| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6页 |
| 缩略词表 | 第7-11页 |
| 1. 前言 | 第11-33页 |
| 1.1 干旱对植物的影响 | 第11-16页 |
| 1.1.1 植物响应干旱的生理及分子机制 | 第12-14页 |
| 1.1.2 植物响应干旱胁迫的信号转导及相关途径 | 第14-16页 |
| 1.2 转录因子的结构特征 | 第16-23页 |
| 1.3 锌指蛋白的结构特征与分类 | 第23-27页 |
| 1.4 植物C2H2型锌指蛋白研究进展 | 第27-28页 |
| 1.5 种子萌发 | 第28-30页 |
| 1.5.1 种子萌发的过程 | 第28-29页 |
| 1.5.2 外界环境对种子萌发的影响 | 第29-30页 |
| 1.6 本研究的主要内容、目的和意义 | 第30-33页 |
| 2. 实验材料与方法 | 第33-51页 |
| 2.1 实验材料 | 第33-34页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第33页 |
| 2.1.2 菌株及载体 | 第33页 |
| 2.1.3 实验室主要仪器 | 第33-34页 |
| 2.1.4 实验室所用主要试剂和酶 | 第34页 |
| 2.2 实验方法 | 第34-48页 |
| 2.2.1 转基因植株载体的构建 | 第34-39页 |
| 2.2.2 转基因植株的获得 | 第39-41页 |
| 2.2.3 亚细胞定位实验 | 第41-42页 |
| 2.2.4 GUS染色 | 第42-43页 |
| 2.2.5 T-DNA插入突变体材料鉴定 | 第43页 |
| 2.2.6 酵母双杂 | 第43-45页 |
| 2.2.7 拟南芥的培养方法 | 第45页 |
| 2.2.8 蛭石模拟土壤干旱胁迫实验 | 第45-46页 |
| 2.2.9 干旱相关生理指标实验 | 第46-47页 |
| 2.2.10 RNA-seq数据分析 | 第47-48页 |
| 2.3 实验使用的引物信息 | 第48-51页 |
| 2.3.1 突变体鉴定引物 | 第48页 |
| 2.3.2 转基因载体构建及检测所需引物 | 第48-49页 |
| 2.3.3 酵母双杂所需引物 | 第49页 |
| 2.3.4 RNA-seq数据差异基因验证所需引物 | 第49-51页 |
| 3. 实验结果与分析 | 第51-79页 |
| 3.1 锌指蛋白ZAT18的表达模式 | 第51-54页 |
| 3.1.1 锌指蛋白ZAT18在非生物胁迫中的诱导表达 | 第51-52页 |
| 3.1.2 锌指蛋白ZAT18的亚细胞定位 | 第52-53页 |
| 3.1.3 GUS组织化学染色 | 第53-54页 |
| 3.2 转录因子ZAT18的自激活检测 | 第54-55页 |
| 3.3 NaCl和Mannitol对过表达ZAT18植株种子萌发的影响 | 第55-61页 |
| 3.3.1 过表达ZAT18植株的获得 | 第55-57页 |
| 3.3.2 不同NaCl浓度对过表达ZAT18种子萌发率与子叶变绿的影响 | 第57-59页 |
| 3.3.3 不同Mannitol浓度对过表达ZAT18种子萌发率与子叶变绿的影响 | 第59-61页 |
| 3.4 过表达ZAT18增强植物的抗旱性 | 第61-67页 |
| 3.4.1 过表达ZAT18植株抗旱表型分析 | 第61-62页 |
| 3.4.2 干旱胁迫下野生型和过表达ZAT18植株水分状态和细胞膜损伤的比较 | 第62-64页 |
| 3.4.3 干旱胁迫条件下野生型和过表达ZAT18植株丙二醛含量的变化 | 第64-65页 |
| 3.4.4 过表达ZAT18降低干旱胁迫中ROS的积累 | 第65-66页 |
| 3.4.5 过表达ZAT18降低干旱胁迫中抗氧化物酶活性的变化 | 第66-67页 |
| 3.5 zat18突变体对干旱胁迫轻度敏感 | 第67-70页 |
| 3.5.1 zat18突变体结构及"三引物法"PCR鉴定纯合体 | 第67-68页 |
| 3.5.2 zat18突变体抗旱表型分析 | 第68-69页 |
| 3.5.3 干旱胁迫下zat18突变体与野生型水分状态和细胞膜损伤的比较 | 第69-70页 |
| 3.6 干旱胁迫下转基因ZAT18植株与野生型转录组数据分析 | 第70-72页 |
| 3.7 GO富集及Pathway分析 | 第72-74页 |
| 3.8 ZAT18互作的候选基因的挑选 | 第74-75页 |
| 3.9 ZAT18互作的候选基因的验证 | 第75-76页 |
| 3.10 ZAT18互作候选基因motif分析 | 第76-79页 |
| 4. 讨论 | 第79-81页 |
| 5. 结论 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-99页 |
| 附录 | 第99-147页 |
| 作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第147-149页 |
| 致谢 | 第149页 |
