页
        2.20 双标签的蛋白亲和捕获实验第60页
        2.21 Flag-Tag蛋白纯化第60-61页
        2.22 ATP酶活检测第61-62页
        2.23 稻瘟病菌附着胞诱导形成第62-63页
第三章 结果与分析第63-91页
    1. 氰烯菌酯的作用靶标鉴定和抗性机制研究第63-85页
        1.1 氰烯菌酯对禾谷镰刀菌和亚洲镰刀菌具有强烈的抑菌活性第63-64页
        1.2 氰烯菌酯对多数镰刀菌效果特异第64-66页
        1.3 转录组分析氰烯菌酯潜在的作用靶标第66-73页
        1.4 Ⅰ型肌球蛋白FgMyo1的点突变导致禾谷镰刀菌对氰烯菌酯的抗药性第73-75页
        1.5 禾谷镰刀菌获得稻瘟菌的Ⅰ型肌球蛋白MgMyo1后对氰烯菌酯变抗第75-78页
        1.6 Ⅰ型肌球蛋白FgMyo1是禾谷镰刀菌正常生命活动所必需第78-82页
        1.7 氰烯菌酯抑制Ⅰ型肌球蛋白FgMyo1的ATPase酶活性第82-83页
        1.8 小结与讨论第83-85页
    2. 氰烯菌酯抑制禾谷镰刀菌产毒机制研究第85-91页
        2.1 氰烯菌酯有效抑制禾谷镰刀菌合成DON毒素第85-86页
        2.2 诱导产毒条件下禾谷镰刀菌的菌丝形态与TRI蛋白定位第86-87页
        2.3 囊泡形成蛋白FgAbp1参与氰烯菌酯的作用途径第87-88页
        2.4 FgAbp1参与禾谷镰刀菌毒素体的形成第88-90页
        2.5 小结与讨论第90-91页
第四章 全文结论与后续工作展望第91-93页
    1. 全文结论第91-92页
    2. 后续工作展望第92-93页
参考文献第93-99页
附录第99-129页
    附录A:引物序列第99-120页
    附录B:培养基配方、常用试剂和实验仪器第120-129页
    附录C:作者简历及攻读博士期间发表论文第129页

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